日粮添加益生菌对肉鸡免疫功能及其生长性能的影响研究

朱春红

(平邑县畜牧发展促进中心，山东临沂 273300）

目前，饲料全面“禁抗” 的成果斐然，抗菌肽、微生态制剂、植物提取剂以及益生菌等都成了肉鸡养殖中广泛使用的抗生素替代品。其中，益生菌的定义是非致病性活微生物，在适量的摄入后，对机体健康有益。在肉鸡饲养中，益生菌能够起到的有益作用有：促进机体免疫功能的发育、帮助肠道维持正常的微生物群落、强化肠上皮屏障功能等[1]。在肉鸡的饲养上，肠道炎症为常见病，其发病与肉鸡肠道中有益菌数量的多少息息相关，若有害菌数量增多，便会诱使疾病发生。益生菌及其代谢产物可以调节肠道紧密连接蛋白，维系动物机体中肠道微生物区系的平衡状态[2]。本试验通过在日粮中添加益生菌，研究其对肉鸡免疫功能和生长性能的影响，并进一步比较乳双歧杆菌、嗜酸乳杆菌两种益生菌的应用效果，以期为肉鸡饲养中益生菌的合理选用提供一定参考。

1 材料和方法

1.1 试验材料

本试验选用乳双歧杆菌、嗜酸乳杆菌(皆购自广东微生物菌种保藏中心）作为研究菌种，取冻干纯菌菌粉各1g，将乳双歧杆菌菌粉放到无菌牛乳中进行厌氧活化；嗜酸乳杆菌菌粉放到MRS肉汤培养基中进行活化；在37℃的条件下恒温培养14h，接种到改良MRS 固体培养基上，再于37℃条件下培养持续36h，选择大小大致相同、光滑且圆润的单菌落在200mL、30%无菌脱脂牛乳中扩大培养14h。

1.2 日粮配方和营养组成

结合鸡营养需求、饲养标准条件等，对配制试验基础日粮，使用的是玉米-豆粕型日粮。具体成分和营养水平如表1 所示。

表1 基础日粮配方和营养组成

1.3 试验设计

试验选择1 日龄的肉鸡(皆为雄性）540 只，随机分成3 组，每组有6 个重复、各重复有30只鸡。处理1 中肉鸡仅饲喂基础日粮；处理2 和处理3 中肉鸡分别在基础日粮中添加0.5%的乳双歧杆菌(益生菌活菌密度为4.15×109CFU/mL）和嗜酸乳杆菌(益生菌活菌密度为4.4×109CFU/mL）；为了保证试验菌种的活性，菌种应每日新配并在4℃条件下进行保存，用搅拌机将其与日粮充分混合均匀之后使用。试验饲养持续42d。试验时间：2022 年6 月18 日—7 月29日，试验地点为平邑县运兴生态农场。

1.4 饲养管理方法

该次试验为全封闭管理，鸡舍中使用的饲养方法为3 层阶梯式笼养，肉鸡为1～21 日龄时，各笼中饲养10 只；肉鸡进入22～42 日龄后，各笼中饲养5 只。严格按照肉鸡饲养管理要求进行鸡舍环境管理，允许肉鸡自由进食与饮水。每日定时投喂饲料，并观察和记录鸡群的健康情况；按照正常程序进行疫苗的接种。记录各处理组饲料消耗量。

1.5 分析指标

1.5.1 生长性能

记录肉鸡初始体重，并于试验第21、42 天，分别对各处理组肉鸡进行称重，称重之前肉鸡禁食10h，但可自由饮水；结合试验期记录数据，计算肉鸡平均日增重 (ADG）、平均日采食量(ADFI）以及耗料增重比(F/G）。

1.5.2 免疫功能

免疫器官指数：

于试验第42 天，分别在各处理组随机抽选肉鸡3 只，在空腹(禁食10h、饮水自由）条件下称重，于翅下采集静脉血，屠宰。摘取试验肉鸡的胸腺、脾脏与法氏囊，将脂肪及结缔组织剔除并称重。计算公式：免疫器官指数=免疫器官鲜重(g）/宰前空腹体重(kg）×100%[3]。

