乳鸽副伤寒沙门氏菌病的诊治

王梦鸽 江 斌 程龙飞 林 琳 张世忠 黄 瑜 傅光华

（1.福建省农业科学院畜牧兽医研究所/福建省禽病防治重点实验室 福州 350013；2.福建农林大学 福州 350002）

鸽沙门氏菌病是由沙门氏菌引起鸽的一种急性或亚急性细菌性疾病，发病鸽群的主要临床特征为腹泻、机体消瘦，精神沉郁、食欲减退、羽毛凌乱、关节异常肿大、单腿站立[1-2]。根据患鸽的临床症状及剖检病变，该病可分为神经型、肠型、关节炎型及内脏型等4种不同病症[1]。1月龄雏鸽对该病更易感，严重者可引起患鸽死亡，且一年四季均可发生，气候多变时易发[1-2]。在我国，肉鸽集约化和规模化养殖呈现不断扩大趋势，然而，由于肉鸽发病时抗菌药物使用过多甚至滥用，导致该菌的耐药性不断增强，养殖场一旦发病难以根治，危害极大[3-4]。沙门氏菌为兼性胞内寄生菌，可在宿主细胞内生存繁殖，从而逃避宿主的防御机能，感染沙门氏菌的患鸽治愈后还会长期带菌，并通过唾液或粪便等持续排出[5]。沙门氏菌不仅可以通过消化道、呼吸道、皮肤及眼结膜等不同途径水平传播，感染包括人在内的多种宿主，也可通过带菌的种鸽垂直传播给乳鸽，成为人类感染沙门氏菌的潜在传染源，开展鸽沙门氏菌病监测具有重要的公共卫生学意义[1]。2022年3月，福建省闽侯县某鸽场饲养的4 000羽24日龄乳鸽陆续出现腹泻，经实验室病原分离鉴定及序列比对分析，最终确诊为乳鸽副伤寒沙门氏菌病，现将诊断情况报道如下，为预防和控制该病的流行提供参考依据。

1 发病情况与临床症状

福建省闽侯县某鸽场饲养的4 000羽乳鸽24日龄时陆续出现不同程度腹泻，发病率55%左右，病死率5.7%。就诊时患病乳鸽主要表现为精神沉郁，食欲减退，体况明显消瘦，行动迟缓，呼吸困难，腹泻，排黏稠深绿或褐色、有恶臭气味粪便，部分粪便包裹浆状的未消化饲料。

2 剖检病变

剖检患鸽可见肝脏呈古铜色或暗红色，部分肝脏表面有坏死；心肌与心包黏连；肾脏肿大出血；肺脏出血；小肠胀气、肠壁变薄，内含绿色或黄绿色或白色带泡沫的糊状物。

3 实验室病原检测

3.1 细菌分离鉴定 无菌采集病死鸽的脑、肝脏、小肠内容物等组织病料，用灭菌接种环挑取适量组织划线接种于麦康凯平板，置37℃恒温箱培养。24 h后在麦康凯平板上长出圆形半透明的灰白色菌落。挑取单个菌落划线接种于新的麦康凯平板，37℃温箱培养24 h，获得纯化菌。取少量菌落涂片、革兰氏染色，镜检可见革兰氏阴性短杆菌。

3.2 药敏试验 从纯化菌中挑取3～4个菌落接种于LB液体培养基，37℃、200 r/min振荡培养18 h，按照药敏试剂盒说明书进行分离菌的药敏试验。取增殖培养的菌液均匀涂布于麦康凯平板上，将19种药敏纸片按一定间距摆放在平皿上，室温静置15～30 min后，将平板倒置于37℃温箱静置培养24 h。取出平板，用游标卡尺测量每个药敏纸片抑菌圈直径，参照中国药检所制定的标准判定细菌对药物的敏感性。结果详见表1。

