HIV感染患者血清白细胞介素与淋巴细胞水平的关系

韩阳 叶卫丰 侯振宇 朱青 韩强

人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency Virus,HIV)进入人体后主要侵犯免疫系统,损害机体细胞免疫功能,表现为CD4+、CD8+T淋巴细胞水平不断降低,最终导致人体免疫功能缺陷,增加各种感染、肿瘤发生风险,已成为重大公共卫生挑战之一[1,2]。血液中CD4+、CD8+T淋巴细胞水平可有效反映机体细胞免疫功能,是HIV感染患者病情判定、临床进展、治疗效果的重要评价指标[3,4]。积极寻找与T淋巴细胞相关的指标,或可为HIV感染患者的治疗提供新的靶点。白细胞介素是参与机体免疫激活、免疫应答、信息传递、免疫调节等多种过程的一类细胞因子。相关研究指出,HIV感染后,患者体内多种白细胞介素表达可发生明显改变[5]。由此,推测HIV感染患者血清白细胞介素与T淋巴细胞水平存在某种联系。鉴于此,本研究观察HIV感染患者血清白细胞介素、淋巴细胞水平,并分析其关系,以期为临床治疗寻找新的靶点。

1 资料与方法

1.1 一般资料 回顾性分析2019年3月至2022年7月医院收治的128例HIV感染患者临床资料。128例HIV感染患者中男102例,女26例;年龄:<60岁119例,≥60岁9例;婚姻状况:未婚58例,已婚32例,丧偶2例,离异36例;感染途径:性传播107例,血液传播21例。

1.2 纳入与排除标准

1.2.1 纳入标准:①HIV感染符合《中国艾滋病诊疗指南(2018版)》[6]中相关诊断标准,经免疫印迹实验证实HIV感染;②首次就诊;③因机会性感染入院就诊;③临床资料完整。

1.2.2 排除标准:①既往有抗病毒治疗史;②近6个月使用免疫抑制剂、干扰素、调节剂、糖皮质激素等影响机体免疫状态的药物;③合并严重免疫系统功能异常;③合并严重血液系统疾病;⑤合并严重肝肾功能不全;⑥妊娠期女性。

1.3 方法

1.3.1 血清白细胞介素检测:入院24 h内采集患者空腹静脉血3 ml,离心(离心速度3 500 r/min)10 min,取血清,采用酶联免疫吸附法测定白细胞介素-1β(interleukin-1 β,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)水平,严格按照检测试剂盒(晶美生物科技)说明进行相关操作。

1.3.2 淋巴细胞水平检测:取50 μl抗凝全血,加入20 μl CD4-FITC/CD8-PE/CD3-PerCP单克隆混合抗体振荡混匀,室温下避光孵育20 min,使用红细胞裂解液裂解红细胞,经流式细胞仪(BD FACSAria Ⅱ)检测CD4+、CD8+T淋巴细胞数。

1.3.3 资料收集:详细记录患者性别(男、女)、年龄(<60岁、≥60岁)、婚姻状况(未婚、已婚、丧偶、离异)、感染途径(性传播、血液传播)、病毒载量[取2 ml抗凝全血,离心(离心速度2 000 r/min)10 min,分离血浆并将其移至-76℃无菌冻存管中备用。于37℃下震荡助融样本,上机检测。取1 100 μl血浆于全自动病毒载量仪上定量检测HIV RNA。实验设强阳性、弱阳性、阴性质控品各一个,采用内标法定量检测样本,检测线性范围:40～107copies/ml。参照李强等[7]研究,依据病毒载量分为<40 copies/ml、40～103copies/ml、>103copies/ml]、吸烟史[有、无,吸烟指数(吸烟支数×吸烟年限)>200视为有吸烟史]。

2 结果

2.1 HIV感染患者血清白细胞介素、淋巴细胞水平 128例HIV感染患者IL-1β水平(2.92±1.04)pg/ml、IL-6水平为(4.36±1.56)pg/ml、IL-10水平为(3.62±1.13)pg/ml、CD4+水平为(416.41±68.59)个/μl、CD8+水平为(1 418.93±94.18)个/μl。

2.2 不同临床特征的HIV感染患者CD4+水平比较 病毒载量<40 copies/ml的HIV感染患者CD4+水平高于病毒载量40～103copies/ml及>103copies/ml的患者,有吸烟史的HIV感染患者CD4+水平低于无吸烟史的患者,差异有统计学意义(P<0.05);不同性别、年龄、婚姻状况、感染途径的HIV感染患者CD4+水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 不同临床特征的HIV感染患者CD4+水平比较 个/μl,

2.3 不同临床特征的HIV感染患者CD8+水平比较 病毒载量<40 copies/ml的HIV感染患者CD8+水平高于病毒载量40～103copies/ml及>103copies/ml的患者,有吸烟史的HIV感染患者CD8+水平低于无吸烟史的患者,差异均有统计学意义(P<0.05);不同性别、年龄、婚姻状况、感染途径的HIV感染患者CD8+水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。

