H-FABP、miRNA-21、GDF15对急性胸痛的预测价值研究

刘 勋，戴 领，冯 源，赵 貤

(1.四川省攀枝花市中心医院急诊科，四川 攀枝花 617067；2.四川省攀枝花市中心医院药学部，四川 攀枝花617067)

急性胸痛是急诊科室常见的疾病之一，其临床表现多样复杂、轻重不一，严重的胸痛可能会致命，急性胸痛可由带状疱疹、胸膜炎、肺炎、肺部肿瘤、气胸、心肌炎、心肌梗死、心绞痛等原因引起[1-2]。我国急性胸痛确诊患者逐年上升，不同地区的数据存在不同的差异[3]。因此找到对急性胸痛预测的指标具有重要意义，有研究表明，心型脂肪酸结合蛋白(heart type-fatty acid binding protein，H-FABP)是心脏内的一种新型小胞质蛋白，是心脏最丰富的蛋白之一，占心肌细胞可溶性蛋白总量4%～8%，是由132个氨基酸组成的低相对分子质量蛋白质，其在心肌脂肪酸代谢中起作用[4]。当出现急性心梗死后，心肌细胞内H-FABP快速释放出来，胸痛发作后1～3 h便可在血液内被检测到，对于急性心梗死的早期鉴别具有良好敏感度和特异度[5]；微小RNA-21(microRNA-21,miRNA-21)是由约22个核苷酸组成的，小的、高度保守的非编码RNA分子[6]。miRNA通过抑制靶基因的信使RNA翻译或通过促进mRNA降解调节基因表达。有证据表明，miRNA在许多生物过程中发挥重要作用，包括增殖、分化和凋亡，且涉及各种类型心血管疾病[7]；生长分化因子15(growth differentiation factor 15，GDF15)作为心血管疾病危险因子，证明与急性胸痛发生率及病死率相关[8]。此外，GDF15水平与冠状动脉狭窄有关，并与其严重程度具有相关性，可提示侧支循环缺陷及病变冠状动脉数。目前，H-FABP、miRNA-21、GDF15联合在急性胸痛中研究的文章较少，本研究旨在探究H-FABP、miRNA-21、GDF15表达在急性胸痛中的预测价值，为其治疗提供新思路。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2018年1月—2020年1月我院接诊的急性胸痛患者600例为观察组，包括男性397例，女性203例，年龄30～61岁，平均(45.5±12.4)岁，高血压373例，糖尿病127例，空腹血糖(8.21±1.01)mmol/L，体重指数24.18±1.86，危险分层[9]：高危患者266例(意识改变；血压异常且治疗后无改善；呼吸困难，患侧胸廓饱满；合并致命性胸痛疾病，如高危急性冠状动脉综述合征、动脉粥样硬化病、肺栓塞及张力性气胸)、中低危患者334例(包括心源性和非心源性，不包括上述症状的患者，超过1周的轻度胸痛)。同期选取体检人员600例为对照组，包括男性359例，女性241例，年龄28～62岁，平均(45.0±13.6)岁，高血压75例，糖尿病24例，空腹血糖(8.15±0.98)mmol/L，体重指数24.21±1.90。2组一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

纳入标准：符合中华医学会急诊医学分会对急性胸痛的诊断标准[9]；依从性高者；无恶性肿瘤者；免疫功能正常者。排除标准：哺乳期或妊娠期女性；感染性疾病；临床资料缺失者；无法完整配合评分者；凝血功能障碍者；血液系统疾病者。

本研究通过医院伦理委员会批准实施，所有患者及家属均知情同意且签署知情同意书。

1.2指标观察

1.2.1血清H-FABP、miRNA-21、GDF15水平检测 所有病例均于就诊时采肘部静脉血2mL，样本采集后离心处理10 min(离心半径5 cm，转速3 000 r/min)于-70 ℃冰箱保存待测。健康对照组人群采空腹静脉血2 mL，如上述分离血清法分离并储存。采用双抗体夹心酶联免疫法检测血清H-FABP、GDF15。H-FABP、GDF15试剂盒购自(上海恒远生物科技有限公司)检测仪器为SuPerMax 3100型多功能酶标仪(上海闪谱生物科技有限公司)。提取miRNA-21总RNA，对提取总RNA的纯度、含量进行检测，随后逆转，逆转录处理后获得cDNA，获得cDNA后使用Primer5.0软件设计引物，内参U6。miRNA-21引物序列：上游5′-ACACTCCAGCTGGGTAGCTTATCAGACTGA-T-3′,下游5′-ACTGGTGTCGTGGAGTCG-3,其余步骤按说明书严格进行。采用2-△△Ct方法计算出需要检测的miRNA-21相对表达量。采用荧光定量聚合酶链反应试剂盒(上海泽叶生物科技有限公司)检测miRNA-21相对表达量，检测过程严格按照试剂及仪器使用说明书进行。

1.2.2HEART评分[10]由病史、心电图、年龄、危险因素、肌钙蛋白5项构成，每个条目赋值0～2分，总分10分；0～3分为低危，4～6分为中危，7～10分为高危。

1.2.3改良的早期预警评分(modified early warning score,MEWS)[11]由体温(0～2分)、心率(0～3分)、呼吸频率(0～3分)、收缩压(0～3分)和意识状态(0～3分)5个变量组成，总分0～14分，得分越高表示病情越重。

