血小板/淋巴细胞比值联合血清降钙素原及淀粉样蛋白A检测在新生儿坏死性小肠结肠炎中的诊断价值

钱玉萍，刘光辉，赵钰玮，张 健

安徽省儿童医院新生儿科，安徽合肥 230022

新生儿坏死性小肠结肠炎(NEC)是新生儿常发的一种胃肠道急症。目前，对于该病的发病机制尚不清楚，有研究指出该病可能与缺氧、肠内菌群失调等有一定的关系，常发病于出生两周内的新生儿[1]。其临床表现主要为拒食、腹泻、血便、呕吐等，近年来NEC的发病率逐年上升，病死率高达50%，严重威胁新生儿的健康及生命，早期诊断及制订治疗方案显得尤为重要[2]。目前，临床诊断NEC常用的实验室指标包括血常规、C反应蛋白等，但是这些指标缺乏特异性，而病原学检查又由于阳性率低、耗时长等缺点，早期诊断价值不高。因此，有学者提出采用炎症标志物联合检测的方法以提高临床诊断价值[3]。血小板/淋巴细胞比值(PLR)是近几年提出的能够反映体内炎症状况的敏感指标，有研究称PLR与感染、肿瘤等疾病有密切的关系[4]。降钙素原(PCT)是反映机体炎症状况的降钙素前肽物质，机体感染细菌2～3 h异常上升，是临床应用较为方便的敏感指标[5]。血清淀粉样蛋白A(SAA)作为一种急性时相反应蛋白，在身体发生炎症或者处于感染急性期时会急速升高，恢复期时又会迅速下降，在儿童感染性疾病中有较高的诊断价值，但对NEC是否有预测价值尚不清楚。基于此，本研究选取2018年6月至2020年12月在本院新生儿科出生的90例NEC患儿为研究对象，探讨PLR联合PCT、SAA检测在NEC诊断中的应用价值。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2018年6月至2020年12月在本院新生儿科就诊的90例NEC患儿为观察组，其中男49例，女41例；日龄1～20 d，平均(6.56±3.48)d。按照Bell分期标准[6]进行分期：Ⅰ期患儿25例，Ⅱ期患儿48例，Ⅲ期患儿17例。(1)纳入标准：①住院时间大于24 h；②纳入前未接受过任何形式的治疗；③积极配合治疗且资料完整；④所有患儿符合《实用新生儿学》[7]中的NEC诊断标准。(2)排除标准：①存在消化道畸形等先天性畸形；②合并脏器衰竭；③中途放弃治疗。同期选择健康新生儿80例为对照组，其中男49例，女31例，日龄1～21 d，平均(6.73±3.52)d。本研究所有新生儿家长了解本研究并签署知情同意书，本研究经本院医学伦理委员会批准。

1.2仪器与试剂 M16RS低温高速离心机购自上海迈皋科学仪器有限公司；—80 ℃立式超低温冰箱购自赛默飞世尔科技(中国)有限公司；PCT酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒、SAA ELISA试剂盒均购自上海酶联生物科技有限公司；酶标仪购自上海众磊生物技术有限公司；DxH800血细胞分析仪购自贝克曼库尔特商贸(中国)有限公司。

1.3方法

1.3.1标本采集 两组新生儿均于入组后空腹采集静脉血标本3 mL，3 000 r/min高速离心10 min，分离血清于EP管中，并记录编号和日期，于—80 ℃冰箱中保存备用。

1.3.2临床资料收集 收集所有研究对象临床资料，包括：(1)产前母亲是否使用过糖皮质激素、感染肺炎、存在感染性休克；生产方式、产时有无窒息；新生儿的性别、体质量；出生后是否患有败血症、服用益生菌。(2)采用ELISA检测新生儿血清PCT、SAA水平，其试验步骤严格遵循试剂盒说明书。使用DxH800血细胞分析仪进行血常规分析，包括血小板计数(PLT)、淋巴细胞计数(L)，计算PLR。

2 结 果

2.1两组新生儿基线资料比较 两组新生儿体质量、产时窒息发生情况、产前使用糖皮质激素比例、败血症发生情况、服用益生菌比例、感染性休克发生情况等基线资料比较，差异有统计学意义(P<0.05)，而两组新生儿性别、日龄、分娩方式、感染肺炎发生情况等资料比较，差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

2.2两组新生儿PLR、PCT及SAA水平比较 观察组PLR、PCT、SAA水平较对照组明显升高，差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表1 两组新生儿基线资料比较[n(%)]

组别n产前使用糖皮质激素是否败血症有无分娩方式自然分娩剖宫产观察组9031(34.44)59(65.56)49(54.44)41(45.56)49(54.44)41(45.56)对照组8060(75.00)20(25.00)14(17.50)66(82.50)39(48.75)41(51.25)χ226.39723.2250.346P<0.001<0.0010.557

组别n服用益生菌是否感染性休克是否感染肺炎有无观察组9040(44.44)50(55.56)50(55.56)40(44.44)35(38.89)55(61.11)对照组8056(70.00)24(30.00)6(7.50)74(92.50)40(50.00)40(50.00)χ210.23742.1281.694P0.001<0.0010.193

