标本溶血对生化检验中电解质等指标的影响

寻丹 胡娴 杨沙沙

作者单位：湖南省职业病防治院检验科，湖南 长沙 410000

在临床检验科室中标本溶血现象较为普遍，由于临床检查标本未及时送检或者采集环节不规范等情况，均可能会造成出现标本溶血情况[1]。有相关临床表明，标本溶血会导致最终检测指标发生一定程度的变化，并且在标本溶血环节中相关因素（如继发性理化）的影响，均会不同程度造成临床检测指标出现异常波动或者精确度较低[2-3]。现阶段对于标本溶血对生化检验结果产生影响的相关研究资料较为丰富。但是其对于电解质、心肌酶等生化检测指标的影响还未进一步明确，同时局部指标研究结果存在争议性，为此还需开展研究进一步证实[4]。鉴于此，文章通过研究分析标本溶血对生化检验中相关指标（电解质、心肌酶）所带来的临床影响，旨在提供临床检测结果的准确性，现内容如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取湖南省职业病防治院2021 年4 月—2022 年4 月开展生化检验的外周血液样本（研究数量为150 份），将其视为本研究观察对象。纳入指标：（1）外周血液样本并未受到任何不良污染。（2）并未出现凝血块等物质。（3）在送检过程中未发生溶血情况。排除指标：（1）血液疾病者。（2）重要脏器功能障碍者。（3）患有器质性疾病。本研究经医院伦理委员会批准后才实施

1.2 方法

对全部送检样本进行离心干预，转速控制在1 000 r/min，离心时间为5 min，使用全自动生化分析仪（日本日立公司，型号：760-020）对电解质、肝功能以及血脂等相关生化指标进行检测，采取免疫发光法对N 末端B 型脑钠肽前体（N-terminal portion of pro-brain natriuretic peptide，NT-proBNP）和肌钙蛋白Ⅰ（cardiac troponin Ⅰ，cTnⅠ）进行检测。溶血操作如下：对血块进行搅动，促使血液样本出现溶血情况，进行离心干预（转速控制在3 000 r/min，离心时间为10 min），当肉眼能够观察到血清颜色为淡红色时，则可使用血球分析仪器（日本SYSMEX（希森美康）公司，型号：XN-20AI，血常规型号：XN-1000）对血红蛋白（hemoglobin，HGB）浓度水平进行检测，根据其溶血情况将其划分为轻中度溶血组（即HGB 浓度水平小于4 g/L，n=116）以及重度溶血组（HGB 浓度水平大于4 g/L，n=34）。

1.3 观察指标

研究分析溶血前后以及溶血情况不同的检测样本在电解质（K、Na、Cl、Ca）、心肌酶[肌酸激酶（creatine kinase，CK）、肌酸激酶同工酶（creatine kinase isoenzyme，CK-MB）、前体N末端前脑利钠肽（NT-proBNP）和肌钙蛋白Ⅰ（cTnⅠ）]、血脂水平相关指标[总胆固醇（serum total cholesterol，TC）、三酰甘油（triglyceride，TG）、高密度脂蛋白胆固醇（high-density lipoprotein cholesterol，HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（lowdensity lipoprotein cholesterol，LDL-C）]、肝功能相关指标[丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase，ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransferase，AST）、总蛋白（total protein，TP）]的变化情况[5]。

1.4 统计学方法

数据均放置于SPSS 25.0 统计学软件进行计算，计量资料以（±s）表示，采用t检验。以P＜0.05 表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 电解质相关指标的变化情况

较之溶血前，外周血样检测样本中电解质（K、Cl 以及Ca）相关指标水平均明显增加，并且较之轻中度溶血组而言，重度溶血组上述电解质指标水平均更高，差异有统计学意义（P＜0.05）；然而在溶血前、溶血后Na 指标水平差异无统计学意义（P＞0.05），见表1。

表1 电解质相关指标水平的变化情况（mmol/L， ±s）

表1 电解质相关指标水平的变化情况（mmol/L， ±s）

注：t1、P1 值为轻中度溶血与溶血前对比的统计值，t2、P2 值为重度溶血与溶血前对比的统计值，t3、P3 值为重度溶血与轻中度溶血对比的统计值。

组别 K Na Cl Ca溶血前（n=150） 4.22±0.23 129.76±2.26 95.56±3.79 2.39±0.27轻中度组（n=116） 5.09±0.39 129.89±3.51 105.94±4.13 2.57±0.42重度组（n=34） 6.32±0.41 129.95±3.76 112.23±5.24 3.12±0.45 t1 值 22.697 0.366 21.298 4.238 P1 值 0.000 0.715 0.000 0.000 t2 值 40.701 0.385 21.452 12.378 P2 值 0.000 0.701 0.000 0.000 t3 值 15.986 0.086 7.327 6.607 P3 值 0.000 0.931 0.000 0.000

