文│杜明仓(云南省保山市隆阳区动物疫病预防控制中心) 唐懿 刘国民 徐佳(金宇保灵生物药品有限公司)
猪伪狂犬病是由伪狂犬病毒引起的一种传染性疾病。会导致母猪流产,3周内的仔猪出现神经症状,育肥猪伴随呼吸道症状。自2011年以来,从华东地区到华北地区免疫Bartha-K61株的猪场逐有gE转现象,特别是种猪公司损失严重,随着科学技术的发展,越来越多的规模猪场选用人工致弱的C株疫苗、SA215株、HB-98、HB-2000株进行免疫防控,使猪伪狂犬疫情得到有效控制。
1.试验猪场。该猪场选取基础母猪500头,自繁自养,同时进行跟踪服务,血清及抗原送检单位为金宇保灵生物药品有限公司技术服务部中心实验室。
2.抗体、病原的检测方法。抗体主要利用ELISA方法检测,抗原主要利用实时荧光定量PCR(RT-PCR)方法检测,试剂盒参考表1。
表1 试剂盒明细
2016 年6 月,云南某猪场母猪在产房出现16.95%~31.5%死胎和木乃伊胎,产房死淘率为19.4%~42.8%,保育期、育肥期正品率分别为94.4%~95.2%、95.1%~95.6%。2016年9~12月,该场生产数据最差,而后整场生产成绩逐渐好转。2018年3月部分猪场生产指标见表7。
表2 各阶段死、淘猪抗原阳性检出率 %
1.流行病学调查。通过引种跟踪及流行病学调查发现,该场后备猪有传染性胃肠炎、流行性腹泻发病史。该场2016年7月从江苏某种猪场引进125头种猪后,出现疑似猪伪狂犬病感染。
2.临床解剖。哺乳仔猪感染后表现震颤、共济失调、角弓反张、发热高于41℃,具有神经症状和坏死性扁桃体炎,肝、脾、肾可见灰白色或黄白色坏死灶。
3.实验室诊断。选取10头1~2胎龄的母猪,10头3~4胎龄的母猪,10头5~6胎龄的母猪,10头大于等于7胎龄的母猪,后备猪、公猪全部采样,对2、4、7、10、13、16、20、24、30周龄商品猪每组采样10头。检测gE、gB基因抗体、圆环抗体、蓝耳抗体、猪瘟抗体、口蹄疫O型A型抗体。对流产胎儿或脐带血进行病原检测(猪瘟、蓝耳、伪狂犬、圆环、细小、乙脑)。
◎图1 不同猪群伪狂犬病、猪瘟、猪繁殖与呼吸障碍综合征、圆环感染比例
通过检测发现,经产母猪、公猪gE抗体阳性率100%、53.84%,说明全群经产母猪已感染伪狂犬病毒。从仔猪脐带血、死胎、产房仔猪、保育猪、育肥猪群中均能检出病原。由血清普查结果可知,口蹄疫、猪瘟、细小、乙脑均有较理想的免疫状态。本猪场未做蓝耳病免疫,S/P平均值均小于1.5,蓝耳抗体阳性率为81.71%,说明各阶段猪只出现蓝耳病继发性不稳定。综上所述,伪狂犬病仍是导致猪场各区间不稳定,生产指标低下的主要因素。
1.商品猪伪狂犬疫苗毒株对比及筛选。伪狂犬疫苗对比试验共分3组,具体分组见表3,各组商品猪分别在2、4、7、10、13、16、20、24周龄随机选择20头检测gE、gB抗体,各阶段死、淘猪只均用实时荧光定量PCR检测PRV。记录各试验组的分娩时间、母猪耳号、初生总仔数、初生活仔数、木乃伊胎数、死胎数、断奶数、保育转出数、育肥出栏数。死/淘猪只PRV阳性检出率。筛选阻断效果好、各阶段成活率/正品率高的疫苗毒株。
表3 各试验组伪狂犬免疫程序
2.种猪净化方案。具体伪狂犬净化方案。
1.伪狂犬疫苗不同毒株免疫效果对比。商品猪伪狂犬gE、gB结果见表4。试验组2在16、24周龄的gE抗体阳性率为0,说明gE阳性母猪能产下gE阴性的个体。2、4周龄的猪群gE阳性抗体主要来源于被动免疫,随着4周龄后的断奶,gE抗体阳性率降低,gB抗体阳性率保持稳定,说明注射疫苗后产生的抗体被检出。16、24周龄的猪只gE抗体不转阳,说明疫苗抗体能有效阻断病毒在猪群间的横向传染。此结果让同场自留后备猪筛选gE阴性后备,进行种群更新成为可能。
表4 伪狂犬疫苗对比试验中gE、gB抗体检测结果
对比其他两组,后期gE转阳没有得到明显改善。说明免疫对应毒株疫苗,不能阻断病毒在猪群间的横向传播,该批次的其他生产成绩见表5。gE阳性猪只不一定全部致病或致死,但会不同程度地影响生产成绩。
表5 伪狂犬疫苗对比实验各试验组猪生产数据
综上所述,本次伪狂犬疫情猪场应选用C株疫苗进行后继处理。
2.种猪净化方案及执行效果。
猪场于2018.9.27、2018.10.25、2019.2.28、2019.6.27、2019.10.24进行经产母猪群及公猪的全群C株伪狂犬疫苗免疫。分别在2019.4.10普检血清。结果见表6,猪伪狂犬抗体普查结果显示,商品猪疫苗免疫后母源gE阳性抗体衰减较上次血检逐步提前,说明gE抗体阳性母猪注射疫苗能降低病毒在体内的活跃度,缓解症状,母体内gE阳性抗体逐步减少。在13周龄后未有gE阳性猪只,说明能有效阻断病毒后期感染。在新补充的一胎母猪、二胎母猪及后备猪中,无gE抗体阳性猪只,说明C株疫苗抗体能有效阻断gE阳性病毒感染,从血检指标看符合预期。从部分猪场生产数据看,猪场分娩率随疾病的控制能达到85%以上,死胎、木乃伊胎及不到7千克的弱仔比例明显降低,产房健仔率均高于92%。
表6 猪伪狂犬抗体普查结果
表7 猪场部分生产数据
1.不断优化猪场设施,制定合理的规章制度,强化人员防疫意识及执行力,强化猪场生物安全,是防止外来病毒进入猪场最有效的办法。
2.重视实验室,进行正常猪群的安全监测,及时确诊死/淘猪只,并对整体猪群疫病进行风险评估。精准的检测结果可以给猪场重大事项决策提供科学依据。尤其是非洲猪瘟、伪狂犬和蓝耳病的评估。
3.树立系统的观念,同步重视品种、营养、环境及疫病防控。目前,更重要的是建立积极、健康的养殖团队。管重于防,防重于治。猪场出现最多的是管理问题。
4.快速处理猪场疾病,精准诊断,合理制定治疗方案,持之以恒、不打折扣的执行,并及时追踪处理效果。