帕金森病患者唾液中α-syn、DJ-1、HO-1、AchE水平变化及其辅助诊断价值

雷 蕾,王文哲

陕西省延安大学咸阳医院神经内科,陕西咸阳 712000

帕金森病,又称震颤麻痹,是一种常见的中老年神经系统变性疾病,主要表现为静止性或运动性手、头及嘴的不自主运动,以及自主神经功能紊乱症状,多见于65岁以上人群[1]。目前临床治疗帕金森病的主要原则为对症治疗,但由于帕金森病为不可逆、进行性疾病,目前临床尚无治愈方法,因此早期诊断并给予及时干预有助于延缓帕金森病的发展,对改善患者预后尤为重要[2]。目前帕金森病的诊断基于临床病史、症状和体征的回顾、神经系统检查,以及排除其他疾病诊断,但仍有超过45%的帕金森病患者在疾病早期可能被误诊[3]。唾液检测是一种新兴的、热门的医学检查方法,具有取材方便、成本低廉等多种优势,有助于神经系统疾病的辅助诊断与早期预警。既往研究发现,帕金森病患者唾液中α-突触核蛋白(α-syn)、DJ-1水平呈明显异常,可能介导帕金森病的发生及发展[4]。血红素加氧酶-1(HO-1)是氧化应激敏感指标,其水平的升高反映脑黑质存在氧化应激情况[5]。乙酰胆碱酯酶(AchE)水平由β受体调控,其水平与交感神经活性密切相关,可能参与机体自主神经病变[6]。本研究旨在分析帕金森病患者唾液中α-syn、DJ-1、HO-1、AchE水平变化及其辅助诊断价值。现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2021年8月至2022年8月本院收治的帕金森病患者96例作为帕金森病组,另选取同期于本院健康查体中心查体的健康人群80例作为健康对照组。帕金森病组男46例,女50例;平均年龄(61.08±9.45)岁。健康对照组男36例,女44例;平均年龄(60.52±6.85)岁。纳入标准:(1)符合临床关于帕金森的诊断标准[7];(2)年龄为45～75岁。排除标准:(1)诊断为继发性帕金森病;(2)合并重要器官严重功能障碍;(3)合并恶性肿瘤;(4)合并认知功能减退疾病;(5)合并其他神经系统疾病;(6)合并内分泌系统疾病。两组性别、年龄比较,差异均无统计学意义(P>0.05),具有可比性。帕金森病组患者根据蒙特利尔认知量表(MoCA)评分分为合并认知障碍组(MoCA评分<26分)和无认知障碍组(MoCA评分≥26分)。所有患者及家属知情同意并签署知情同意书。本研究经医院医学伦理委员会批准同意(WYKQ21524)。

1.2方法 采用被动流口水法采集两组受检者唾液标本,采集前禁食1 h、禁酒12 h,唾液标本在4 ℃环境下以2 600 r/min离心15 min,取上清液放入-80 ℃冰箱中冷冻保存。采用 Uranus AE275全自动酶联免疫分析仪(酶联免疫吸附试验)检测所有受检者唾液中HO-1、α-syn、DJ-1水平,采用酶比色法检测所有受检者唾液中AchE水平。

2 结 果

2.1健康对照组和帕金森病组唾液指标水平比较 帕金森病组患者唾液α-syn、DJ-1、HO-1水平低于健康对照组, AchE水平高于健康对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 健康对照组和帕金森病组唾液指标水平比较

2.2合并认知障碍组和无认知障碍组唾液指标水平比较 合并认知障碍组有32例,无认知障碍组有64例。合并认知障碍组患者唾液α-syn、DJ-1、HO-1水平低于无认知障碍组, AchE水平高于无认知障碍组,差异均有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 合并认知障碍组和无认知障碍组唾液指标水平比较

2.3唾液指标单独及联合检测诊断帕金森病的效能 α-syn、DJ-1、HO-1、AchE单独检测诊断帕金森病的曲线下面积(AUC)分别为0.723、0.781、0.816、0.671,4项指标联合诊断帕金森病的AUC为0.876。见表3、图1。