表2 不同临床特征的HIV感染患者CD8+水平比较 个/μl,

2.4 HIV感染患者血清白细胞介素与淋巴细胞水平的关系 经Pearson相关性分析,HIV感染患者血清IL-1β、IL-6、IL-10水平与CD4+及CD8+呈负相关(P<0.05)。见表3。

表3 HIV感染患者血清白细胞介素与淋巴细胞水平的关系

2.5 病毒载量、吸烟史与HIV感染患者淋巴细胞水平的关系 经Kendall’stau-b相关性分析,病毒载量与HIV感染患者CD4+、CD8+水平呈负相关(P>0.05);经点二列相关性分析,结果显示,吸烟史与HIV感染患者CD4+、CD8+水平呈负相关(P<0.05)。见表4。

表4 病毒载量、吸烟史与HIV感染患者淋巴细胞水平的关系

3 讨论

HIV主要损害靶细胞为T淋巴细胞,HIV感染患者CD4+、CD8+T淋巴细胞的各项功能可受到明显限制。在HIV感染初期,CD4+、CD8+T淋巴细胞水平可明显上升,并分泌多种细胞以消灭被感染的细胞,但随病情进展,CD4+、CD8+水平可逐渐降低,引发免疫系统功能缺陷[8]。

T淋巴细胞数量、功能紊乱在HIV感染过程中发挥核心作用,其中CD4+主要起到协助细胞免疫、体液免疫的作用,CD8+主要起到杀伤和抑制的作用,可维持、诱导免疫耐受[9,10]。一般情况下,健康人群的CD4+T淋巴细胞数量为500～1 600/ml,但当HIV感染时,机体CD4+T淋巴细胞数量可逐渐降低,当其降至200/ml时,机体则可能发生感染或肿瘤[11]。CD8+T淋巴细胞属机体免疫效应因子,可通过T淋巴细胞效应释放多种因子清除感染靶细胞的病毒,是抵御HIV感染的重要细胞[12]。因此,临床常采用CD4+、CD8+T淋巴细胞数量来判断HIV感染患者预后情况。

研究指出,IL-1β在健康人群血清中呈低表达,感染、炎性等刺激可诱导IL-1β水平升高[13]。当机体发生HIV感染时,可对巨噬细胞、中性粒细胞等产生刺激,促使IL-1β大量释放,引起炎性反应,直接导致炎性损伤;此外,IL-1β还可介导多种促炎性细胞因子合成,间接起到促炎作用,影响患者预后[14]。已有研究证实,HIV感染可刺激巨噬细胞、中性粒细胞增加IL-6分泌量,即便在病毒抑制条件下,HIV感染患者血清IL-6水平仍处于较高水平[15]。有研究指出,IL-6与HIV感染患者癌症、心血管疾病、感染性疾病等不良临床结局有关[16,17]。血清IL-6水平异常升高表明存在活动性炎性,可能对患者预后产生重要影响。IL-10是Th2型细胞因子,可由多种类型免疫细胞产生,可对Th1反应产生间接抑制的作用。有研究指出,HIV导致的慢性感染状态下,IL-10可对T细胞产生持续抑制作用,从而促进病毒感染活性[18]。

本研究发现,IL-1β、IL-6、IL-10与CD4+、CD8+呈负相关,即IL-1β、、IL-6、IL-10水平越高CD4+、CD8+水平越低。分析其原因,血清IL-1β、IL-6、IL-10水平异常升高可引起过度炎性反应,而过度炎性反应又可引起免疫功能紊乱,加重机体免疫损伤,降低CD4+、CD8+T淋巴细胞水平。而CD4+、CD8+T淋巴细胞水平降低可导致细胞溶解功能、杀伤能力降低,致使免疫应答负性调节占据优势,为HIV复制创造良好条件,进而引起炎性介质、细胞因子释放入血[19]。此外,IL-10可对T细胞产生直接作用,对其增殖、功能分化产生限制;还可对抗原提呈细胞产生作用,抑制刺激分子表达,阻碍初始T细胞成熟,减少CD4+、CD8+T淋巴细胞数目[20]。由此可见,白细胞介素在HIV感染中扮演重要角色,在未来,临床或许可采取抗炎措施,尽可能降低患者血清炎性因子水平,促进CD4+、CD8+T淋巴细胞水平恢复,从而改善患者预后。

HIV病毒载量越高则表明患者体内复制数量越多,在病毒直接或间接作用下,CD4+、CD8+T淋巴细胞破坏越多,进而减少其数量。此外,本研究结果还显示,吸烟史与HIV感染患者CD4+、CD8+水平呈负相关。其原因主要是吸烟时多种有害物质可反复刺激呼吸道,长此以往可降低肺功能,影响机体免疫力,降低CD4+、CD8+T淋巴细胞水平。因此,针对HIV感染患者,临床应积极给予抗病毒治疗及戒烟干预,以改善患者CD4+、CD8+T淋巴细胞水平,促进免疫功能恢复,利于患者预后。

综上所述,HIV感染患者血清IL-1β、IL-6、IL-10水平与CD4+、CD8+水平密切相关,深入研究血清IL-1β、IL-6、IL-10影响CD4+、CD8+水平的具体机制,或许可为HIV感染患者的治疗开辟新的思路。