电感耦合等离子体质谱法测定赛洛多辛中钯元素的含量

穆二廷，魏茂陈，成亮*

（1.上海硕方医药科技有限公司，上海 201400；2.贵阳新天药业股份有限公司，贵州贵阳 550018）

赛洛多辛（Silodosin），化学名为(-)-1-(3-羟丙基)-5-[(2R)-2-[2-[2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯氧基]乙基]氨基]丙基]-2,3-二氢-1H-吲哚-7-羧基酰胺[1]。赛洛多辛是一种新型高度选择性α1A肾上腺素受体阻滞剂，在治疗良性前列腺增生症方面已显示出较好的疗效[2]。金属钯类化合物作为催化剂在医药合成领域的应用极为广泛。赛洛多辛的合成中残留的金属钯元素会被进一步带入到药物制剂中，从而造成药品中金属钯元素杂质的残留[3-4]。根据人用药品技术要求国际协调理事会（ICH）Q3D 的分类，钯被作为2B 类即被认为是给药途径依赖型的人体有害元素，具有显著的安全隐患[5-6]。目前，国内外有关赛洛多辛中钯元素分析的研究鲜有报道，利用ICP-MS 测定赛洛多辛中钯元素的方法尚未见文献报道。因此，开展赛洛多辛中钯元素分析研究对于保证赛洛多辛的安全性具有重要意义。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

NexION 2000 型电感耦合等离子体质谱仪，美国PerkinElmer 公司；SPB 50-24 型石墨消解仪，美国PerkinElmer 公司；MARS 6 型微波消解仪，美国CEM公司；ML204T/02 型万分之一天平，瑞士METTLER TOLEDO 公司；MING-CHE 24UV 型纯水仪，德国Merck millipore 公司。

钯（Pd，批号20190715）、铟（In，批号20190627）、镉（Cd，批号20190805）单元素标准溶液，均购于国家有色金属及电子材料分析测试中心，质量浓度分别为1 000.0 mg/L、100.0 mg/L、100.0 mg/L；硝酸（20191204），优级纯，国药集团化学试剂有限公司；盐酸（20191030），分析纯，国药集团化学试剂有限公司；水为超纯水。

赛洛多辛样品共12 批（批号：SD-A1-1804001、SD-A1-18022301、SD-A1-18040901、SD-A1-19082801、SD-A1-19082802、SD-A1-19082803、SD-18051501、SD-18051601、SD-18051701、SD-18080601、SD-18080801、SD-18081001），由上海汇伦生命科技有限公司提供。

1.2 ICP-MS 条件

等离子气体流速：15.0 L/min；辅助载气气体流速：1.2 L/min；氦气载气流速：5.0 L/min；雾化器气流速：0.94 L/min；雾化器温度：2.5 ℃；采样深度：5.0 mm；蠕动泵转速：35 r/min；射频功率：1 600 W；氦气碰撞模式。

1.3 溶液配制

（1）标准溶液配制：精密量取0.5 mL 的Pd 单元素标准溶液（1 000.0 mg/L），用含10%硝酸和2%盐酸的溶液定容至50.0 mL，稀释为Pd 单元素储备溶液A（10.0 mg/L）；精密量取5.0 mL 的Pd 单元素储备溶液A，用含10%硝酸和2%盐酸的溶液定容至50.0 mL，稀释为Pd 单元素储备溶液B（1.0 mg/L）；用Pd 单元素储备溶液B 逐级稀释，分别配制浓度为0.0 μg/L、10.0 μg/L、20.0 μg/L、40.0 μg/L、60.0 μg/L 和100.0 μg/L 的Pd 单元素标准工作溶液。

（2）内标溶液配制：取0.5 mL In 单元素标准溶液（100.0 mg/L），用含10%硝酸和2%盐酸的溶液定容至50.0 mL，配制成浓度为1.0 mg/L 的In 单元素内标溶液。

1.4 样品处理

精密称取样品约0.2 g，置于消解罐中，分别加入硝酸8.0 mL 和盐酸1.0 mL，放入石墨消解仪中120 ℃预消解20 min；冷却后，放置于微波消解仪中按微波消解程序消解（密闭消解，功率为1 200 W，爬升时间为25 min，保持温度为190 ℃，保持时间为50 min，冷却时间为25 min）。待冷却后，将样品定量转移至50.0 mL 容量瓶中，用超纯水定容至刻度，过滤，即得供试品溶液。同法制备空白样品。

1.5 试样测定

采用在线内标法，利用双蠕动泵管进样系统将供试品溶液与内标溶液同时泵入雾化器混合后引入ICP-MS 仪。分别对系列标准工作溶液、空白溶液及供试品溶液进行分析，采用标准曲线法定量。

1.6 方法学考察

1.6.1 检出限、定量限考察

按1.4 项方法处理样品，在1.2 项ICP-MS 仪器条件下测定11 份空白溶液，将连续测定空白溶液中Pd 元素分析峰响应值与In 内标元素参比峰响应值的比值3 倍标准偏差所对应的Pd 元素浓度作为检出限；以连续测定空白溶液中Pd 元素分析峰响应值与In 内标元素参比峰响应值的比值10 倍标准偏差所对应的Pd 元素浓度为定量限。

1.6.2 精密度考察

取样品约0.2 g，精密称定，精密加入10.0 mg/L Pd 单元素储备溶液0.2 mL，置于消解罐中，按1.4 项处理样品。2 名分析人员在不同日期分别取同一批次样品（SD-A1-1804001）各平行制备6 份，平行供试品溶液编号为01 ～12，在1.2 项ICP-MS 仪器条件下分别测定12 份供试品溶液中的Pd 元素含量，计算其相对标准偏差。

