食物特异性IgG抗体与桥本甲状腺炎相关性的研究

王迎秋, 卢 蕾, 鲍彩丽, 张晓峰

(1. 同济大学附属杨浦医院核医学科,上海 200090; 2. 同济大学附属杨浦医院临床营养科,上海 200090)

产生针对食物抗原的IgG抗体是健康个体正常免疫反应的一部分,食物不良反应之一食物不耐受是机体的免疫系统针对某种或多种食物发生的过度保护性免疫反应,食物颗粒与食物特异性IgG抗体形成免疫复合物,可引起所有组织发生炎症反应,从而影响机体多系统、器官的功能[1-2],如胃肠道症状、荨麻疹、鼻炎等[3],目前对食物不耐受的研究已成为各国学者的研究热点之一。桥本甲状腺炎(Hashimoto thyroiditis, HT)是一种常见的自身免疫性甲状腺疾病,其特点为淋巴细胞浸润和甲状腺组织的进行性破坏,最终导致甲状腺功能减退,因目前不能从根本上治愈HT,使得患者感觉很困惑及无助。Fasano[4]发现发生自身免疫性疾病的3种因素: 特定基因、特定触发因素以及干扰免疫系统自我调节能力的肠道渗透性改变(漏肠),漏肠会导致食物通过肠壁直接进入宿主,产生特异性IgG抗体,引起机体的自身免疫性疾病的发生,因此本研究观察HT患者食物特异性IgG抗体存在的情况,并分析二者之间的相关性,期望为HT的诊治提供新的思路。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2022年6月—2022年9月在同济大学附属杨浦医院确诊为HT患者96例为HT组,诊断标准[5]: 基于临床特点,血清甲状腺过氧化物酶抗体(thyroid peroxidase antibody, TPOAb)和甲状腺球蛋白抗体(thyroglobulin antibody, TGAb)阳性,其中男19例,女77例,年龄17-88岁,平均年龄(56.60±17.21)岁,依据TPOAb结果分为轻(≤100 IU/mL)、中(101-300 IU/mL)、高(>300 IU/mL)3组,每组各32例,并选取同时期甲状腺功能及TPOAb、TGAb正常的健康体检者30名为对照组,男9例,女21例,年龄11-84岁,平均年龄(60.73±17.36)岁。所有人员均无胃肠道疾病及相关症状,均签署知情同意书,本研究方案通过同济大学附属杨浦医院伦理委员会审批(伦理编号: LL-2023-LW-005)。

1.2 食物特异性IgG抗体检测

所有受试者于清晨空腹采集静脉血5 mL,离心(离心半径20 cm,3 500 r/min,10 min)后取血清进行酶联免疫吸附试验法进行测定,使用仪器为北京普朗新技术有限公司生产的DNM-9602酶标分析仪,试剂盒为江苏浩欧博生物医药股份有限公司生产的食物特异性IgG抗体检测试剂盒。检测项目为牛肉、鸡肉、鳕鱼、玉米、螃蟹、鸡蛋(蛋白/蛋黄)、蘑菇、牛奶、猪肉、大米、虾、大豆、西红柿、小麦共14种,严格按照试剂盒说明书要求进行操作。

1.3 结果判定

根据吸光度及标准曲线计算样本IgG抗体浓度,检测值<50 U/mL为0级阴性,检测值50-100 U/mL为1级轻度敏感,检测值101-200 U/mL为2级中度敏感,检测值≥200 U/mL为3级高度敏感。

1.4 统计学处理

采用EXCEL2016和SPSS 22.0进行数据分析处理,计数资料以n(%)表示,组间采用χ2检验比较,以P<0.05为差异有统计学意义。使用Kolmogorov-Smirnov检验分析数据是否符合正态分布,利用Levene检验数据的方差齐性,将非正态分布数据转换成正态分布,然后采用中位数及四分位距M(P25,P75)来描述数据的集中趋势,使用方差分析单因素检验比较组间差异性比较,以P<0.05为差异有统计学意义。用Spearman检验对HT患者TPOAb值与鸡蛋抗体滴度进行相关性分析。

