脐带血免疫球蛋白E 和脐血Th1、Th2 细胞因子表达水平对婴幼儿过敏性疾病的早期预测价值

钟永兴，严菊英，张徵

过敏性疾病是指IgE 介导的I 型过敏反应性疾病，近年来，其发病率在全球范围内逐年递增，已成为全球关注的热点问题[1]。近年来，随着不断深入研究发现，子代过敏性疾病的发生发展与脐带血IgE、T淋巴细胞亚群密切相关，但具体临床意义有待进一步研究[2]。本文旨在探讨脐带血IgE 及脐带血细胞因子对婴幼儿过敏性疾病的诊断价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 纳入2019 年1 月至2020 年12 月于绍兴市妇幼保健院成功分娩的足月新生儿400例，纳入新生儿均检测出生时脐带血IgE、脐带血Th1、Th2 细胞因子水平。对其追踪随访2 年，共随访到341 例（85%），根据是否发生过敏性疾病分为过敏性疾病组（98 例），未发生的纳入对照组（243 例）。本研究经绍兴市妇幼保健院医学伦理委员会审批通过，家属均知情同意并签署知情同意书。

1.2 纳入及排除标准 纳入标准：（1）所有新生儿出生无窒息抢救史，均为足月儿；（2）经培训过的儿科专家诊断为过敏性疾病。排除标准：（1）出生时伴有呼吸、凝血、肝功能、肾功能、神经系统、循环系统等严重脏器疾病者；（2）合并恶性肿瘤者；（3）临床及随访资料不完整者。

1.3 方法

1.3.1 脐带血采集、检测 胎儿分娩后，由受过专业培训的医护人员收集孕妇分娩时的脐带血（脐静脉血）4 ～6 ml，6 ～24 h内分离血清，置—70℃保存，待检。采用ELISA 法进行IgA 测定，任何IgA ＞30 IU/L 视为污染标本，予以排除，本研究脐血标本均未被母血污染，符合要求。IgE 采用电化学发光法（德国罗氏诊断有限公司）检测，细胞因子测定采用Bio-Plex 悬浮芯片系统。

1.3.2 随访 分别于婴儿出生时，生后1、3、6、12、18及24 个月进行问卷调查，包括孩子性别、出生方式、出生季节、喂养方式、家庭过敏性疾病或疾病史、有无饲养宠物、母亲孕期吸烟史、家族成员吸烟史等。

1.4 观察指标 记录新生儿随访期间过敏性疾病发生情况。过敏性疾病定义：明显的过敏性疾病是通过出现特应性皮炎、支气管哮喘、过敏性鼻结膜炎、过敏性荨麻疹或胃肠道过敏的症状或体征来诊断的。如果有在检查时未观察到的特定症状或体征，则可能存在过敏性疾病，包括瘙痒性性湿疹、感染期间或其他情况下反复出现的喘息、持续的鼻分泌物或没有呼吸道感染的打喷嚏和眼睛瘙痒。

1.5 统计方法 采用SPSS 26.0 软件进行数据整理和分析。计量资料以均数±标准差表示，采用独立样本t检验；计数资料采用2检验；相关性分析采用Pearson相关分析；以ROC曲线评估过敏性疾病患儿特异性检测指标，根据Youden 法确定预测过敏史疾病患儿的最佳临界点。P ＜0.05 表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 过敏性疾病发生情况 所有新生儿随访2 年，随访到341 例，随访率85%。341 例中出现过敏性疾病98 例，发病率为28.74%，其中婴儿湿疹30 例、过敏性鼻炎26 例、喘息性支气管炎18 例、急性毛细支气管炎15 例、荨麻疹和药疹9 例。

2.2 两组一般资料比较 两组性别、出生方式、出生季节、喂养方式、家中有无饲养宠物、母亲孕期吸烟史及家庭成员吸烟史差异均无统计学意义（均P ＞0.05），两组家庭过敏性疾病或疾病史差异有统计学意义（P ＜0.05），见表1。