1.6.3 准确度

精密称定待测样品（SD-A1-1804001）约0.2 g，平行称取12 份，按1.4 项方法制备，并分别加入4 个浓度的Pd 元素标准工作溶液。低浓度（定量限附近）加入量相当于供试品中含Pd 0.4 μg/L 的Pd 元素标准工作溶液（编号为L-1、L-2、L-3），中低浓度加入量相当于供试品中含Pd 20.0 μg/L 的Pd 元素标准工作溶液（编号为ML-1、ML-2、ML-3），中浓度加入量相当于供试品中含Pd 40.0μg/L 的Pd 元素标准工作溶液（编号为M-1、M-2、M-3），高浓度加入量相当于供试品中含Pd 60.0 μg/L 的Pd 元素标准工作溶液（编号为H-1、H-2、H-3）。在1.2 项ICP-MS条件下分别测定12 份供试品溶液中的Pd 元素含量，计算回收率。

2 结果与分析

2.1 专属性

分别取10.0 μg/L Pd 单元素标准工作溶液与100.0 μg/L Cd 元素和10.0 μg/L Pd 元素的混合标准工作溶液引入ICP-MS 仪测定，Pd 单元素测定结果为10.0 μg/L，Cd+Pd 混合测定结果为9.5 μg/L。由此可知，Cd 元素的质量数与Pd 元素的质量数相近，当Cd 标准工作溶液浓度远远大于Pd 元素标准工作溶液浓度时，未影响Pd 元素的检测结果，说明方法专属性满足要求。

2.2 标准曲线

取1.3 项下系列标准工作溶液，按1.2 项ICP-MS条件和1.5 项测定方法进样测定。以Pd 元素分析峰响应值与In 内标元素参比峰响应值的比值为纵坐标，以Pd单元素标准工作溶液浓度为横坐标，绘制标准曲线。得到标准曲线方程为y=0.004 1x，R2=0.999 99，表明标准曲线的线性关系良好。

2.3 检出限、定量限

检出限、定量限实验结果表明，Pd 元素测定方法检出限为0.12 μg/L，定量限为0.40 μg/L。

2.4 精密度

精密度及中间精密度结果见表1。可以看出，精密度RSD（n=6）为2.6%，中间精密度试验RSD（n=12）为2.6%，结果均符合要求，表明该方法精密度良好。

表1 重复性及中间精密度试验结果

2.5 准确度

由表2 可知，平均回收率在95.6%～103.5%，RSD（n=12）小于10.0%，表明该方法准确度良好，能够准确测定赛洛多辛原料药及制剂中的钯元素含量。

表2 Pd 元素回收率试验结果

2.6 样品测定

按照拟定方法测定12 批赛洛多辛样品，结果显示，10 批样品（SD-A1-1804001、SD-A1-18022301、SD-A1-18040901、SD-A1-19082801、SD-A1-19082802、SD-A1-19082803、SD-18051501、SD-18080601、SD-18080801、SD-18081001）中均未检出Pd 元素，SD-18051601、SD-1805170122 样品中Pd 元素含量别为0.039 μg/g 和0.037 μg/g，各批次样品中Pd 元素含量均远小于ICH Q3D 中Pd 元素限量值（10.0 μg/g），且均低于限量值的10%，表明赛洛多辛样品中Pd 元素无风险。

3 讨论

样品消解一般有干法消解、湿法消解、石墨炉消解和微波消解。其中，干法消解具有耗时长、操作烦琐等问题，且消解过程中温度高易造成元素损失；湿法消解具有用酸量大，挥酸会产生大量有害气体等问题[7]。目前分析实验室使用较多的是石墨炉消解和微波消解，也可根据样品状态或性质联合2 种消解方式的情况。样品消解使用的酸一般为硝酸、王水、硝酸+高氯酸、硝酸+双氧水、硝酸+氢氟酸、硝酸+高氯酸+氢氟酸等[8-9]。本课题组通过预实验尝试上述不同酸的消解方式，发现赛洛多辛样品不能消解完全或对仪器检测有干扰，基质效应明显，通过不断尝试发现样品∶硝酸∶盐酸为1 ∶40 ∶5（g ∶mL ∶mL）能够有效对赛洛多辛样品进行处理，经消解后样品仍具有良好的形态，能够消除基体干扰，满足进样要求。

元素杂质测定方法一般有石墨炉原子吸收法、电感耦合等离子体发射光谱法（ICP-AES 法）和ICPMS 法。其中，石墨炉原子吸收法测定原料药中钯元素杂质的检出限约在3.11 μg/L[10-11]，ICP-AES 法测定药品中钯元素杂质的检出限约在40.00 μg/L[12]，石墨炉原子吸收法灵敏度不高，检测的元素少；而ICPMS 法较ICP-AES 法光谱干扰少，具有更小的检出限，更适合元素杂质的痕量分析[13]，因此本文建立ICPMS 法测定赛洛多辛中钯元素杂质的含量。

4 结论

本文建立的ICP-MS 法测定赛洛多辛样品中钯元素杂质的检出限为0.12 μg/L，具有更低的检出限。经过方法学验证表明该方法灵敏度高、准确度高、精密度高，可用于赛洛多辛样品中钯元素杂质的含量测定。