2 结 果

2.1 食物特异性IgG抗体在HT患者及对照组中的表达情况

分别对HT组中和对照组进行14种食物特异性IgG抗体滴度的测定并进行分析,发现在HT组中14种食物特异性IgG抗体滴度均接近或高于对照组,其中鸡蛋特异性IgG抗体滴度HT组为64.8 U/mL,明显高于对照组的16.8 U/mL,两者比较差异有统计学意义(P=0.012),其余食物特异性IgG抗体滴度与对照组比较差异无统计学意义,见表1。

表1 HT组与对照组特异性IgG抗体滴度比较

在96例HT患者中,TPOAb轻、中、高度增高组及对照组食物特异性IgG抗体的表达情况(阳性人数/检测人数)分别为19/32、25/32、24/32、11/30,14种食物特异性IgG抗体检测阳性率HT各组及全部病例与对照组比较,其中TPOAb轻度增高组与对照组差异无统计学意义(P=0.074),TPOAb中、高度增高组及整体HT组与对照组比较差异均有统计学意义(P分别为0.001、0.002),见表2。TPOAb轻、中、高度增高组之间比较差异无统计学意义(P>0.05)。

表2 各组食物特异性IgG抗体表达情况

HT组中共发现有12种食物特异性IgG抗体阳性的现象,其中鸡蛋的发生率最高为58.3%(56/96),其次为蘑菇8.3%(8/96)、小麦6.3%(7/96)、大豆6.3%(6/96)、玉米6.3%(6/96)、牛奶5.2%(5/96),牛肉、鸡肉未发现食物特异性IgG抗体阳性的情况。鸡蛋特异性IgG抗体阳性率在对照组中虽达到33.3%,但与HT组相比较差异有统计学意义(P=0.017);其他食物特异性IgG抗体阳性率在两组中差异无统计学意义,见表3。

表3 HT组食物特异性IgG抗体阳性分布情况

2.2 HT组食物特异性IgG抗体与年龄、性别分析

HT组中男性人数为19例,女性人数为77例,食物IgG抗体阳性组中男性13例,女性55例,平均年龄(55.68±17.99)岁;食物IgG抗体阴性组中男性6例,女性22例,平均年龄(58.86±15.21)岁。两组间性别、年龄差异均无统计学意义(P=0.796、0.413)。

2.3 鸡蛋IgG抗体滴度与HT患者血清TPOAb相关性比较

因鸡蛋IgG抗体滴度在HT组中明显高于对照组,进一步分析了不同HT组中鸡蛋IgG抗体滴度,并对鸡蛋IgG抗体滴度与血清TPOAb进行了相关性比较。结果显示鸡蛋IgG抗体滴度在中度增高组与轻度增高组之间没有差异,但是在高度增高组与中度增高组(P=0.038)、高度增高组与轻度增高组之间(P=0.019)差异均有统计学意义,见表4。

表4 HT患者各组间鸡蛋IgG抗体滴度比较

HT患者血清TPOAb与鸡蛋IgG抗体滴度做相关性分析得出相关系数r=0.235、P=0.021,结果显示两者呈弱正相关,见图1。

图1 鸡蛋IgG抗体滴度与HT患者血清TPOAb相关性比较

3 讨 论

随着对食物不耐受研究的深入,发现多种自身免疫性疾病都与之相关,因此本研究选择了一种常见的自身免疫性疾病HT,探讨食物特异性IgG抗体与HT的相关性。研究发现,HT患者中普遍存在多种食物特异性IgG抗体增高的情况,阳性率达到了70.8%,明显高于甲状腺功能正常的健康人群的36.7%,并且出现阳性的食物种类繁多,在已检测的14种食物中出现了12种,仅牛肉与鸡肉未出现特异性IgG抗体增高,鸡蛋是特异性IgG抗体增高最多的食物,本研究结果也证实了鸡蛋特异性IgG抗体与TPOAb存在着弱正相关的关系,与相关报道的结果相近[2]。一项针对74名欧洲人的125种食物的研究[6]中发现HT患者中李子、杏仁特异性IgG抗体明显增高,这些证据说明了食物特异性IgG抗体确与HT存在相关性。鸡蛋作为日常生活中食用概率较高的食物,其特异性IgG抗体异常增高同样出现在健康体检人群及儿童中,其原因可能为鸡蛋所含的动物源性蛋白质具有较强的免疫原性[1],更易被肠道的免疫系统所攻击[7],因此鸡蛋成为了引起自身免疫性疾病的重要食物来源。