表1 分离菌药敏试验结果

3.3 细菌的PCR鉴定 根据沙门氏菌侵袭蛋白A基因序列，设计一对沙门氏菌特异性扩增引物，上游引物：SSTF：5'-CAGGTATGACTCGTAAGC-3'；下游引物：SSTR：5'-ATAGTCATTCGCGTGTGG-3'，预期扩增片段为910 bp；禽多杀性巴氏杆菌和大肠杆菌参照施少华等[6-7]建立的方法进行检测，所有引物由尚亚生物技术有限公司合成。按照细菌核酸提取试剂盒的说明提取分离菌的核酸，用所设计的特异性引物进行PCR扩增，扩增体系为：2×PCRMasterMix 25 μL，上下游引物（10 μmol）各1 μL，模板1 μL，补充灭菌去离子水至总体积50 μL。PCR反应程序：94℃5 min；94℃40 s，53～55℃30 s，72℃60 s，30个循环；72℃10 min，10℃保存。取PCR产物3 μL进行1%琼脂糖凝胶（含GoldView）电泳，凝胶成像系统观察并拍照。结果见图1，分离菌扩增出单一的PCR片段，大小约为910 bp。

图1 分离菌PCR产物电泳图

3.4 序列测定与分析 将PCR阳性扩增产物送铂尚生物技术（上海）有限公司测序，测序结果使用NCBI blast进行在线比对。序列比对结果显示，分离菌株与GenBank中登录的沙门氏菌MDUST305毒株侵袭蛋白A基因同源性高达98.3%，表明分离菌为伤寒沙门氏菌。

4 诊 断

根据该病的临床症状、剖检病变及实验室检查结果，诊断为鸽副伤寒沙门氏菌病。

5 防 治

5.1 治疗 药物治疗虽然可减少发病死亡，但治疗后鸽子仍将长期带菌和排菌。治疗该病的药物有很多，如盐酸环丙沙星、恩诺沙星、氟苯尼考、硫酸新霉素、磺胺二甲基嘧啶、硫酸庆大霉素、丁胺卡那霉素、硫酸黏菌素等[1,3]，但沙门氏菌容易产生耐药性，临床上需对分离菌株进行药敏试验后选择敏感药物进行治疗[8-9]。此次药敏试验结果显示，分离菌株对氧氟沙星和壮观霉素敏感，对阿米卡星、诺氟沙星、卡那霉素中敏，选取药敏试验筛选到的敏感药物对鸽群进行针对性治疗，取得了良好效果。

5.2 预防 鸽沙门氏菌病的预防主要还是加强饲养管理，搞好舍内环境卫生，保持鸽舍良好的采光和通风，保证鸽群饮水清洁和饲料的营养均衡，适当补充益生菌和微量元素等，提高机体抵抗力[1-2]。平时制定严格人员、物流、饲养舍和环境的消毒计划，做好鸽场的检疫和净化工作，定期对鸽舍不同区域内的环境进行消毒，阻断疫病传播途径，同时，要利用多种检测手段定期对鸽群进行感染筛查，及时淘汰阳性带菌鸽。

6 讨 论

1）沙门氏菌是鸽的一种常见病原体，肉鸽养殖的规模不断扩大，鸽沙门氏菌感染仍十分严重[4,9]。沙门氏菌还是一种危害较大的人兽共患病原，对人、家畜、家禽及其他动物均有致病性，且各种年龄的动物均可感染，尤其是被污染的动物及其制品，通过食物链传播给人及其他动物[1-2]。因此，应该在肉鸽养殖生产中密切关注鸽沙门氏菌病的流行情况，做到早发现、早诊断、早隔离、早治疗，尽最大程度减少损失。

2）抗生素的应用对鸽沙门氏菌病的防控具有重要作用，但由于过量或不规范的使用抗菌药物，导致沙门氏菌普遍存在耐药性[3-4]，使该病的防治日益复杂严峻。在养殖生产中可采取轮换、交替、联合等科学的用药方式，从而避免或减少耐药菌株产生。抗生素替代品如益生菌、益生元、抗菌肽、植物提取物以及复合添加剂等[8]，其在替代抗生素防控鸽沙门氏菌病上也具有重要意义。