雷文婷,王 磊,朱瑞芳,杜宏娜,张俐丽,段静静,陈雨露,张 珺,杨 哲,刘 洋*
1.山西中医药大学,山西 030619;2.山西省儿童医院;3.山西医科大学第一医院;4.山西医科大学;5.国家非遗传承工作室太原一品香茶庄;6.山西省肿瘤医院
党参,取自桔梗科植物的干燥根,如潞党参、素花党参、川党参等[1⁃4]。关于党参最早记录见《本草从新》:“参须上党者佳”[5]。党参的药用价值广泛确切,《本草纲目》《日华经》《千金·食治》《日用草本》《中药大辞典》以及各地中药志均对党参的使用有详实记载[6]。现代药理研究表明,党参含有甾醇类、糖苷类、生物碱类以及三萜类化合物等多种化学成分[7],具有补气血、改善消化功能障碍等功效和抗肿瘤、抗微生物和抗氧化等特性,同时还可多环节、多目标引起机体产生调节体液免疫应答的作用[8],进而提高细胞免疫水平[9]。Ilaria等[10]研究证明,茶可以降低氧化应激作用与慢性疾病如心血管疾病发生率。红茶因具有生物活性抗氧化物质茶黄素,能显著增加T淋巴细胞的活性,尤其具有刺激免疫活性的作用。药茶是由中药和茶搭配而成[11⁃12],通过泡饮能够发挥相关中药的保健功效,兼具茶叶的风味,是中国传统调味茶。相比散叶茶,茶包泡茶更加方便,药物剂量容易控制[13]。为此,本研究采用特殊窖制工艺,由党参和红茶制作党参红茶茶包[14],旨在观察使用党参红茶茶包泡茶改善其细胞免疫功能的效果,达到缓解病人中医症状、提高证候疗效的目的。
1.1.1 实验原料 潞党参饮片(批号:2010001,山西和仁堂中药饮片公司)[15],直径0.5~0.8 cm,切片厚度3~4 mm;红茶(批号:LTS1077,太原一品香茶庄)。
1.1.2 实验试剂与实验设备 GT~T 551无血清培养基(批号:AK 7P006,TaKaRa公司);人外周血淋巴细胞分离液(天津灏洋科技);0.9%氯化钠注射液(四川科伦药业);刺激剂(批号:TNB⁃4975⁃UL 100,TON⁃BObiosciences公司)。KDC⁃1044低速离心机(安徽中科中佳);50 mL无菌离心管(批号:339652,Thermo公司);倒置显微镜(型号:IX51,OLYMPUS公司)
1.2.1 试剂配制 挑选直径为0.5~0.8 cm的党参与红茶[16]混装,蒸煮杀菌,然后在设定温度35~45℃的烘箱烘干,保证原料的含水量和香气符合感官要求。最后按7∶3比例混合均匀后装包,每包3 g,整个过程不得添加任何食品添加剂。在2个50 mL无菌离心管中分别加入100℃的50 mL纯净水泡茶(党参红茶茶包)5 min,凉至室温,用0.22μm滤膜过滤茶水。
1.2.2 实验设计 在2个50 mL无菌离心管中分别加入20 mL人外周血淋巴细胞分离液;再将20 mL的抗凝血剂用生理盐水1∶1稀释后分别缓慢沿管壁加入2个50 mL无菌离心管中淋巴细胞分层液上,设定2 500 r/min,离心15 min,提取外周血单个核细胞(PBMC);设定1 500 r/min,离心7 min并使用生理盐水重复洗涤2次。使用GT~T 551培养基将淋巴细胞密度从1.6×107/mL调整至2.0×106/mL。加入不同浓度红茶及刺激剂,根据成分分组,具体分组见表1。
表1 不同浓度党参红茶对淋巴细胞刺激作用观察
1.3.1 感官评价 经专业评茶师从色、香、味3个方面对茶水进行测评。党参红茶用100℃热水冲泡5 min,第1次冲泡得到的茶色、香、味均较好。茶色红黄明亮,复合花蜜与参香,无涩味,感官评价[17]最佳;第2次冲泡,茶颜色较浅,复合味不太明显;第3次冲泡,茶不仅色泽、口味差,感官也较差。故此,建议使用100℃水冲泡党参红茶茶包5 min并仅取冲泡第1次的茶水。
1.3.2 党参红茶对淋巴细胞的影响 实验结果显示,不同浓度的党参红茶对淋巴细胞[18]影响也不同。通过显微镜观察发现,B3细胞生长优于B2细胞;添加党参红茶浸出液的细胞生长优于未添加的,且淋巴细胞的生长率和免疫力都有提高[19];含有中等剂量和高等剂量党参红茶浸出液的组,淋巴细胞数量显著增加,见图1。
图1 显微镜下淋巴细胞图(10×)
2.1 对象与方法
2.1.1 研究对象 选择2020年1月—2021年8月某省级中医医院确诊有气血亏虚证的病人180例作为研究对象。气血亏虚症诊断标准:①头晕、讲话无力、全身困倦;②食欲不振,面无血色;③月经量较少,严重者甚至出现闭经等;④舌苔白,脉弱[20]。符合2项及以上者,诊断为气血亏虚证[21]。纳入标准:①达到诊断标准,年龄18~68岁;②饮用茶包期间不服用其他有明显相互作用的药物;③言语表达顺畅,依从性好;④病人及家人能接受此试验并签署知情同意书。排除标准:①有神经功能障碍的病人,如癫痫;②有实热证的病人;③处于感冒初期的病人;④有糖尿病等代谢性疾病病人;⑤有肝、肾功能障碍的病人;⑥特殊时期的女性病人,如月经、怀孕、妊娠期。利用抓阄法随机分为红茶、党参、党参红茶3组,各60例。本研究符合医学伦理道德要求。