HT是自身免疫系统异常时将甲状腺作为靶器官进行攻击导致的结果,除遗传因素外其危险因素还包括环境因素,如碘、硒、维生素D水平以及肠道菌群等,越来越多的研究表明HT与其他因肠道菌群异常引起食物不耐受所导致的疾病相关,Virili[8]等研究证实了HT患者肠道菌群发生了改变。一项巴西学者的研究[9]中不仅发现了HT患者肠道菌群的改变,同时还证实了漏肠的存在。漏肠是肠道的黏膜屏障因某种原因被破坏导致肠道的通透性增加,使得外部抗原进入宿主,从而引起多种疾病,如乳糜泻、系统性红斑狼疮、哮喘等自身免疫性疾病[10]。部分食物进入人体后,因肠道菌群的改变导致体内缺乏相应的酶而无法完全消化吸收,以多肽或其他分子的形式存在于肠道或通过漏肠部位进入宿主,由此诱导免疫反应的发生,产生食物特异性IgG抗体,IgG抗体与食物分子结合形成免疫复合物进而发生炎症反应,导致全身多系统疾病的产生,这也解释了食物特异性IgG抗体易出现于肠道菌群不健全的儿童[11]及其他自身免疫性疾病患者[12-13]中的原因。另有研究表明食物特异性IgG抗体的滴度与肠道通透性生物标志物抗脂多糖呈正相关[14],说明通过测定食物特异性IgG抗体的滴度可以反映漏肠的严重程度,间接反映了机体可能发生自身免疫性疾病的概率或严重程度。本研究中,TPOAb的滴度高度增高组中鸡蛋特异性IgG抗体滴度明显高于TPOAb的滴度轻、中度增高组,TPOAb的滴度与鸡蛋特异性IgG抗体滴度呈弱正相关,说明了食物特异性IgG抗体的滴度可以在一定程度上反映HT患者甲状腺受损的程度。由此,可以给临床医生在诊治HT疾病中提供新的思路和依据,如发现HT的致病诱因,调整饮食结构、减少特异性IgG抗体的滴度增高的食物的摄入,注意肠道的黏膜屏障的保护等等,从而减轻HT患者的症状及减缓疾病的发展。

食物特异性IgG抗体与多种自身免疫性疾病相关,能否通过控制饮食减少自身免疫性疾病的症状或发生率呢?Gargano等[15]对食物过敏和不耐受的患者进行了营养问题的叙述性回顾中指出对免疫和非免疫介导的食物诱导疾病进行正确的诊断方法和饮食控制可能会最大限度地减少这些患者的营养差距,从而有助于改善他们的生活质量并降低其管理的经济成本;Laing[16]等认为个性化饮食方法的管理对由食物不耐受导致的炎症性肠病起到了很好的保护作用;Coucke[12]也认为应该对每个患者进行定制的个人饮食计划,如果正确地遵循,可以缓解症状,并可能停止或减缓自身免疫疾病的进展。同样HT作为一种常见的自身免疫性甲状腺疾病,本研究发现HT患者中普遍存在食物特异性IgG抗体增高的现象,那么通过饮食结构调整、去除或减少高特异性IgG抗体食物的摄入,以及调整肠道菌群、修缮漏肠是否会起到减低TPOAb,减轻HT临床症状甚至达到治愈疾病的作用呢,我们将在后续的工作中进行进一步的研究。

综上,本研究发现在HT患者中存在多种食物特异性IgG抗体增高的现象;食物特异性IgG抗体滴度增高的发生率在TPOAb中、高度增高组中明显高于对照组,其中鸡蛋特异性IgG抗体与桥本甲状腺炎具有相关性;食物特异性IgG抗体反映了HT患者甲状腺受损的程度,可能是HT发病的因素之一。