血清免疫球蛋白：取试验采集血液放到促凝管里，在室温条件下静放20min，并以3000r/min的速度进行离心处理15min，取其上层血清，使用ELISA 试剂盒对IgA、IgG、IgM 含量指标进行测定

1.6 数据分析

采用SPSS 26.0 统计学软件对试验结果进行分析。结果以平均数±标准误表示，数据的检验使用F 检验，p＜0.05 表示差异显著。

2 结果和分析

2.1 益生菌对肉鸡生长性能的影响

由表2 可知，肉鸡在1～21 日龄、22～42 日龄时，处理2、处理3 平均日增重显著高于处理1 (p＜0.01），料重比显著低于处理1 (p＜0.01）；处理2 平均日增重均显著高于处理3 (p＜0.01），处理2 料重比显著低于处理3 (p＜0.01）。对于平均日采食量，1～21 日龄各组之间差异不显著，但在22～42 日龄时，处理2、处理3 平均日采食量显著高于处理1 (p＜0.01）。

表2 不同处理组肉鸡生长性能差异

2.2 益生菌对肉鸡免疫功能的影响

由表3 可知，在免疫器官指数上，处理2、处理3 胸腺指数、脾脏指数以及法氏囊指数均显著高于处理1 (p＜0.01），且处理2 显著高于处理3 (p＜0.01）；在血清免疫球蛋白上，处理2、处理3 肉鸡血清IgM 显著高于处理1 (p＜0.05），且处理2 肉鸡血清IgM 显著高于处理3 (p＜0.05），但IgG 和IgA 各组之间差异不显著(p＞0.05）。

表3 不同处理组肉鸡免疫功能差异

3 讨论

在本试验中，与处理1 相比，处理2、处理3 肉鸡在21 日龄及42 日龄时的平均日增重皆有显著提高、料重比均有明显降低，说明在日粮中添加0.5%的益生菌有利于改善肉鸡生长性能。其原因可能是益生菌会定植于肉鸡肠道中，刺激消化酶分泌，使得肉鸡能够更有效地吸收日粮当中的营养物质，从而促进其生长性能的提高[4]。此外，发现处理2 相较于处理3 的平均日增重更有显著提高、料重比更低，提示添加0.5%乳双歧杆菌相较于添加0.5%嗜酸乳杆菌更有利于提高肉鸡生长性能。可能是因为乳双歧杆菌在肉鸡胃肠道里的生存能力更高，胃肠道里的有效菌株能够竞争性的将致病菌排除，对免疫加以刺激，使胃肠道更好地利用营养物质，使肉鸡获得益处[5,6]。

胸腺、脾脏和法氏囊是重要的免疫器官，发挥着中枢、外周和体液免疫作用，其发育状况可以在很大程度上反映出机体的免疫水平[7]。在本试验中，42 日龄时，处理2、处理3 肉鸡胸腺指数、脾脏指数以及法氏囊指数都明显高于处理1，说明在日粮中添加0.5%益生菌有利于促进肉鸡免疫器官的生长发育，同时处理2 以上评估指数数据皆要更高于处理3，说明添加0.5%乳双歧杆菌相较于添加0.5%嗜酸乳杆菌更有利于肉鸡免疫器官的生长发育。另外，动物机体中的免疫球蛋白可通过对病原微生物的清除来溶解细菌、中和病毒，并基于抗原作用发挥重要的免疫调节功能[8]。在本试验中，处理2、处理3 肉鸡血清IgM 皆要显著高于处理1，且处理2 肉鸡血清IgM 更高于处理3，说明益生菌能够有效作用于对肉鸡机体免疫系统的调节，尤其是乳双歧杆菌可以通过对肉鸡机体抗炎因子、促炎因子水平的平衡维持，激活机体免疫系统，保证良好的免疫功能。

4 结论

在本试验条件下，综合考虑平均日增重、料重比、免疫器官指数和免疫球蛋白，日粮中添加益生菌能够显著提高肉鸡免疫功能与生长性能，与嗜酸乳杆菌相比，乳双歧杆菌的使用效果较好。