浆膜腔积液细胞形态学检测的临床价值和应用

李俊虹，刘帮伟，陈 飞，毕 胜

(云南省第一人民医院/昆明理工大学附属昆华医院 1.检验科 2.肾内科，云南 昆明 650032)

机体在外伤、肿瘤、炎症等病理状态时，浆膜腔积液及脑脊液往往在数量和内容上发生改变，体液细胞学检测就是对这一时期积液内存在的常见细胞如间皮细胞，炎症细胞，肿瘤细胞，寄生虫等进行检查，获得数量和形态上的信息[1]。通过对 WBC 计数及分类为临床提示积液性质，有无炎症，对 RBC 计数可以提示临床血性标本是机械性损伤或病理性原因引起的，通过对异常细胞形态的观察，可以为临床提示肿瘤的可能，或提示临床做进一步做检查。从而为临床确定诊疗方案、判断愈后情况等提供较高的实验室检验价值。体液细胞形态学检查是初步鉴别浆膜腔积液性质的基础性项目，是诊断和鉴别诊断多种相关性疾病的常规检测手段[2，3]。传统的体液细胞学形态检查是直接镜检和进行细胞的计数和分类，但操作粗糙、误差较大、漏检率和误检率高[4]。目前，体液细胞学自动化检测技术日趋发展，检测速度和精密度明显提高，虽然可以弥补手工法的不足，但也不能完全代替手工法，特别在细胞形态分类方面，异常细胞的确认还需结合显微镜进一步观察[5-7]。

1 对象方法

1.1 研究对象

收集2016年5月-2019年12月就诊于云南省第一人民医院的患者标本198例，患者已签署了知情同意书。患者年龄2～80岁，男性122例，女性76例，其中胸水110例，腹水51例，关节液1例、心包积液4例，滑膜腔积液1例，腹膜透析液2例，脑脊液29例，每例标本确保2～6 mL。

1.2 研究方法

1.2.1 试剂与仪器

莱卡相差显微镜、SysmexXT-4000i全自动血球分析仪、低速台式离心机、一次性塑料吸管、瑞氏染液。

1.2.2 全自动血球分析仪XT-4000i仪器检测

将EDTA-K2抗凝的体液标本198份于1 h内严格按照标准化操作规程选用全自动血球分析仪XT-4000i的体液模式下进行上机检测，获得分叶核细胞(PMN(#%))、单个核细胞(MN(#%))、高荧光(HF-BF(#%))的检测结果。

1.2.3 手工制片

将标本置低速离心机(转速：1500 r/min，离心力：400 g，时间：5 min)离心沉淀后吸出上面的液体丢弃，保留底部少量的液体，把管底的液体轻轻混匀，制成涂片规格约为2.5*1.0 cm(长*宽)的图片；待手工制片自然干燥后，固定标本，用血球瑞氏染液按染血片的方法进行染色。

1.2.4 显微镜检查

待染色的制片自然干燥后，用莱卡相差显微镜在低倍镜下整片观察涂片，观察有核细胞的分布情况(特别是头、体、尾部重点观察)，如制片上有核细胞有无结构形态的异常、充分估计数量的多少，重点观察细胞形态巨大、成团、染色质疏松。

2 统计方法

3 结果

(1)有核细胞计数仪器法和显微镜法有显著性差异，差异有统计学意义(P<0.05)见表1；(2)有核细胞分类显微镜法肿瘤细胞检出率高(26)，见表2；(3)肿瘤细胞主要分布在10%20%高荧光参数组，见表3。

表1 2种检验方法检测有核细胞的结果

表2 有核细胞分类显微镜法与仪器法结果

表3 高荧光参数检测结果分布情况

4 细胞形态

4.1 良性积液常见细胞形态

4.1.1 淋巴细胞

淋巴细胞与血液中细胞形态相似，分为大淋巴细胞、大颗粒淋巴细胞、小淋巴细胞，见图1。

图1 胸水 大小淋巴细胞、大颗粒淋巴细胞

4.1.2 粒细胞(中性粒细胞、嗜酸性粒细胞)

粒细胞与血液中细胞形态相似，为炎症和恶性肿瘤时常见的细胞成分，形态分类：空泡变性、无空泡变性、细胞凋亡，见图2。

图2 胸水 中性粒细胞及破碎的细胞

4.1.3 间皮细胞

一般形态：呈圆形或卵圆形，直径约15～25 μm；胞质丰富，弱嗜碱性或嗜酸性，常较淡薄，核显示为规则椭圆，偏位，偶见双核，可隐约见核仁，见图3、4，

图3 腹水 间皮细胞

图4 胸水 双核间皮细胞

4.2 恶性细胞形态

胞体大、形态多样，多成簇团状分布。胞核大、核质比增高、核染色质粗密不均、核多样、易见核仁。胞质千变万化，核浆比多增高。不典型的恶性细胞体积小，细胞分布可单个散在，也可与巨噬细胞、间皮细胞混合成簇，见图5-8。

图5 胸水 肿瘤细胞 病理诊断：腺癌

图6 胸水 肿瘤细胞 病理诊断：腺癌

图7 腹水 肿瘤细胞 病理诊断：腺癌

图8 腹水 肿瘤细胞 病理诊断：腺癌

5 讨论

胸腹腔积液细胞形态学检验是鉴别良恶性积液的关键性指标[8，9]，提高检验工作者的体液细胞鉴别能力及质量评价是实验室的重点[10]。发放具有重要参考价值的形态学检验诊断报告，为临床提供更有价值和意义的鉴别诊断依据[11]。全自动血球分析仪XT-4000i的体液模式检测体液细胞，高荧光参数可以进行肿瘤细胞的筛查，并提出HF-BF%>3%或图形异常时，应进行显微镜复检[12，13]。全自动体液分析仪在体液细胞学检测方面不能完全代替手工检测法，仪器法只能作为参考方法，结合显微镜复检，以确定异常细胞的种类，可以提高体液检测的质量和能力[14，15]。