表1 两组患儿基本资料比较例例

2.3 两组脐带血IgE、Th1 及Th2 水平比较 过敏性疾病组脐血IgE、IL-4 均高于对照组，IL-2、IL-10、TNF- 及IFN-r均低于对照组，差异均有统计学意义（均P ＜0.05），见表2。

表2 两组脐带血IgE、Th1 及Th2 水平比较

2.4 脐带血细胞因子和IgE 的相关性 Pearson 相关分析显示，IL-1 与IL-8、IL-17A、IL-12p70 均呈正相关（r=0.31、0.33、0.33，均P ＜0.05），IL-17A 与IL-12p70 呈正相关（r=0.31，P ＜0.05），见表3。

表3 相关变量间的相关性

2.5 ROC 曲线 ROC 曲线显示，IL-4、IgE 曲线下面积均为0.82。IL-4、IgE 的临界值分别为0.61pg/ml、0.67 IU/ml时，其区分过敏性疾病与非过敏性疾病的敏感性分别为89.8%、76.5%，特异性分别为70.6%、74.8%，见图1。

图1 ROC 曲线

3 讨论

过敏性疾病可发生于皮肤、鼻、眼部、支气管、肠道等全身各个组织器官[3]，其机制为过敏源作用于机体不同靶点导致不同过敏性疾病发生，这可能与过敏刺激形成的高IgE 过度免疫应答有关。过敏易感体质发生过敏性疾病的风险更高，更易发生过敏性鼻炎、特应性皮炎、过敏性哮喘三大过敏性病[4]，而子代发生过敏性疾病的风险与其父母有过敏性疾病史密切相关[5-6]，本研究结果亦与之相符。

Th1 和Th2 细胞（产生特定的细胞因子分别是IFN- 和IL-4）被认为是调节过敏变态反应的主要细胞群，其机制主要是环境过敏原优先激活Th2 细胞及释放Th2 相关细胞因子导致机体Th1/Th2 失衡[7-8]。IL-4 可促进B 细胞反应和IgE 的分泌，IL-4 与IgE存在正向促进作用，这可以解释本研究中过敏性疾病组脐血IgE、IL-4 均高于对照组原因。此外，本研究发现IL-2、IL-10、TNF- 、IFN-r 低于对照组，表明脐血TH2 因子占优势可能导致子代过敏性疾病发生，这也进一步证实Th1/Th2 失衡与过敏性疾病发生发展有关，且在围产期已经存在。孕期母体脐血Th2 占优，Th1/Th2 失衡，Th1/Th2 相关细胞因子变化，会促进日后过敏的发生[9-10]。另外国内学者最新研究指出脐血中IL-10 分泌机制受损，TNF- 、IFN-r浓度较低，可能会导致变应原免疫耐受失调，导致日后哮喘、喘息、过敏性鼻炎风险增加[11]，本研究结果与以上研究结论相符。

本研究显示IL-1 与IL-8、IL-17A、IL-12p70 和IL-17A与IL-12p70 呈正相关，表明人体内各种细胞因子是相互促进的。细胞因子在自分泌反馈回路中进一步促进T 细胞分化，会进一步刺激过敏反应和嗜酸性炎症、以及上皮和平滑肌细胞最终导致过敏等病理学症状的发生[12]。而脐血IgE、脐血细胞因子IL-4 可作为婴幼儿过敏性疾病的预测因子，这与国内脐血IgE、IL-4 检测对2 岁内婴幼儿特应性疾病有一定预测作用的结论相符[13]。用IgA 作为生物标志物评估脐带血与母体血液的污染，结果IgA 均＜30 IU/L，提示脐血标本未被母血污染[14]，排除了潜在的脐血IgE 的错误分类的可能。

利益冲突 所有作者声明无利益冲突

作者贡献声明 钟永兴：实验操作、论文撰写；张徵：数据整理、统计学分析；严菊英：研究指导、论文修改、经费支持