分散微固相萃取技术在茶饮料农药残留量检测中的应用

王 丹，李 琳，徐 斌，王守彬

（1.潍坊市疾病预防控制中心理检科，山东潍坊 261061；2.潍坊海关，山东潍坊 262702）

氨基甲酸酯类农药是茶叶种植中常用的杀虫剂。茶叶富含茶多酚、生物碱、氨基酸等多种活性物质，在质谱检测分析中容易对农药残留产生基质效应干扰，因此对样品的有效净化至关重要[1-3]。目前，茶叶中农药残留的样品前处理方法主要有分散固相萃取法（Dispersed Micro Solid Phase Extraction，DSPE）和固相萃取法（Solid Phase Extraction，SPE）。DSPE法被用于吸附茶叶提取液中的干扰物质，但寻找合适的吸附剂很困难。十八烷基硅烷键合硅胶、TPT和HLB等类型的SPE柱提取纯化水、牛奶、水果和蔬菜等样品中农药残留效果很好，但在茶叶等复杂基质中的提取效果不太理想[4]。分散微固相萃取（Dispersed Micro Solid Phase Extraction，DMSPE）基于DSPE和SPE技术，将固体吸附剂分散在提取液中用于吸附目标分析物，然后进行洗脱，从而提高了复杂基质样品的净化效果[5-6]。本研究使用DMSPE技术对茶饮料样品进行前处理，通过优化吸附剂和前处理条件，结合超高效液相色谱-三重四极杆技术，成功建立了测定茶饮料中氨基甲酸酯类农药残留的方法。

1 材料与方法

1.1 仪器与设备

安捷伦超高效液相-三重四极杆串联质谱联用仪（1290-6460）；离心机（ST16R，Thermo）；氮气浓缩仪（美国NEVAP）；安捷伦C18柱（RRHD Eclipse plus）。

1.2 材料与试剂

茶饮料样品为市售产品。

乙腈、乙酸（默克）；醋酸铵、无水硫酸钠、C18、PSA和PVPP粉末（Aglient）；10种氨基甲酸酯类农残标准品（农业农村部环境保护科研监测所）；实验用水（屈臣氏蒸馏水）。

1.3 方法

1.3.1 标准溶液制备

各取1.0 μg·mL-1标准溶液配制成混合使用液（1 000 μg·L-1），吸取适量，放入10 mL容量瓶中，加入1∶1的乙腈和含0.1%乙酸的醋酸铵溶液（20 mmol·L-1），配制成一套标准溶液，浓度分别为10 μg·L-1、20 μg·L-1、50 μg·L-1、100 μg·L-1、200 μg·L-1、500 μg·L-1。

1.3.2 样品制备

在15 mL BD管中量取5.0 mL茶饮料样品，静置20 min。加入2 mL水，混合30 s，加入8 mL乙腈混合后，超声波提取18 min。在8 000 r·min-1下离心4 min后，用装有吸附填料（15 mg PSA和35 mg GCB）的2 mL BD管移取1.0 mL上清液，混合40 s，使目标物被填料吸附，后用2.0 mL乙腈（0.1%甲酸水）溶液进行洗脱，以10 000 r·min-1冷冻离心洗脱液4 min后，过0.22 μm滤膜后上机。

1.4 仪器分析条件

（1）液相色谱条件。分析柱：安捷伦RRHD Eclipse plus-C1（83.0 mm×100 mm，1.8 μm）；流动相：B为乙腈，A为0.1%乙酸和20 mmol·L-1醋酸铵水溶液；柱温：40 ℃；流速：0.25 mL·min-1。冲洗梯度：95% A，0～10 min；60% A，10～11 min；5% A，11～12 min；95% A，12～13 min，95% A，12～15 min。

（2）质谱条件。多反应监测正离子模式；干燥气温度：300 ℃；干燥气流速：6 L·min-1；毛细管电压：3 500 V；喷嘴电压：250 V。雾化器压力：30 psi；鞘气温度：300 ℃，鞘气流速：11 L·min-1；毛细管电压：4 000 V；10种氨基甲酸酯类农残的质谱参数见表1。

表1 10种氨基甲酸酯类农残的质谱相关参数表

2 结果与分析

2.1 标准工作曲线

根据1.4条件测定混合化合物标准系列，以目标组分峰面积为纵坐标、浓度为横坐标绘制标准曲线。如表2所示，目标化合物标准曲线回归方程的相关系数为0.990 0～0.998 2，表明氨基甲酸酯类农药残留在10～500 μg·L-1具有良好的线性关系。

表2 10种氨基甲酸酯加标回收率、相对标准偏差及相关系数

2.2 加标回收率

在空白基质中以20.0 μg·L-1、100.0 μg·L-1、500.0 μg·L-1浓度水平添加标准物质，平行测定3次。10种氨基甲酸酯类的总离子流图见图1，加标回收率测量结果见表2。样品加标回收率为56.6%～111.7%，RSD为0%～13.10%，均符合方法要求。

图1 10种氨基甲酸酯类TIC图

2.3 方法的检出限和定量限

在空白样本中添加特定浓度化合物上机检测，以3倍信噪比（S/N）对应的被测化合物的含量为检出限，以10倍信噪比对应的被测化合物的含量为定量限，结果见表3。检测限为0.13～4.72 μg·kg-1，定限为0.39～14.20 μg·kg-1，符合国标要求。

表3 10种化合物的检出限和定量限

2.4 样品重复性实验

如表4所示，对已知浓度的样品连续进样6次，测得RSD为0.52%～9.45%，方法重现性好。

表4 茶饮料中10种氨基甲酸酯的重复性实验结果

3 结论

采用分散微固相萃取前处理技术可以快速、有效地净化样品，高效提取目标成分，操作过程简单，大大减少了试剂和时间成本。同时，方法的稳定性、精密度等指标也完全符合相关标准要求，因此分散微固相萃取结合UPLC-MS/MS可用于检测茶饮料中的10种氨基甲酸酯残留。