薛云,陆雪林※,袁红艳,吴昊旻,张春华,雷胜辉,周瑾,邢磊
(1.上海市动物疫病预防控制中心,上海201103;2.上海欣灏珍禽育种有限公司上海201408;3.上海市松江区动物疫病预防控制中心,上海201611)
申鸿七彩雉是根据国内雉鸡产业和市场需求,主要利用常规育种及分子育种技术培育而成,2019年通过国家畜禽遗传资源委员会的新品种审定,具有驯化程度高、适应性强、抗病力高、生长快及产蛋高等特点,笼养、舍内平养和散养均适宜,均能表现出稳定、良好的生产性能。
血液生化指标可以反映机体的代谢、健康状况,当其保持相对稳定时,机体才能正常进行代谢活动,从而获得良好的生产性能[1]。血液生化指标也可以反映出动物的品种、年龄、性别和生理特性,并为品种选育、疾病诊疗提供依据[2]。有研究报道了14周龄阳山鸡[3]、14周龄贵妃鸡[4]、成年藏鸡[5]、56日龄青脚麻鸡[6]、成年暗腹雪鸡[7]、40周龄徐海鸡[8]、成年绿尾虹雉[9]和成年盐津乌骨鸡[10]血液生化指标含量,但以上研究仅限于某一时间点或阶段,没有检测其他时间点或阶段。肌内脂肪(IMF)不仅与体重、腹脂率呈表型正相关[11],而且与血液脂类代谢存在一定关系,当脂肪沉积较多时,血液中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)含量等会较低[1]。多种血液生化指标间均存在相关性,谷丙转氨酶(ALT)与谷草转氨酶(AST)、ALT与白蛋白(ALB)、ALT与TC、ALT与乳酸脱氢酶(LDH)、AST与LDH、碱性磷酸酶(ALP)与TC、ALB与TC之间存在着极显著正相关;ALP与TC、总蛋白(TP)与ALB之间存在着显著正相关[12]。谷丙转氨酶与谷草转氨酶、甘油三酯与胆固醇和谷丙转氨酶、胆固醇与碱性磷酸酶、碱性磷酸酶与谷丙转氨酶和谷草转氨酶、血糖与甘油三酯、胆固醇、碱性磷酸酶均呈极显著正相关;血糖与总蛋白和白蛋白、总蛋白与白蛋白、碱性磷酸酶与血钙之间均呈显著正相关[13],但其与IMF的相关性研究较少。
目前有关申鸿七彩雉血液生化指标和肌内脂肪含量的研究较少,本研究测定了申鸿七彩公、母雉20周龄、24周龄、28周龄、30周龄和56周龄血液生化指标和IMF含量,并分析了各指标的相关性,以期建立申鸿七彩雉血液生化指标和肌内脂肪的正常参考值,进而为申鸿七彩雉的选种选育、疾病诊断和饲养管理等研究提供参考。
血液生化指标含量测定仪器和耗材:ARKRAY SPOTCHEM EZ SP-4430全自动生化分析仪购自上海顺强生物科技有限公司,ARKRAY TC试纸(批号:EC0J08)、TG试纸(批号:FJ0B87)、ALB试纸(批号:EJ9D57)、AST试纸(批号:FQ9D84)、LDH试纸(批号:GA9B39)、六项常规复合[TP、尿素氮(BUN)、血糖(GLU)、肌酐(CRE)、ALT、ALP]试纸(批号:PL9F65)均购自上海顺强生物科技有限公司。IMF含量测定仪器:Antaris傅立叶变换近红外分析仪购自赛默飞世尔科技(中国)有限公司。
健康、体型相似的20周龄、24周龄、28周龄、30周龄和56周龄申鸿七彩雉各30羽(公、母各半),来自上海欣灏珍禽育种有限公司。采用育雏期笼养,育成期网上平养,成年期笼养,正常免疫,自由采食、饮水。各阶段饲粮营养水平见表1。
表1 饲粮组成和营养水平Table1 Formula and nutrient levels of basal diets
采血前实验动物禁食12 h,采集翅静脉血2 mL注入含有肝素锂的离心管内;轻轻混匀,放入ARKRAY SPOTCHEM EZ SP-4430全自动生化分析仪测定血液生化指标含量;按照《猪品质测定技术规程》(NY/T821-2019)测定胸肌肌内脂肪(IMF)含量。