2.1.2 试验方法 分别给予3组病人剂量、包装相同但内容物不同(分别为红茶、党参、党参红茶)的茶包。饮用时使用100℃水冲泡5 min,每次冲泡1包且只饮用冲泡第1次的茶水。规定病人每日08:00~22:00,每隔3.5 h饮用1次。即每人每日需饮用4杯(每杯400~500 mL),连续饮用2个月。随访比较病人的临床症状改善情况。
2.2 观察指标 气血亏虚主要症状有头晕、乏力;次要症状有舌苔白、脉弱。这些症状按无、轻度、中度、重度4个等级划分。主要症状对应评分为0分、2分、4分、6分,次要症状对应评分为0分、1分、2分、3分。评分越高,气血亏虚证候越明显[22]。
2.3 统计学方法 运用统计软件SPSS 23.0分析数据。符合正态分布的定量资料用均数±标准差(±s)表示,多组比较选择单因素方差分析,结果需具体两两比较用LSD⁃t检验。定性资料用例数或百分比(%)表示,采用χ2检验。以P<0.05为差异有统计学意义。
2.4 结果
2.4.1 3组病人基线资料比较(见表2)
表2 3组病人基线资料比较
2.4.2 气血亏虚症改善状况 3组病人饮用茶包前主次症状评分差异无统计学意义(P>0.05)。待试验结束,对比分析饮用前后3组症状评分的差异,结果显示,差异均有统计学意义(P<0.05),评分呈下降趋势。其中党参红茶组主次症状评分变化幅度最为明显。进一步进行LSD⁃t检验,饮用后,党参红茶组分别与红茶组、党参组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。党参红茶组对气血亏虚症改善效果更显著,见表3。
表3 3组病人饮用药茶前后气血亏虚症状评分比较(±s) 单位:分
表3 3组病人饮用药茶前后气血亏虚症状评分比较(±s) 单位:分
①与红茶组、党参组饮用后比较,P<0.05。
组别红茶组例数60时间饮用前饮用后饮用前饮用后饮用前饮用后主症次症头晕4.33±1.61 4.13±1.60 4.20±1.55 3.47±1.37 4.30±1.60 3.13±1.35①乏力3.67±1.53 3.27±1.56 3.53±1.44 3.17±1.29 3.70±1.55 2.60±1.34①舌苔白2.30±0.82 2.21±0.80 2.23±0.74 2.00±0.76 2.31±0.75 1.73±0.69①党参组60党参红茶组60脉弱1.98±0.75 1.75±0.84 1.88±0.74 1.58±0.87 1.96±0.74 1.33±0.88①
3.1 党参具有补中益气、止渴、健脾益肺、养血生津等功效 人们经常用党参泡水改善身体状况,但党参单独饮用口感苦涩,辛味较重,长期饮用不易为人接受。搭配红茶后,很好地改善了口感,且整体茶色更亮、香味更浓,感官更佳。同时,由于茶叶皆有苦寒的本质属性[23],加入辛温的党参,恰好解决了药物偏性问题,是一个非常好的组合。
3.2 党参红茶具有免疫调控的作用 免疫系统由免疫器官、免疫活性物质和免疫细胞(B淋巴细胞、T淋巴细胞、中性粒细胞等)组成。本研究发现,添加党参红茶浸出溶液后,淋巴细胞生长趋势更优。溶液浓度越高,淋巴细胞增长越快。表明党参红茶浸出溶液可促进淋巴细胞增殖,能促进细胞免疫,从而提高机体的抗病能力[24]。临床试验显示,饮用前红茶组、党参组与党参红茶组主次症状评分差异无统计学意义。但与党参组与红茶组相比,党参红茶组对气血亏虚症的疗效更显著。因此,该党参红茶适用于气血亏虚人群的养生保健。由于体质偏颇和症候分型因人而异[25],建议需要长期饮用者在专业医师指导下使用,且要定期复查。
3.3 药食同源中药兼有营养价值和药用价值的双重功能 通过改变药物的加工工艺或药物的配比,可以开发出具有多种功效的产品,满足各类消费者的需求。党参红茶作为一种药茶,充分体现了优化组成、简洁显效、质量可控的药食同源产品研发理念[26]。本研究为党参的深加工和利用开辟了新途径,也为其他药食同源产品的开发提供了思路。
本研究采用实验研究和临床研究相结合的形式,客观分析了党参红茶茶包的淋巴细胞免疫调节的作用,在临床实践中验证了对气血亏虚病人的疗效。研究方法具有一定创新性,研究结论具有可借鉴性。但因条件所限,随访时间较短,且症状评分主观性较强,尚需在下一步研究中不断改进。