2.2 心肌酶

较之溶血前，外周血样检测样本中心肌酶（CK、CK-MB、NT-proBNP 以及cTnⅠ）相关指标水平均明显增加，并且较之轻中度溶血组而言，重度溶血组上述电解质指标水平均更高，差异有统计学意义（P＜0.05），见表2。

表2 心肌酶相关指标的变化情况（±s）

表2 心肌酶相关指标的变化情况（±s）

注：t1、P1 值为轻中度溶血与溶血前对比的统计值，t2、P2 值为重度溶血与溶血前对比的统计值，t3、P3 值为重度溶血与轻中度溶血对比的统计值。

组别 CK（U/L） CK-MB（U/L） NT-proBNP（μg/L） cTnⅠ（μg/L）溶血前（n=150） 86.76±8.16 8.46±1.13 80.34±6.96 0.011±0.002轻中度组（n=116） 136.75±14.59 13.45±2.14 120.65±9.98 0.028±0.005重度组（n=34） 157.22±15.08 20.92±3.12 143.26±11.34 0.039±0.009 t1 值 35.419 24.491 38.766 37.919 P1 值 0.000 0.000 0.000 0.000 t2 值 37.911 39.130 41.743 34.783 P2 值 0.000 0.000 0.000 0.000 t3 值 7.140 16.003 11.257 9.213 P3 值 0.000 0.000 0.000 0.000

2.3 血脂水平相关指标

较之溶血前，外周血样检测样本中血脂（TC、LDL-C）相关指标浓度水平均明显增加，并且较之轻中度溶血组而言，重度溶血组上述电解质指标水平均更高，差异有统计学意义（P＜0.05）；然而在溶血前、溶血后TG 指标水平与HDL-C 指标水平差异无统计学意义（P＞0.05），见表3。

表3 血脂水平相关指标（mmol/L，±s）

表3 血脂水平相关指标（mmol/L，±s）

注：t1、P1 值为轻中度溶血与溶血前对比的统计值，t2、P2 值为重度溶血与溶血前对比的统计值，t3、P3 值为重度溶血与轻中度溶血对比的统计值。

组别 TC TG HDL-C LDL-C溶血前（n=150） 7.96±1.13 1.44±0.43 2.38±0.22 0.89±0.23轻中度组（n=116） 8.99±1.13 1.45±0.49 2.37±0.24 1.13±0.32重度组（n=34） 9.83±1.22 1.47±0.55 2.42±0.29 1.31±0.43 t1 值 7.372 0.177 0.353 7.113 P1 值 0.000 0.860 0.724 0.000 t2 值 8.585 0.348 0.899 7.977 P2 值 0.000 0.728 0.370 0.000 t3 值 3.743 0.204 1.017 2.656 P3 值 0.000 0.839 0.311 0.001

2.4 肝功能相关指标

较之溶血前，外周血样检测样本中肝功能（ALT、AST 以及TP）相关指标浓度水平均明显增加，并且较之轻中度溶血组而言，重度溶血组上述肝功能相关指标水平均更高，差异有统计学意义（P＜0.05），见表4。

表4 肝功能相关指标（±s）

表4 肝功能相关指标（±s）

注：t1、P1 值为轻中度溶血与溶血前对比的统计值，t2、P2 值为重度溶血与溶血前对比的统计值，t3、P3 值为重度溶血与轻中度溶血对比的统计值。

组别 ALT（IU/L） AST（IU/L） TP（g/L）溶血前（n=150） 16.79±2.22 20.13±2.89 72.69±2.46轻中度组（n=116） 20.93±0.79 33.23±3.07 74.26±3.13重度组（n=34） 26.79±2.74 45.42±3.22 85.36±4.74 t1 值 19.162 35.677 4.581 P1 值 0.000 0.000 0.000 t2 值 22.664 45.095 22.200 P2 值 0.000 0.000 0.000 t3 值 20.450 20.137 16.021 P3 值 0.000 0.000 0.000