先通过Excel对数据进行整理,再使用SPSS20.0的单因素方差分析进行方差分析;用Duncan法进行多重比较,用双变量法进行相关性分析,结果用“平均值±标准误”表示。
公雉20~56不同周龄血液生化指标和IMF含量测定结果见表2。BUN含量为0.40~2.30 mmol/L,20周龄显著低于24周龄、28周龄、30周龄和56周龄,其余周龄间差异均不显著;GLU含量为14.70~24.50mmol/L,20周龄、28周龄显著均低于24周龄、56周龄,其余周龄间差异均不显著;ALP含量为15.00~1 561.00 IU/L,20周龄、28周龄、30周龄和56周龄显著低于24周龄,其余周龄间差异均不显著;TP含量为4.99~45.00g/L,各周龄间差异均不显著;ALT含量为1.00~47.00IU/L,20周龄、24周龄、28周龄和30周龄均显著低于56周龄,其余周龄间差异均不显著;CRE含量为1.00~171.00mol/L,各周龄间差异均不显著;ALB含量为8.00~18.00 g/L,28周龄显著低于56周龄,其余周龄间差异均不显著;TC含量为2.06~4.99 mmol/L,各周龄间差异均不显著;AST含量为262.00~906.00 IU/L,各周龄间差异均不显著;LDH含量为375.00~8 425.00 IU/L,20周龄、24周龄、28周龄和30周龄显著低于56周龄,其余周龄间差异均不显著;TG含量为0.28~1.05mmol/L,20周龄显著低于其余周龄,其余周龄间差异均不显著;IMF含量为0.85%~2.81%,20周龄和24周龄显著低于30周龄、28周龄和56周龄,其余周龄间差异均不显著。
表2 公雉20~56周龄血液生化指标和IMF含量测定结果Table 2 Determination of blood biochemical indexes and IMF content in male pheasants at 20~56 weeks
母雉20~56不同周龄血液生化指标和IMF含量测定结果见表3。BUN含量为0.50~2.30 mmol/L,20周龄、28周龄和30周龄显著低于24周龄,其余周龄间差异均不显著;GLU含量为7.20~24.10 mmol/L,30周龄显著低于20周龄、24周龄和56周龄,28周龄显著低于20周龄,其余周龄间差异均不显著;ALP含量为218.00~1 571.00 IU/L,24周龄、28周龄、30周龄和56周龄显著低于20周龄,其余周龄间差异均不显著;TP含量为27.00~87.00g/L,20周龄显著低于30周龄和56周龄,24周龄和28周龄显著低于56周龄,其余周龄间差异均不显著;ALT含量为1.00~149.00 IU/L,20周龄、24周龄和30周龄显著低于28周龄,其余周龄间差异均不显著;CRE含量为0.00~117.00mol/L,30周龄和56周龄显著低于20周龄和24周龄,其余周龄间差异均不显著;ALB含量为9.00~21.00 g/L,20周龄显著低于24周龄、28周龄、30周龄和56周龄,28周龄显著低于24周龄、30周龄和56周龄,24周龄和30周龄显著低于56周龄,其余周龄间差异均不显著;TC含量为1.99~38.00 mmol/L,各周龄差异均不显著;AST含量为187.00~963.00 IU/L,20周龄显著低于24周龄、28周龄和56周龄,56周龄显著低于24周龄,其余周龄间差异均不显著;LDH含量为622.00~8 730.00 IU/L,20周龄和24周龄显著低于28周龄、30周龄和56周龄,其余周龄间差异均不显著;TG含量为0.34~4.99 mmol/L,20周龄、24周龄、28周龄和30周龄显著低于56周龄,其余周龄间差异均不显著;IMF含量为0.90%~4.67%,24周龄显著低于28周龄、30周龄和56周龄,20周龄、30周龄和56周龄显著低于28周龄,其余周龄间差异均不显著。
