晕宁颗粒的薄层鉴别研究

孙 贤 赵 颖

南京市中医院药学部，江苏南京 210022

医院制剂即医疗机构自制制剂，大多来源于临床名老中医的经验方，体现了中医院的特色治疗优势，满足医院临床的需求，也为我国中成药开发奠定了基础。我国已批准上市的中成药品种有90%以上是基于医疗机构中药制剂研发出来的[1-2]，如从医疗机构制剂衍生的疗效显著、临床广泛应用的三九胃泰、复方丹参滴丸等[3]。晕宁颗粒是医院制剂，该方由制何首乌、芍药、丹参、陈皮等十味药组成，具有补益肝肾、熄风化痰等作用。本研究开展了薄层鉴别实验，以期有效控制该制剂的质量。

1 实验材料

仪器：超声波清洗机（昆山市超声仪有限公司，型号：KQ-500E）。

试药：丹参对照药材（批号：120923-201414）；何首乌对照药材（批号：121454-201405）；橙皮苷对照品（批号：110721-201617），以上对照药材、对照品均由中国食品药品鉴定研究院提供。乙酸乙酯、甲醇、甲酸、三氯甲烷、二氯甲烷均为分析纯（购自上海化学试剂有限公司）。

2 方法与结果

2.1 丹参的薄层色谱鉴别

取晕宁颗粒10 g，加水50 ml溶解，先加稀盐酸将pH调节至2，再用乙酸乙酯将溶液萃取2次，每次乙酸乙酯应用量为30 ml，取乙酸乙酯萃取液将其蒸干，残渣用2 ml甲醇溶解。取丹参药材2 g，加200 ml水煎煮30 min，过滤，滤液再加稀盐酸将pH调节至2，再用乙酸乙酯将溶液萃取2次，每次乙酸乙酯应用量为30 ml，取乙酸乙酯萃取液将其蒸干，残渣加2 ml甲醇溶液使其溶解。另按照处方取除丹参外的药材，按制备工艺路线制成缺丹参的阴性样品溶液，取适量阴性供试品溶液，按供试品溶液的制备方法制备丹参阴性供试品溶液。吸取对照品5 μl、供试品溶液10 μl、阴性样品溶液10 μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，放入展开系统1：三氯甲烷∶丙酮∶甲酸（25∶10∶2）及展开系统2：二氯甲烷∶甲醇∶甲酸（7∶0.4∶0.3）中，晾干后，喷显色剂5%香草醛浓硫酸溶液至薄层板上，放入105℃的烘箱烘至显色，斑点清晰，Rf值适中。在供试品溶液与对照品溶液一致的位置上，显色斑点一致，阴性供试品溶液没有干扰，因此确定以此展开剂进行实验。见图1。在不同湿度、不同厂家薄层板的情况下，按上述色谱条件展开，结果良好见图2～3。

图1 丹参薄层色谱图

图2 不同湿度下丹参的薄层色谱图

图3 不厂家薄层板下丹参的薄层色谱图

2.2 何首乌的薄层色谱鉴别

取晕宁颗粒10 g，加水50 ml使其溶解，过滤，滤液用20 ml二氯甲烷萃取2次，萃取液放置水浴上蒸干，残渣加2 ml甲醇溶液使其完全溶解，作为供试品溶液。取制何首乌对照药材2 g，加水200 ml煎煮30 min，过滤，滤液用20 ml二氯甲烷萃取2次，萃取液放置水浴上蒸干，残渣用2 ml甲醇使其完全溶解，作为供试品溶液。再按照处方取除何首乌以外的其他药材，按制备工艺路线制成缺何首乌的阴性供试品溶液，取适量的阴性供试品溶液，按供试品溶液的制备方法制备何首乌阴性供试品溶液。依照薄层色谱法，吸取对照品5 μl、供试品溶液8 μl、阴性制剂溶液8 μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，分别放入展系统1：二氯甲烷∶乙酸乙酯（18∶0.8）和展开系统2：三氯甲烷∶乙酸乙酯（10∶1）中，取出晾干，于365 nm紫外灯下观视，在供试品与对照品溶液一致的位置上，显色斑点一致，因此确定以此展开剂进行实验。见图4。本文还在不同湿度、不同厂家薄层板的情况下，按上述色谱条件展开，结果良好。见图5～6。

图4 何首乌薄层色谱图

图5 不同湿度条件下何首乌的薄层色谱图

图6 不同薄层板厂家下何首乌的薄层色谱图

2.3 陈皮的薄层色谱鉴别

取晕宁颗粒10 g，研细，加入甲醇溶液20 ml，超声处理30 min，过滤，滤液蒸干，残渣加甲醇2 ml使其完全溶解，作为供试品溶液。另取橙皮苷对照品1 mg，加入甲醇2 ml使其完全溶解，作为对照品溶液。再取除陈皮外的其他处方量药材，按制备工艺路线制成缺陈皮的阴性样品，取适量阴性样品按供试品溶液的制备方法制备陈皮阴性供试品溶液。照薄层色谱法，吸取对照品溶液5 μl、供试品溶液1 μl、阴性供试品溶液1 μl，点于同一硅胶G薄层板上，以展开系统1：乙酸乙酯∶甲酸∶水（12∶2∶3）和展开系统2：三氯甲烷∶甲醇∶水（13∶6∶2）的下层液为展开剂，展开后，取出晾干，喷显色剂3%三氯化铝-乙醇至薄层G板上，显色后，于365 nm的紫外灯下观视。在供试品溶液与对照品溶液一致位置上，显色斑点一致，Rf值适中，因此确定以此展开剂进行实验。见图7。本文还在不同湿度、不同厂家薄层板的情况下，按上述色谱条件展开，结果良好。见图8～9。

图7 陈皮薄层色谱图

图8 不同湿度条件下陈皮的薄层色谱图

图9 不同厂家薄层板下陈皮的薄层色谱图

3 讨论

本实验分别摸索了不同的展开系统，确定了一个最佳的展开系统，同时还摸索了不同湿度以及不同薄层板的条件下色谱展开情况，实验结果均良好，说明上述实验方法稳定、可行。

在丹参薄层色谱中，本实验试用了以下展开剂：三氯甲烷∶丙酮∶甲酸，二氯甲烷∶甲醇∶甲酸，二氯甲烷∶醋酸乙酯[4-7]。经过多次实验对比，最终确定将三氯甲烷∶丙酮∶甲酸（5∶2∶0.4）展开系统列入标准正文。

在何首乌薄层色谱中，本实验试用了以下展开剂：二氯甲烷∶乙酸乙酯，三氯甲烷∶乙酸乙酯，石油醚（30℃～60℃）∶甲酸乙酯∶甲酸层溶液[8-11]。经过多次实验对比，最终确定将二氯甲烷∶乙酸乙酯（18∶0.8）展开系统列入标准正文。

在陈皮薄层色谱中，本实验试用了以下展开剂：乙酸乙酯∶甲酸∶水，三氯甲烷∶甲醇∶水的下层液，乙酸乙酯∶甲醇∶水[12-15]。经过多次实验对比，最终确定将乙酸乙酯∶甲酸∶水（12∶2∶3）展开系统列入标准正文。