表2 两组新生儿PLR、PCT及SAA水平比较

2.3不同分期NEC患儿PLR、PCT及SAA水平比较 不同分期NEC患儿PLR、PCT、SAA水平比较，差异有统计学意义(P<0.05)。Ⅲ期患儿PLR高于Ⅱ期患儿，差异有统计学意义(q=5.697，P<0.05)；Ⅱ期患儿PLR、PCT、SAA水平均高于Ⅰ期患儿，差异有统计学意义(q=11.292、0.029、0.025，P<0.05)；Ⅲ期患儿PLR、PCT、SAA水平均高于Ⅰ期患儿，差异有统计学意义(q=10.741、5.022、3.597，P<0.05)。见表3。

2.4ROC曲线分析PLR、PCT、SAA及3项指标联合检测对NEC的诊断价值 ROC曲线分析结果显示，PLR、PCT、SAA 3项指标联合检测诊断NEC的曲线下面积(AUC)为0.856，灵敏度为84.3%，特异度为87.5%，其AUC明显大于3项指标单独检测的AUC(P<0.05)。见表4。

表3 不同分期NEC患儿PLR、PCT及SAA水平比较

表4 ROC曲线分析PLR、PCT、SAA及3项指标联合检测对NEC的诊断价值

2.5多因素Logistic回归分析影响NEC的危险因素 将2.1基线资料中体质量、产时窒息、产前使用糖皮质激素、败血症、服用益生菌、感染性休克、PLR、PCT、SAA作为因变量进行多因素Logistic回归分析，结果显示败血症及PLR、PCT、SAA水平升高是新生儿发生NEC的独立危险因素(P<0.05)，服用益生菌是保护因素(P<0.05)。见表5。

表5 多因素Logistic回归分析NEC的危险因素

3 讨 论

NEC是常发于早产儿且病死率较高的消化道疾病，该疾病的发生是由多方面的因素共同造成的。严重的NEC可引发一系列的并发症，如肠穿孔、器官衰竭等，严重者甚至可导致患儿死亡[8]。但该病的早期症状并不典型，常与急性肠炎等肠道疾病混淆。因此，研究能早期准确诊断NEC的敏感标志物对该病的预防和治疗有十分重要的意义。

PLR是一种反映机体炎症的指标，当体内PLR升高，预示着身体免疫功能遭到破坏，进而引起炎症反应，促进肠道疾病的发生[9]。勾熙等[10]研究发现，溃疡性结肠炎临床活动组PLR明显高于溃疡性结肠炎临床缓解组，且PLR与患者病情严重程度呈正相关。程迎迎等[11]指出，PLR在溃疡性结肠炎患者外周血中明显升高，PLR诊断溃疡性结肠炎的效能优于常用指标PLT。PCT是无活性降钙素前肽物质，在体内可以预测细菌感染状况，其水平与感染程度呈正相关，对炎症性疾病的判断和预防有十分重要的作用[12]。尹琳琳等[13]的研究发现，NEC早产儿血清中PCT水平明显高于健康早产儿，且提示血清中PCT水平预测NEC有一定的参考价值。李菲等[14]研究表明，NEC新生儿血清PCT水平明显高于健康新生儿，且Ⅲ期患儿明显高于Ⅱ期患儿，Ⅱ期患儿明显高于Ⅰ期患儿。SAA是多基因编码的多形态蛋白家族成员，在早期肝脏损伤或者感染时，由肝细胞分泌，属于急性时相反应蛋白，在感染性疾病中有一定的诊断价值。颜灵静等[15]研究发现，NEC患儿血清SAA水平明显高于健康对照者，且与患儿严重程度有关，刘欣等[16]研究结果也符合这一规律。

本研究中，观察组PLR、PCT、SAA水平较对照组均明显升高，且Ⅲ期患儿PLR高于Ⅱ期患儿，Ⅱ、Ⅲ期患儿PLR、PCT、SAA水平高于Ⅰ期患儿，提示PLR、PCT、SAA参与了该病的发生、发展，3项指标可反映该病的严重程度。NEC的发病是由多种因素引起的，BORTOLIN等[17]研究表明，产前使用糖皮质激素可以促进肠黏膜发育成熟，从而减轻肠坏死程度。邹耀明等[18]研究表明，产时窒息、败血症是NEC发生的危险因素，而发病前口服益生菌是其保护因素，可减少NEC的发病风险。而本研究多因素Logistic回归分析结果显示，败血症及PLR、PCT、SAA水平升高是新生儿发生NEC的独立危险因素(P<0.05)，服用益生菌是保护因素(P<0.05)。这提示新生儿服用益生菌可减少NEC的发病率，且应严格监测有以上危险因素新生儿的相关指标，并采取一定干预措施。败血症是病原菌进入血液而引起的全身性感染疾病，而新生儿肠道功能较弱，很容易发生肠道感染，从而造成肠道坏死。益生菌可以改善肠道正常菌群，增强杀菌力，改善肠道黏膜功能。ROC曲线分析结果显示，PLR、PCT、SAA 3项指标联合检测诊断NEC的AUC为0.856，灵敏度为84.3%，特异度为87.5%，其AUC明显大于3项指标单独检测的AUC，提示3项指标联合检测对早期NEC具有更高的诊断价值，有被广泛应用于临床的前景。

综上所述，NEC患儿血清PLR、PCT及SAA水平上升，3项指标联合检测对NEC的诊断效能优于单独检测。