表3 母雉20~56周龄血液生化指标和IMF含量测定结果Table 3 Determination of blood biochemical indexes and IMF content in famale pheasants at 20~56 weeks
公、母雉血液生化指标和IMF含量的比较结果见表4。20周龄,母雉AST含量极显著低于公雉,而GLU、IMF含量显著高于公雉,BUN、ALP和TG含量极显著高于公雉,其余各指标间差异均不显著;24周龄,母雉GLU、TG显著低于公雉,ALP极显著低于公雉,而BUN、TP、ALB和AST含量极显著高于公雉,其余各指标间差异均不显著;28周龄,母雉GLU含量显著低于公雉,而ALB含量显著高于公雉,AST、LDH和IMF含量极显著高于公雉,其余各指标间差异均不显著;30周龄,母雉GLU极显著低于公雉,而TP含量显著高于公雉,ALB、TC含量极显著高于公雉,其余各指标间差异均不显著;56周龄,母雉GLU、CRE含量显著低于公雉,而TC含量显著高于公雉,TP、ALB和TG含量极显著高于公雉,其余各指标间差异均不显著。
表4 公、母雉血液生化指标和IMF含量的比较结果Table 4 Comparison of blood biochemical indexes and IMF content between male and female pheasants
血液生化指标和IMF含量的相关分析结果见表5。BUN与周龄呈极显著正相关;ALP与GLU呈极显著正相关,与周龄呈极显著负相关;TP与周龄、BUN均呈极显著正相关,与GLU、ALP均呈极显著负相关;ALT与TP呈显著正相关,与周龄呈极显著正相关;CRE与GLU呈极显著正相关;ALB与ALT呈显著正相关,与周龄、BUN和TP均呈极显著正相关,与GLU、ALP和CRE均呈极显著负相关;TC与TP、ALB均呈极显著正相关,与GLU呈显著负相关;AST与ALT、ALB均呈极显著正相关,与ALP呈极显著负相关;LDH与周龄、TP、ALT、ALB和AST均呈极显著正相关,与ALP呈显著负相关,与CRE呈极显著负相关;TG与TC、LDH呈显著正相关,与周龄、TP和ALB均呈极显著正相关,与CRE呈显著负相关;IMF与周龄、TP均呈显著正相关,与ALT、LDH均呈极显著正相关;其余各指标间无显著相关。
表5 申鸿七彩雉血液生化指标和IMF含量相关分析Table 5 The correlation analysis of blood biochemical indexes and IMF content of Shenhong pheasants
血液中存在各种离子、糖类、脂类、蛋白质以及各种酶、激素和机体的多种代谢产物,它们参与机体的新陈代谢,通过检测这些指标的含量,可以反映机体物质代谢情况,进而评判机体状况。
TP和ALB是反映蛋白质合成代谢的重要指标,TP和ALB含量增加表明蛋白质合成代谢旺盛[14,15]。BUN是蛋白质代谢的主要终末产物,是反映蛋白质分解代谢的重要指标,当体内蛋白质分解旺盛时可导致尿素氮含量升高[16]。本试验中公、母雉TP和ALB均在56周龄时最高,表明二者在56周龄蛋白质合成代谢最旺盛;公、母雉BUN含量分别在56周龄和24周龄最高,表明二者在56周龄和24周龄蛋白质分解代谢最旺盛。总体上母雉TP、ALB和BUN均高于公雉,与独龙鸡结果[17]一致,表明母雉蛋白质分解代谢、合成代谢均高于公雉。
CRE是肌肉代谢的产物,其含量与机体肌肉总量有关。本试验中公、母雉CRE含量分别在56周龄和24周龄最高,可能是公、母雉分别在56周龄和24周龄肌肉总量最高或活动量最大导致肌肉体积增大引起CRE含量的升高。各阶段公雉CRE含量高于母雉,提示各阶段雉鸡肌肉量因性别不同而异,公雉肌肉总量高于母雉。