3 讨论

标本存放的具体时长或者所使用的采血管的不同均可能会对标本采取环节中发生血细胞溶解等不良情况，从而造成血浆或者血清总血红蛋白指标浓度水平呈明显的上升趋势[6-7]。就血细胞溶解环节而言，通常情况下会随着显著理化因素的改变，细胞内部不同离子物质会逐渐释放，从而进入血液之中，病情细胞内部的相关大分子结合物质（例如肌钙蛋白与线粒体代谢产物等）指标水平均呈限制的上升趋势。有相关临床研究表明，通过研究分析一定数量的血液检测样本（数量为1 136 份），其中有部分血液样本（数量为139 份）出现溶血情况，并且一些血样检测样本溶血率已经超过25%[8]。究其原因，其一，可能是因为血液样本采集之后环境稳定具备不稳定性；其二，可能是由于转运时长相对较久等因素的影响[9]。通过对出现溶血现象的血液样本研究可知，溶血样本检测值波动性相对较为明显，指标水平的精确度相对较低，以至于可靠性不高。

电解质（如K、Cl 以及Ca 等）作为临床诊治过程中能够清楚反映出患者实际衰竭或者代谢或者电解质紊乱等情况中的主要评估指标之一，其会在血细胞溶解过程中大规模地释放与产生，能够一定对有关电解质波动情况起到中和作用，所以临床上对于电解质相关临床检测指标有无限制变化情况依旧存在着一定程度的争议[10-11]。本研究结果显示，在溶血后的外周血血液检测样本中电解质相关指标水平均显著高于溶血前的水平。由此可见，检测标本中K、Ca 以及Cl 等电解质指标水平会一定程度上受到溶血影响，然而在本研究中没有切实观察到溶血后电解质Na 指标水平的变化情况，可能是因为细胞外部Na 指标水平相对较高，细胞内部一些Na 指标水平在发生外流后并不会受到Na 数量的变化。为此Na 水平具备一定程度稳定性，并且K、Cl 等相关电解质离子变化和细胞分解后细胞质内部或者内质网内部有关离子的产生存在密切关联性[12]。心肌酶（如CK、CK-MB 等）相关指标水平是临床表现心肌梗死或者其他心血管相关疾病的一项关键参考指标，并且其所获得的临床检测值存在较为突出的临床意义[13-14]。本研究结果可知，心肌酶的变化情况比较限制。有相关临床研究表明，在对溶血标本进行检测时，溶血后的CK 与CK-MB 等相关心肌酶指标水平均大约增加了25%、30%，并且伴随着溶血时间不断增加，溶血程度则会呈明显的上升趋势，并且上述心肌酶评估指标水平的变化程度也会更加明显[15-16]。就机制角度出现，此种情况可能和溶血时间较久而造成血浆之中有关心肌酶谱的积聚情况存在密切关联性，同时也可能是由于溶血后血浆中相互结合情况的心肌酶谱释放有关。本研究结果显示，溶血后血脂相关指标（TC、LDL-C）水平产生显著的改变，然而并没有切实观察到TG、HDL-C 的改变，在临床检测过程中HDL-C 与LDL-C 均能够将其视为评估心血管疾病的主要危险影响因素。通过对HDL-C 与LDL-C 进行检测，其具备良好的稳定性，能够将其视为临床溶血中比较可靠、准确的评估参考依据[17-19]。本研究结果还表明，溶血后样本肝功能相关指标水平（如ALT、AST 以及TP）均呈显著上升趋势，就机制方面而言，溶血后肝功能相关指标水平的明显上升可能和下面因素存在密切关联，具体如下：其一，肝功能相关指标水平在血细胞内部具备一定表达情况，溶血后因为线粒体膜组织的通透性提高，进而导致肝功能相关指标水平的产生与释放[20]。其二，在实际溶血环节中，因为血浆（继发性）中不同细胞成分的不断积聚，能够明显推动内质网或者线粒体应激反应更加强烈，从而导致肝功能有关指标水平波动更加限制。

综上，标本溶血对于生化检测结果之中电解质（如K、Ca 等）、心肌酶（如CK、CK-MB 等）、肝功能相关指标水平（ALT、AST 以及TP）以及血脂相关指标水平（TC、LDL-C）均存在较为显著的影响，然而在溶血后患者血清检测样本中HDL-C 与TG 等相关指标水平的变化却不太限制，为此应该进一步扩大研究样本数量，对上述相关指标水平的具体机制进一步深度研究与分析。此外，文章中体现了《溶血指数质量指标建立与标本管理专家共识》[21]的临床参考或执行标准。