活动性肺结核患者淋巴细胞变化及诊断价值

杨 扬 杨 慧

安阳市第三人民医院(河南 安阳 455000)

肺结核是一种慢性感染性疾病,主要致病菌是结核分歧杆菌,在肺结核患者中,约8%会发展为活动性结核[1]。随着医学技术的快速发展,肺结核在诊断治疗方面取得了巨大进步,但随着人口流动性的增加,肺结核在传播方面未得到有效控制,控制其传播需依赖有效的诊断及检测方法,临床常用的微生物检查、胸部影像学检查等方法均具有较大局限性,临床急需能够辅助诊断活动性肺结核的新指标[2-3]。有研究表明[4],活动性肺结核的病情与淋巴细胞的功能状态密切相关,淋巴细胞的免疫学检测在诊断活动性肺结核方面具有较大潜力,但相关研究鲜少,故本研究选取了85例活动性肺结核患者,旨在探究活动性肺结核患者淋巴细胞变化及诊断价值。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2018年2月至2019年2月期间安阳市第三人民医院检验科收治的活动性肺结核患者85例。纳入标准:(1)患者均符合活动性肺结核诊断标准[5];(2)无抗结核药物治疗史;(3)近2个月内未服用免疫抑制剂;(4)无认知障碍,可进行正常沟通交流;排除标准:(1)患血液系统疾病或免疫系统疾病者;(2)年龄<18岁;(3)严重肝肾功能不全者;(4)合并其他肺部感染者;(5)哺乳期或妊娠期妇女;(6)患精神疾病者;(7)伴恶性肿瘤者;(8)不配合研究者。另选取同时期体检的85例非活动性结核患者,两组性别、年龄、体质指数(BMI)等基线资料无统计学差异(P>0.05),见表1。

表1 两组患者一般资料对比

活动性肺结核诊断标准[6]:肺部影像学提示肺部感染,痰培养、痰涂片或活组织检查显示γ-干扰素释放试验(IGRA)阳性、抗酸杆菌阳性、血清半乳甘露聚糖(GM)抗原检测试验阴性确诊。

1.2研究方法 使用寰熙医疗公司生产的XF-1600型流式细胞仪,采集所有研究对象空腹外周血5ml,放入EDTA-K2(乙二胺四乙酸二钾)真空采集管中待检,取0.1ml抗凝血加入流式上样管中,再加入20μl荧光抗体进行标记,混匀,37℃避光反应20min后加入10%溶血素,混匀,再次37℃避光反应12min至液体透亮,将样本加入离心机中离心5min(转速:1500r/min),弃去上清液,向上样管内加入1mlPBS(磷酸盐缓冲液),混匀,再次将样本加入离心机中离心5min(转速:1500r/min),弃去上清液,向上样管内加入0.5mlPBS,混匀,将样本加入流式细胞仪中对淋巴细胞亚群进行检测。检测均由同组医生完成,检测过程严格按照说明书执行。

2 结果

2.1两组患者T淋巴细胞群变化比较 活动性肺结核组CD3+、CD4+、CD4+/CD8+低于非活动性肺结核组(P<0.05),CD8+高于非活动性肺结核组(P<0.05),见表2。

表2 两组患者T淋巴细胞变化比较

2.2T淋巴细胞变化在活动性肺结核中的诊断价值 CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+诊断活动性肺结核的AUC分别为0.859、0.845、0.796、0.873,具有较高特异度和敏感度,(P<0.05)见表3。

图1 CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+诊断活动性肺结核的ROC曲线

表3 淋巴细胞变化在活动性肺结核中的诊断价值

3 讨论

据流行病学统计,在所有传染病死因中,结核病位居第一[7],其主要原因之一是缺少有效地诊断方法。临床有效诊断结核感染的方法是γ-干扰素释放试验,但无法准确区分潜伏性结核和活动性结核[8]。何丽丽等[9]研究显示,肺结核的发生、发展及转移过程与患者自身的免疫功能密切相关,肺结核的致病菌结核分歧杆菌是一种胞内寄生菌,能够对机体产生持续细胞免疫应答。血液中的淋巴细胞在细胞免疫中起到非常重要的作用,淋巴细胞分化成不同亚型细胞并分泌出免疫因子,提高机体抗感染能力,达到保护机体的目的[10]。

本研究结果显示,活动性肺结核组CD3+、CD4+、CD4+/CD8+低于非活动性肺结核组(P<0.05),活动性肺结核组CD8+高于非活动性肺结核组;提示了活动性肺结核患者淋巴细胞水平发生明显变化。在CD4+是一种辅助性/诱导性T淋巴细胞,通过产生β细胞生长因子,诱导β细胞分化为浆细胞,起到抑制抗体形成的作用[11]。刘慧君等[12]人研究指出,结核患者CD4+淋巴细胞水平及功能状态显著降低,与本研究结果相符。CD3+在细胞免疫应答过程中起到重要作用,活动性肺结核患者CD3+水平下降可能原因为,机体受结核分歧杆菌感染后CD3+分化,分泌免疫因子而被大量消耗[14]。CD8+能溶解感染后无免疫活性的靶细胞,可调节机体免疫功能,增强机体识别和清除结核分歧杆菌能力,对机体起到保护作用[15]。刘双红等[16]研究表明,活动性肺结核发生进展过程会诱导CD8+增殖分化,是CD8+淋巴细胞水平显著升高,于本研究结果相符。ROC曲线分析结果显示,CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+诊断活动性肺结核的AUC分别为0.859、0.845、0.796、0.873,且具有较高特异度和敏感度,提示了活动性肺结核患者淋巴细胞水平变化在诊断活动性肺结核中具有较高价值,临床可根据患者淋巴细胞构成改变,判断免疫功能是否正常,作为辅助诊断活动性肺结核的一项重要指标。因病原学确诊难度较大,且本研究样本数较少,具有一定局限性,对活动性肺结核淋巴细胞的变化在肺结核诊断及治疗中价值有待进一步探究。

综上,活动性肺结核患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平显著降低,CD8+水平显著升高,淋巴细胞变化对活动性肺结核具有较高诊断价值。