1.2.4肾功能检测 检查肾功能的指标是血清尿素、血肌酐、血β2-微球蛋白、尿酸等指标，其中有一项异常则判定为下降。

1.3统计学方法 应用SPSS25.0软件分析数据。计量资料比较采用独立样本t检验；计数资料比较采用χ2检验，用GraphPad Prism 7软件做受试者特征曲线(receiver operator characteristics curve，ROC)图，分析H-FABP、miRNA-21、GDF15对急性胸痛患者的预测价值。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.12组血清H-FABP、miRNA-21、GDF15水平比较 急性胸痛组患者血清H-FABP、miRNA-21、GDF15水平高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 2组血清H-FABP、miRNA-21、GDF15水平比较

2.2不同患病程度急性胸痛患者血清H-FABP、miRNA-21、GDF15水平比较 高危患者血清H-FABP、miRNA-21、GDF15水平高于低危患者，差异有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表2 不同患病程度急性胸痛患者血清H-FABP、miRNA-21、GDF15水平比较

2.3H-FABP、miRNA-21、GDF15与急性胸痛患者病理特征关系 H-FABP、miRNA-21、GDF15与急性胸痛患者年龄、性别比较差异无统计学意义(P>0.05)，与MEWS评分、HEART评分、肾功能有关。MEWS评分≥7、HEART评分≥5、肾功能下降患者H-FABP、miRNA-21、GDF15表达水平较高，差异有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表3 H-FABP、miRNA-21、GDF15与急性胸痛患者病理特征关系

2.4H-FABP、miRNA-21、GDF15对急性胸痛的诊断价值 ROC分析H-FABP、miRNA-21、GDF15诊断急性胸痛的敏感度低于3项联合，差异有统计学意义(P<0.05)。H-FABP、miRNA-21联合GDF15检测对急性胸痛诊断效能较高，差异有统计学意义(P<0.05)。见表4，图1。

表4 H-FABP、miRNA-21、GDF15对急性胸痛的诊断价值

图1 H-FABP、miRNA-21、GDF15对急性胸痛的诊断价值

3 讨 论

胸痛是临床常见的急诊症状之一，主观的感觉是胸部出现刺痛、钝痛、闷痛或感到有物品压迫进而表现出压迫感，伴有呼吸困难等症状，常常出现紧张、焦虑、恐惧等情绪[12-13]。急性胸膜炎、自发性气胸、外伤易引起急性胸痛，由细菌感染引起，也可由结核菌感染引起。急诊科急性胸痛患者的病死率高于其他症状的入院者，急性胸痛表现多样，病情千变万化，危险性也存在着较大区别[14-15]。

高危急性胸痛发病急，临床表现重，病因繁多，急性冠状动脉综合征、急性肺动脉栓塞、主动脉夹层等均可引发高危急性胸痛。高危急性胸痛的危害大，可引发心力衰竭、心源性休克、甚至心室颤动、死亡，临床需立即对胸痛的危险程度作出准确的诊断，以采取及时有效的措施进行救治，保障患者的生命安全。但临床对高危急性胸痛的诊断尚存在一定的不足，因此，需寻找更为有效的诊断方法。H-FABP在心肌脂肪酸代谢中起作用，可以协助脂肪酸通过特定的膜转运到组织，是一种小相对分子质量的胞浆蛋白，存在于心肌细胞内，由于其分子结构与免疫学特性不同于其他类型的FABP而具有心肌特异度[16]。有研究表明，H-FABP通过对长链脂肪酸的摄取、运载、酯化和β氧化等环节调节长链脂肪酸的氧化供能及磷脂、三酰甘油的代谢[17]。薛炎等[18]研究显示，H-FABP可以迅速透过细胞膜进入血液循环，在1～3 h内阳性率远远高于其他标志物，对其水平检测能够反应急性胸痛的严重程度，证实H-FABP在急性胸痛中的作用。本研究说明，H-FABP在急性胸痛患者血清中表达较高，且随着疾病严重程度的加重，其表达水平逐渐升高，且MEWS评分≥7、HEART评分≥5、肾功能下降患者其H-FABP表达水平较高。

miRNA-21是miRNA家族中的一个亚型，定位于17号染色体，在多种心脏疾病中过表达[19]。Song等[20]研究显示，miRNA-21在多种心血管疾病中起重要作用，miRNA-21还能通过抑制弹力蛋白同工异构体的表达激活蛋白激酶B信号途径从而发挥抗细胞凋亡作用，诱导miRNA-21表达能减轻心肌缺血再灌注损伤。但临床有关miRNA-21与急性胸痛相关研究较少，其作用有待进一步研究证实。本研究说明，miRNA-21随着疾病严重程度的加重，其表达水平逐渐升高，且MEWS评分≥7、HEART评分≥5、肾功能下降患者其miRNA-21表达水平较高。

CDF-15也被称为胎盘转化生长因子，是一种炎性调节因子，其作为肿瘤坏死因子β超家族的一个成员，主要在胎盘组织表达，在心肌损伤中呈现高表达[21]。有研究认为GDF-15是一种组织损伤诱导的细胞因子，可保护心肌免受缺血或再灌注损伤，可提供很好的预测价值。马冬璞等[22]研究显示，GDF15为新显示的心血管疾病危险因子，在急性胸痛发病机制方面可以进行更为深入的探讨，其可能成为一种新型的急性胸痛病变程度预测指标，对急性胸痛患者危险分层显示GDF15水平与急性胸痛发生率及病死率相关。但关于GDF15对急性胸痛的早期诊断预测价值相关研究较少。本研究说明，GDF15在急性胸痛中的表达较高，随着病情加重其表达水平逐渐升高，且MEWS评分≥7、HEART评分≥5、肾功能下降患者其GDF15表达水平较高。

综上所述，H-FABP、miRNA-21、GDF15在急性胸痛患者血清中高表达，H-FABP、miRNA-21、GDF15三者联合检测对急性胸痛患者的诊断价值较高，对预后作用比较重要。但本研究病例数较少，结果可能受影响，仍需进一步研究证实。