丹红注射液联合活血化瘀解毒法对口腔黏膜下纤维化的临床效果及对MCP-1、VEGF的影响

魏佳涵 谭 劲 胡 淳

湖南中医药大学第一附属医院口腔科，湖南长沙 410000

口腔黏膜下纤维化在临床上又被称为口腔黏膜下纤维性变，属于一种慢性进行性口腔黏膜疾病，具有癌变倾向，临床表现为进食疼痛、口干、灼痛、吞咽困难以及进行性张口受限症，临床特征为口腔黏膜颜色苍白、僵硬，存在纤维条索状改变[1]。目前临床上对于口腔黏膜下纤维化的治疗多采用微量营养素、糖皮质激素、维生素类药物治疗，以达到改变患者口腔黏膜色泽，提高弹性，减轻患者疼痛的目的。但部分患者复发率较高，预后常不良，因此需进一步寻找合理有效的治疗口腔黏膜下纤维化的方案，以促进患者疾病快速恢复，改善预后，本研究选取2019 年10 月至2022 年6 月湖南中医药大学第一附属医院（我院）收治的100 例口腔黏膜下纤维化患者，观察丹红注射液联合活血化瘀解毒法对口腔黏膜下纤维化患者的治疗效果，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2019 年10 月至2022 年6 月我院收治的100 例口腔黏膜下纤维化患者，按照随机数表法分为对照组和研究组，每组各50 例。对照组男26 例，女24 例；年龄28 ～62 岁，平均（45.0±13.6）岁；病程1 ～3.5 年，平均（2.3±0.9）年。研究组男25 例，女25 例；年龄29 ～60 岁，平均（44.5±12.4）岁；病程1 ～4 年，平均（2.0±0.8）年。两组患者一般资料比较，差异无统计学意义（P＞ 0.05），具有可比性。本研究已通过我院医学伦理委员会审核。

纳入标准：①临床检查结缔组织出现纤维变性诊断为口腔黏膜下纤维化；②签署知情同意书。

排除标准：①对本研究药物过敏者；②已接受其他药物治疗；③免疫障碍或合并肿瘤者；④沟通障碍或精神障碍者；⑤合并心脑血管疾病、糖尿病或高血压者；⑥合并其他口腔病变者；⑦妊娠或哺乳期者。

1.2 方法

两组患者均行临床常规治疗：醋酸泼尼松龙注射液（浙江仙琚制药股份有限公司，国药准字 H33021520，规格：1 ml ∶25 mg）15 ml+利多卡因注射液（哈药集团三精制药有限公司，国药准字H23021157，规格：5 ml ∶0.1 g）0.5 ml 混合，肌内注射。

对照组在常规治疗的基础上采用丹红注射液进行治疗，丹红注射液[山东丹红制药有限公司，国药准字 Z20026866，规格：每支装10 ml]肌内注射，一次2 ～4 ml，1 ～2 次/d，连续治疗2 个月。

研究组在对照组的基础上联合活血化瘀解毒法治疗，活血化瘀解毒方：金银花、白花蛇舌草、赤芍、红花各10 g，当归、玄参、丹参、生地黄各15 g。对于疼痛较为显著的患者加用乳香、没药各10 g；对于张口困难、口腔黏膜发白发硬者加地龙、僵蚕各10 g。水煎服，1 剂/d，早晚分服，连续治疗2 个月。

1.3 观察指标及评价标准

1.3.1 两组张口度、黏膜病损面积比较 采用游标卡尺测量患者治疗前后黏膜病损面积以及上、中、下切片牙缘间最大张口度，测量3 次取平均值。

1.3.2 两组疼痛、口腔健康影响程度比较 疼痛情况采用视觉模拟评分（visual analogue score，VAS）[2]评价，分值为0 ～10 分，评分越高，疼痛越严重。健康影响程度采用口腔健康影响程度量表（oral health impact profile-14，OHIP-14）[3]评价，包括口腔功能限制、生理型疼痛、心理障碍、生理障碍、心理不适、社交障碍以及残障等，共14 个条目，每个条目分别记为0 ～4 分，总分为56 分，分数越高说明患者口腔健康状况越差。

