血清中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白在宫颈肿瘤鉴别诊断中的临床意义分析

王晓晨 蔡梦珊 林向华 罗玲

宫颈癌是女性生殖系统发病率第一位的恶性肿瘤，中国每年新增宫颈癌病例约14 万例，其中3.7 万例死亡［1］。宫颈上皮内瘤变（Cervical intraepithelial neoplasia，CIN）是宫颈癌的癌前病变，其可能消退、保持或进展为宫颈癌［2］。宫颈癌和CIN 的临床表现相似，但宫颈癌和CIN 的治疗方法有很大不同［1，2］，因此，宫颈癌和CIN 的鉴别诊断非常重要。目前宫颈癌和CIN 的诊断主要依靠液基细胞学检査、阴道镜检査和组织病理学检査等［2-3］；血清标志物则具有方便、快速和微创等特点，可为疾病的诊断提供有力的补充。中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（Neutrophilgelatinase-associated lipocalin，NGAL）是从中性粒细胞中发现的一种脂蛋白，研究发现其可以在肿瘤的发生发展起重要作用，是目前临床各科室的研究热点［4］。本研究旨在分析血清NGAL 用于宫颈肿瘤疑似病例中宫颈癌和CIN 的鉴别诊断的可行性和临床价值，以期为宫颈肿瘤的鉴别诊断提供新的辅助工具。

1 临床资料

1.1 一般资料本研究于2022 年6 月至2023 年1月间收集研究对象：在中山大学孙逸仙纪念医院因不规则阴道流血、接触性出血、阴道排液、白带异常和宫颈糜烂等宫颈肿瘤相关症状就诊，且病理证实为宫颈癌或CIN，并在治疗或手术前留取了血清样本的患者；排除标准：妊娠患者、合并宫颈癌和CIN 以外其他肿瘤或严重器质性疾病的患者。研究对象一般资料：宫颈癌患者60 例（鳞癌48 例，腺癌12 例；I 期29 例，II 期18 例，III 期9 例，IV 期4 例），中位年龄52.5（41.3，58.0）岁；CIN 患者49 例（低级别5 例，高级别44 例），中位年龄41.0（33.5，51.5）岁；宫颈癌组中位年龄显著高于CIN组（P＜0.05）。本研究已获得中山大学孙逸仙纪念医院医学伦理委员会批准并豁免知情同意（SYSKY-2023-499-01）。

1.2 方法将患者治疗或手术前清晨空腹用无抗凝剂采血管采集的静脉血静置30 min 后以3000 r/min 离心5 min 分离血清；血清NGAL 使用深圳上泰生物工程有限公司生产的试剂盒在贝克曼AU5800 全自动生化分析仪上用胶乳免疫比浊法检测，检测过程严格按照试剂盒的说明书进行。

1.3 统计学分析符合正态分布的连续变量以（±s）表示，采用t检验进行两组间均值的比较；不符合正态分布的连续变量以中位数（四分位数）表示，采用Mann-Whitney U 检验进行两组间均值的比较；三组及以上同时进行均值的比较时使用方差分析（有数据不符合正态分布时使用Kruskal-Wallis 检验）；使用受试者工作特征曲线（ROC）及曲线下面积（AUC）评价诊断效能，最佳诊断界值（Cut-off 值）以尤登指数（Yoden index，灵敏度+特异度-1）最大确定；统计分析用SPSS 23.0 软件进行，P值小于0.05 被认为具有统计学意义。

2 结 果

2.1 血清NGAL 在宫颈癌和CIN 中的水平和鉴别诊断的效能宫颈癌患者血清NGAL 水平显著低于CIN 患者（P=0.0291），详见表1。血清NGAL 可用于宫颈癌和CIN 的鉴别诊断，其诊断效能（AUC）、最佳诊断界值以及相应的诊断灵敏度和特异度见表1，ROC 曲线见图1。

表1 血清NGAL 在宫颈癌和CIN 中的水平和诊断效能

图1 血清NGAL 诊断宫颈癌和CIN 的ROC 曲线分析

2.2 宫颈癌病理分型和分期对血清NGAL水平的影响 血清NGAL 水平在宫颈鳞癌和腺癌之间，以及在宫颈癌不同分期之间均未发现显著差异（P＞0.05）。此结果提示，宫颈癌患者血清NGAL 水平不受鳞癌和腺癌以及疾病分期的影响。

3 讨 论

宫颈癌是发生在宫颈上皮的恶性肿瘤，CIN 是宫颈癌的癌前病变［1-2］。低级别CIN 大多自然消退，高级别CIN 中12%-22%可能会进展或发展为癌［2］。宫颈癌的高发年龄为45-50 岁［5］，CIN 的高发年龄为26-45 岁［6］，CIN 的高发年龄低于宫颈癌；宫颈癌的治疗方法主要为手术治疗、放疗和化疗［1］，CIN 的治疗方法则有定期随访、药物治疗、微波、激光、冷冻、宫颈环形电切术（LEEP）和锥切术等［2］。

表2 宫颈癌病理分型和分期对血清NGAL 水平的影响

NGAL 是脂蛋白的一种，最早在中性粒细胞中发现，主要表达于中性粒细胞、巨噬细胞和脂肪细胞，在结肠、肾、胃和肝等组织中少量表达［4，7］。研究显示，NGAL 与免疫应答、脂质代谢、细胞分化及凋亡、胚胎发育、炎症反应、氧化应激和组织重构等生理活动均密切相关，目前NGAL 常被视为急性肾损伤的标志物［7］。近年来研究显示，NGAL 也是一种癌基因，可影响癌细胞的增殖、侵袭和迁移等过程，在包括宫颈癌在内的多种肿瘤组织中都有NGAL 基因的异常高表达［8］。在血清中，NGAL可与基质金属蛋白酶9（Matrix metalloproteinase 9，MMP-9）结合形成复合物［7］；MMP-9 可降解靠近肿瘤表面的细胞外基质和基底膜，促进瘤细胞沿着缺失的基底膜向周围组织浸润，MMP-9 还可以通过促进细胞外基质释放血管内皮细胞生长因子而促进新生血管的形成［7］；NGAL 与MMP-9 结合形成复合物后能够保护MMP-9 并能稳定和增强MMP-9的酶活性［7］。本研究发现宫颈癌患者血清NGAL水平显著低于CIN 患者，根据NGAL 的生物学特性推测，这一现象可能的原因之一是恶性肿瘤的情况下血液中有更多NGAL 与MMP-9 形成了复合物并促进了恶性肿瘤的发生和发展。此外，关于血清NGAL 与宫颈肿瘤之间的关系和机制还需要更多的研究。

目前可区分宫颈癌和CIN 的血清标志物有鳞状细胞癌抗原（SCCA）、癌胚抗原（CEA）、糖类抗原125（CA125）、糖类抗原199（CA199）和细胞角蛋白21-1（CYFRA21-1）等，其中，SCCA 对鳞状细胞癌较为特异，CA125、CA199 和CEA 则在腺癌检测中更具有价值［9］。宫颈癌病理类型中鳞癌约70%，腺癌约25%，其他病理类型极为少见［10］。本研究发现血清NGAL 水平不受宫颈鳞癌和腺癌以及宫颈癌分期的影响，这可能成为NGAL 相较传统血清标志物的潜在优势。

综上所述，本研究结果显示，血清NGAL 作为新型标志物用于宫颈肿瘤疑似患者中宫颈癌和癌前病变的辅助鉴别诊断具有可行性和一定的临床价值。