ALP在钙、磷代谢和骨的沉积起重要作用,血液ALP活性反映成骨细胞ALP活性[18]。机体骨代谢旺盛时成骨细胞合成ALP量增加,释放到血液中引起血液ALP活性增加。本试验中,公雉ALP活性在24周龄最高,母雉ALP活性在20周龄最高,表明公雉骨代谢旺盛期为24周龄,母雉骨代谢旺盛期为20周龄。公、母雉间ALP活性在20周龄和24周龄差异显著,表明前期骨代谢因性别差异而不同。20周龄申鸿七彩母雉ALP活性高于公雉鸡,与吴琼等[19]测定的美国七彩雉鸡、蒙古雉鸡、申鸿雉鸡及孔雀蓝雉鸡结果一致。
ALT、AST催化氨基酸与酮酸间的氨基转移,在氨基酸的合成及分解活动中发挥重要作用[12]。本研究中,公、母雉ALT含量分别在56周龄和28周龄达最高,表明在不同周龄氨基酸代谢不同。各年龄阶段ALT含量无性别差异,表明不同性别在不同周龄氨基酸代谢水平相近。公雉AST含量差异不显著,母雉AST含量在24周龄最高。母雉AST含量在20周龄低于公雉(与蒙古雉鸡结果一致,与美国七彩雉鸡、孔雀蓝雉鸡不一致[19]),而其AST含量在24周龄和28周龄均高于公雉,表明申鸿七彩公雉在不同周龄时氨基酸的分解、合成水平相当,母雉在24周龄时氨基酸的分解、合成旺盛,母雉氨基酸的分解、合成水平在20周龄低于公雉,而24周龄和28周龄均高于公雉。
GLU是机体的重要能源物质,其浓度反映糖代谢的情况。本试验中,公雉GLU含量在56周龄最高,母雉GLU含量在20周龄最高,公雉在20周龄时低于母雉,其余周龄均高于后者,提示公、母雉分别在20周龄和56周龄时活动量较大,且除20周龄外,其余周龄公雉活动量较大,糖代谢旺盛。
LDH是催化苯丙酮酸生成苯乳酸的一类关键酶,是糖无氧酵解的一类重要酶系[20]。本研究中,公、母雉LDH含量分别在56周龄和28周龄最高,表明公、母雉分别在56、28周龄糖的无氧酵解旺盛。公雉在28周龄显著低于母雉,与乌蒙凤鸡结果一致[21],表明在28周龄时与乳酸脱氢酶相关的糖代谢活动因性别不同而不同。
TC和TG可评价机体对脂类的利用、代谢情况。本试验中,公、母雉各阶段TC含量均相近,TG含量分别在30周龄和56周龄最高,表明公、母雉分别在该阶段对脂肪的利用率较低,有利于脂肪的沉积[13]。除24周龄母雉TG含量低于公雉(与独龙鸡结果[17]不一致)外,总体上母雉TC、TG含量均高于公雉,与乌蒙乌骨鸡[22]、灰胸柱鸡[23]结果一致,表明母雉脂肪沉积较多,可能与母雉产蛋蛋黄中的高胆固醇含量及公雉较强的脂肪分解力有关[20]。
IMF主要分布在肌纤维和肌束间,构成肌肉的大理石花纹。IMF的含量反映了机体脂肪代谢和沉积情况。本试验中,公、母雉IMF含量分别在56周龄和28周龄最高,表明公、母雉脂肪沉积最多的阶段分别为56周龄和28周龄。各阶段母雉IMF含量均高于公雉,可能是由于公、母雉活动量的差异及脂肪分解利用能力不同,从而导致脂肪沉积量不同。
相关性分析结果表明申鸿七彩雉血液生化指标及IMF间存在普遍关联,它们如何相互作用调控机体各项代谢活动有待深入探讨。通过血液生化指标及IMF间的相关关系,养殖人员可以有针对性地开展相关检测,并根据生理状况合理制定饲养方案、准确诊断及控制疫病等提供参考。
申鸿七彩公雉各周龄TP、CRE、TC和AST含量差异不显著,其余各指标含量差异显著。申鸿七彩母雉各周龄TC含量差异不显著,其余各指标含量差异显著。相同周龄公、母雉ALT含量在各周龄相近,CRE、LDH含量在1个周龄差异显著,BUN、ALP、TC和IMF含量在2个周龄差异显著,TP、AST和TG含量在3个周龄差异显著,ALB含量在4个周龄差异显著,GLU含量在5个周龄差异显著。多种血液生化指标及IMF含量均存在相关性。该研究建立了申鸿七彩雉血液生化指标和肌内脂肪的正常参考值,为评价其营养状况、诊断疾病及选种选育等研究提供参考。