1.3.3 两组炎症反应指标比较 抽取患者治疗前后清晨空腹静脉血3 ml，以离心半径5 cm、转速3000 r/min 离心处理10 min，分离上层血清，采用酶联免疫吸附试验法检测白介素（IL）-1、IL-10 水平。

1.3.4 两组口腔颊黏膜组织中单核细胞趋化蛋白-1（monocyte chemoattractant protein-1，MCP-1）、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF） mRNA 表达量比较 取患者肌层口腔颊黏膜组织，加入1 ml Trizol 研磨为粉末状，提取口腔颊黏膜组织中总RNA，检测RNA纯度、含量，使用Takara 逆转录试剂盒行逆转录处理后获得cDNA，采用Primer 5.0 软件设计引物序列，使用RT-PCR 方法检测口腔颊黏膜组织中MCP-1、VEGF mRNA 表达量，采用2-△△Ct方法计算出需要检测的口腔颊黏膜组织中MCP-1、VEGF mRNA 表达量。MCP-1 引物序列：上游：5’-ATAGCAGCCACCTTCATTCC-3’， 下 游：5’-GCTTCTTTGGGACACTTGCT-3’；VEGF 引物序列：上游：5’-TCGGGCCTCCGAAACCATGA-3’，下游：5’-CCTGGTGAGAGATCTGGTTC-3’；内 参β-actin 引 物 序 列： 上 游：5’-CTGG CACCACACCTTCTACAATGAGC-3’， 下 游：5’-GAGGATCTTCATGAGGTAGTCAGT-3’。

1.3.5 两组治疗效果比较[4]根据患者张口度、病损面积、疼痛程度评价治疗效果。①显效：治疗后临床症状显著改善，与治疗前比较，张口度改善值＞10 mm，病损面积＜5 cm2，疼痛症状消失；②有效：临床症状改善，与治疗前比较，张口度改善值在5 ～10 mm，疼痛症状显著改善；③无效：未达到上述标准，且有加重的趋势。治疗总有效率=（显效+有效）例数/总例数×100%。

1.4 统计学方法

采用SPSS 20.0 统计软件进行数据处理，计量资料采用均数±标准差（）表示，采用独立样本t检验；计数资料采用[n（%）]表示，采用χ2检验，P＜ 0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者治疗前后张口度、黏膜病损面积、疼痛、口腔健康影响程度比较

治疗前两组患者张口度、黏膜病损面积、疼痛、口腔健康影响程度比较，差异无统计学意义（P＞ 0.05）；治疗后，研究组患者张口度高于对照组，黏膜病损面积、疼痛、口腔健康影响程度低于对照组，差异有统计学意义（P＜ 0.05）。见表1。

表1 两组患者张口度、黏膜病损面积、疼痛、口腔健康影响程度比较（x ± s）

2.2 两组患者炎症反应指标比较

治疗前，两组患者炎症反应指标比较，差异无统计学意义（P＞ 0.05）；治疗后，研究组患者IL-1水平低于对照组，IL-10 水平高于对照组，差异有统计学意义（P＜ 0.05）。见表2。

表2 两组患者炎症反应指标比较（x ± s）

2.3 两组患者口腔颊黏膜组织中MCP-1、VEGF mRNA表达量比较

治疗前，两组患者口腔颊黏膜组织中MCP-1、VEGF mRNA 表达量比较，差异无统计学意义（P＞ 0.05）；治疗后，研究组患者口腔颊黏膜组织中MCP-1、VEGF mRNA 表达量低于对照组，差异有统计学意义（P＜ 0.05）。见表3。

表3 两组患者口腔颊黏膜组织中MCP-1、VEGF mRNA表达量比较（x ± s）

2.4 两组患者治疗效果比较

研究组患者治疗总有效率为96.00%，高于对照组的82.00%，差异有统计学意义（P＜ 0.05），见表4。

表4 两组患者治疗效果比较[n（%）]