图1 唾液指标单独及联合检测诊断帕金森病的ROC曲线

表3 唾液指标单独及联合检测诊断帕金森病的效能

3 讨 论

帕金森病是常见的慢性进展性疾病,早期多无明显表现,随着病情发展逐渐出现肢体震颤、肌肉僵直等症状,严重影响患者日常生活。由于其发病机制尚未完全明确,目前临床上针对不同类型帕金森病的治疗方案也各不相同。近年来65岁以上人群的帕金森病发病率为1.7%,且呈年轻化趋势发展,严重影响患者的生活质量[8]。帕金森病的病因尚未明确,目前的研究倾向于该疾病的发生与年龄增长、遗传及环境等综合因素有关。临床尚无完全根治的方法,因此早期诊断并给予干预有助于减轻患者症状、改善患者生活质量。

目前临床诊断帕金森病的主要方式为影像学技术,可有效反应疾病进展及可能出现的治疗并发症,但影像学技术存在辐射暴露、成本高等缺点,同时影像学技术无法作为筛查手段,因此寻找一种早期辅助诊断帕金森病的方式至关重要。唾液标本检查相对于其他检查方式,具有无创、易收集、可重复检测等优点,可作为筛查帕金森病的手段。DJ-1是氧化应激传感器和抗氧化剂,主要表达于丘脑、脑黑质及海马等神经元,可通过介导NRF2、p53等多种基因发挥抵抗氧化应激作用[9]。有研究表明,在帕金森病中DJ-1可通过多种机制保护多巴胺能神经元[10]。α-syn属于突触核蛋白家族成员之一,可在脑黑质、大脑皮质及海马等部位中表达,可调节神经元细胞膜稳定性,参与线粒体功能障碍。有研究表明,在帕金森病患者血液和脑脊液中可检测到路易体,而其主要成分为聚集的α-syn[11],这提示α-syn参与了帕金森病患者内环境的改变,与吉家日等[12]研究结果相符,该研究认为血清α-syn可能是帕金森病患者伴抑郁状态的生物标志物之一,同时血清α-syn水平升高与运动功能损害有关。HO-1可介导清除自由基及生成CO及铁离子参与抑制氧化应激,减轻线粒体损伤,具有一定神经元细胞保护作用。已有研究通过动物实验证实,上调HO-1水平在帕金森病患者中具有神经保护作用,可能成为潜在的治疗靶标[13]。AchE是由胆碱酯酶分解生成的神经递质,可参与记忆的形成,当胆碱能神经损伤时可表现为其水平升高。本研究结果显示,帕金森病组唾液α-syn、DJ-1、HO-1水平低于健康对照组,AchE水平高于健康对照组,差异均有统计学意义(P<0.05),说明α-syn、DJ-1、HO-1、AchE可能参与了帕金森病的发生和发展,监测各指标水平对评估帕金森病发生及发展有一定临床价值。

近年来,帕金森病的非运动性症状已得到国内外广泛的关注和重视,认知障碍是非运动性症状的主要类型,包括帕金森病轻度认知障碍和帕金森病痴呆,这是影响患者生活质量,加速疾病进展和增加家庭、社会经济负担的重要原因。临床研究报道α-syn可以促进tau蛋白毒性低聚体的产生,引起纤维状淀粉样蛋白的形成,导致淀粉样斑块形成并参与认知障碍[14]。有研究认为,AchE和多巴胺之间存在平衡,这种平衡是运动控制的主要特点。帕金森病的病理学中多巴胺缺乏可触发动力学中平衡的严重倾斜,导致运动和认知障碍的产生,以及胆碱能系统失衡[15]。本研究结果显示,合并认知障碍组患者唾液α-syn、DJ-1、HO-1水平低于无认知障碍组, AchE水平高于无认知障碍组,差异均有统计学意义(P<0.05)。提示α-syn、DJ-1、HO-1、AchE可能参与帕金森患者认知功能障碍的发生。本研究的ROC曲线分析结果显示,α-syn、DJ-1、HO-1、AchE 4项指标联合诊断帕金森病的AUC为0.876。提示α-syn、DJ-1、HO-1、AchE可作为辅助诊断帕金森病的有效指标,有助于早期辅助诊断帕金森病,帮助医师指导治疗方案及给予有效干预手段,但辅助诊断的灵敏度和特异度相对较低,尚有提升的空间。

综上所述,帕金森病患者唾液中α-syn、DJ-1、 HO-1、AchE水平呈明显异常,与患者认知功能改变存在一定相关性,4项指标联合辅助诊断的效能最高。唾液检测也存在一个很大的劣势,即尚缺乏特异性的、标准化的方法,使用唾液来辅助诊断帕金森病可能还需要进一步的探索和研究,目前的结果还无法大规模在临床上使用,未来将扩大实验对象及延长研究时间再次进行深入探究。