3 讨论

口腔黏膜下纤维化是一种可侵犯口腔、咽部的慢性炎症性疾病，临床症状为口腔黏膜起疱、苍白、口腔黏膜质地变硬、刺激痛及渐进性张口困难等，严重影响患者身心健康[5]。目前临床上多采用激素类药物治疗，虽可在一定程度上减轻口腔黏膜纤维化患者临床症状，但此类药物易给患者带来较大的毒副作用，且治疗效果也并不理想[6]。

中医学认为，口腔黏膜下纤维化的发生与湿热毒邪入侵机体，导致局部经络运行不畅有关，因此治疗应以清热解毒、活血化瘀为原则[7]。活血化瘀解毒方中丹参具有活血化瘀的作用，赤芍、当归具有辅助上述药物强化活血化瘀的功效，生地黄、玄参具有清热解毒的作用，金银花具有清热解毒的作用，而白花蛇舌草具有散瘀解毒的作用，上述药物共同组成活血化瘀解毒方，共奏清热解毒、活血化瘀之功[8-9]。丹红注射液是由红花、丹参以及注射用水所组成的一种中成药，临床研究显示，丹红注射液中含有丹参酮、丹参酚酸、丹参酸、红花酚苷、红花黄色素、儿茶酚等多种化学成分，具有通脉疏络、活血化瘀等功效[10-11]。本研究结果显示，治疗后，研究组患者张口度高于对照组，黏膜病损面积、疼痛、口腔健康影响程度低于对照组（P＜ 0.05），研究组患者治疗总有效率为96.00%，高于对照组的82.00%（P＜ 0.05）。可能与两者具有通脉疏络、活血化瘀、清热解毒的功效相关。

研究显示，口腔黏膜下纤维化患者机体出现炎症反应，且炎性细胞过度增殖，而当机体长期处于炎症反应中时，可导致黏膜过度纤维化、张口受限[12]。其中IL-1 属于一种由内皮细胞、成纤维细胞、巨噬细胞等所分泌的细胞因子，具有较多的生物学功能，为促炎症因子，可促进机体炎症反应[13]。IL-10 属于一种抑炎症因子，属于IL-10 细胞因子家族成员，在炎症反应发生后其水平可显著升高，可抑制炎症进展[14]。本研究显示，治疗后研究组患者IL-1 水平低于对照组，IL-10 水平高于对照组（P＜ 0.05）。可能与丹红注射液中丹参抗炎作用、活血化瘀解毒方清热解毒作用相结合，抑制机体炎症反应，最终促进炎症细胞凋亡，而抑制黏膜过度纤维化有关。

研究发现，血液中单核细胞、巨噬细胞在特异性趋化因子的作用下会出现迁移、聚集现象，从而发挥其生物学功能，MCP-1 属于一种具有活化、趋化单核细胞、巨噬细胞的趋化因子[15]。临床研究显示[16]，口腔黏膜下纤维化属于局灶性硬皮病，疾病发生早期VEGF 显著升高，其升高属于一种代偿性反应，促进微血管再生，扩张血管，对局部血液灌注起到改善作用，同时VEGF 可促进基质金属蛋白酶分泌，下调其抑制物，进而降低细胞外基质，抑制胶原堆积的作用。但随着疾病的发生，VEGF 升高逐渐呈现为失控状态，无法形成正常血管，进而促进疾病进展。本研究显示，治疗后研究组患者口腔颊黏膜组织中MCP-1、VEGF mRNA 表达量低于对照组（P＜ 0.05）。可能与丹红注射液联合活血化瘀解毒法可能共同作用，改变机体代偿性反应，抑制MCP-1、VEGF 表达，进而抑制胶原堆积，最终起到抑制黏膜过度纤维化的作用相关。

综上所述，丹红注射液联合活血化瘀解毒法可缓解口腔黏膜下纤维化患者疼痛，改善临床症状，减轻炎症反应，抑制MCP-1、VEGF 表达。