肺癌病理大切片技术的应用与价值研究

2022-06-23 03:12李成之
中国卫生标准管理 2022年9期
关键词:鳞癌内分泌切片

李成之

约有80%的肺癌为非小细胞肺癌,大多数肺癌患者在确诊时已属于晚期,已经有了临床或潜在的播散,一般生存期仅为8~10个月,5年生存率仅为10%~15%[1]。非小细胞肺癌早期临床症状主要为咳嗽,其治疗时间被延误,缺乏典型性,增加了其临床诊断的难度。因此,对于非小细胞肺癌的诊治和早期病理诊断具有重要的临床价值。而研究发现,在单一肿瘤中不同的肿瘤组织表现出差异性为异质性,肿瘤在进展过程中,多应用病理组织大切片技术,对临床治疗工作的开展具有重要意义[2]。本研究选择2019年5月—2020年2月在医院接受诊治的非小细胞肺癌患者的组织标本,进行病理组织大切片技术,现报道如下。

1 资料和方法

1.1 一般资料

临床选择2019年5月—2020年2月在医院接受诊治的非小细胞肺癌患者80例的组织标本为观察组,纳入标准:符合中国抗癌协会肺癌专业委员会、中华医学会肿瘤学分会肺癌学组的非小细胞肺癌的诊断标准[3];经临床实验室检查、影像学资料、手术资料、病理检查、临床特征明确诊断。排除标准:其他恶性肿瘤者、免疫系统病变、精神疾患、妊娠期、哺乳期女性、肝肾功能异常、血液系统病变、急性感染性病变。年龄32~79岁,平均年龄(50.3±3.3)岁,其中男性42例,女性38例,全部研究对象均未接受过放疗或化疗治疗。手术方式:肺叶切除术41例,全肺切除术39例。

1.2 方法

进行手术治疗时,在肺叶离体后,沿着气管树的方向,最大直径切除肿瘤组织,后切面标本厚度为3 mm,常规病理检查其他标本,在切面标本取得后,进行脱水、石蜡包埋、切片、苏木素、染色等处理,10%福尔马林予以12~24 h固定,80%酒精浸润12~24 h,95%乙醇Ⅰ浸润6~12 h;95%乙醇Ⅱ浸润6~12 h,无水乙醇Ⅰ浸润3~6 h;无水乙醇Ⅱ浸润3~6 h;无水乙醇与二甲苯溶液按1∶1比例浸润24 h;丁香油浸润4~6 h;二甲苯1浸润1~2 h,二甲苯2浸润1~2 h;石蜡58℃浸润2次,4~6 h/次;石蜡包埋,应用Carl Zeiss平推切片机切片,6~10 μm切片厚度,置于载玻片内(90 mm×120 mm),65℃烤箱内进行2~3 h烤片;HE染色步骤:二甲苯1浸泡半小时,二甲苯2浸泡半小时,95%酒精1浸泡15 min,95%酒精2浸泡5 min,80%酒精浸泡5 min,流水冲洗10 min,苏木素染色6~10 min;1%盐酸酒精浸泡半分钟,流水冲洗半小时,0.25%伊红染3 min;流水冲洗半分钟,95%酒精1 10 s,95%酒精2 10 s,无水酒精半分钟,二甲苯1 处理2 min,二甲苯2处理2 min,中性树胶封片,盖玻片封片(60 mm×80 mm)。二步法神经内分泌标志物嗜铬粒素A(chromogranin A,CgA)和神经内分泌标志物突触素(synaptophysin,Syn)免疫组织化学染色分析肿瘤有无神经内分泌性质。

1.3 观察指标

分析非小细胞肺癌的病理类型腺鳞癌、鳞癌、腺癌标本中NSE阳性、CgA阳性、Syn阳性比例;与病理检查结果比较,分析非小细胞肺癌的病理大切片诊断结果神经元特异性烯醇化酶(neuron specific enolase,NSE)、突触素(Syn)、嗜铬素 A(CgA)的诊断符合率。

1.4 统计学处理

全部数据传输至SPSS 21.0统计软件进行处理分析,计量资料表示为(),采用t检验;计数资料表示为(n,%),采用χ2检验,P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 非小细胞肺癌的病理类型

非小细胞肺癌患者80例中,腺鳞癌14例(17.5%),鳞癌17例(21.3%),腺癌49例(61.3%),其中多种组织类型者37例(46.3%),单一组织类型表现者43例(53.8%);其中腺癌标本的NSE阳性、CgA阳性、Syn阳性指标显著高于腺鳞癌、鳞癌,差异有统计学意义(P<0.05),见表1。

表1 非小细胞肺癌的病理类型特征分析 [例(%)]

2.2 分析非小细胞肺癌病理大切片诊断结果

非小细胞肺癌病理大切片神经元特异性烯醇化酶(NSE)、突触素(Syn)、嗜铬素A(CgA)诊断符合率与病理结果比较,差异无统计学意义(P>0.05),见表2。

表2 分析非小细胞肺癌病理大切片诊断结果 [例(%)]

3 讨论

本研究观察非小细胞肺癌病理大切片技术的临床应用与价值分析,结果显示:非小细胞肺癌患者80例中,腺鳞癌14例(17.5%),鳞癌17例(21.3%),腺癌49例(61.3%),其中多种组织类型者37例(46.3%),单一组织类型表现者43例(53.8%);其中腺癌标本的NSE阳性、CgA阳性、Syn阳性指标显著高于腺鳞癌、鳞癌,差异有统计学意义(P<0.05);观察组血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)、突触素(Syn)等指标变化显著高于对照组,而嗜铬素A(CgA)指标显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),与刘奕[4]的研究结果大体一致,非小细胞肺癌是全球发病率、死亡率最高的恶性肿瘤之一,随着环境的恶化,非小细胞肺癌的发病率持续升高,非小细胞肺癌需要有明确、科学、准确的诊断结果,选择适宜患者的手术、化疗、放疗方案[5-6]。因患者的体质、病变严重程度均具有一定的差异,采取治疗方式也存在一定的差异[7-8]。对于非小细胞肺癌患者进行病理组织学检查时,需确认检查结果的准确性和全面性[9-10]。在本研究中,病理组织大切片技术应用于非小细胞肺癌患者进行病理诊断中,可准确清晰显示患者的肿瘤细胞的状态,提高其诊断符合率。但在实际的操作过程中,取材方案、样本大小等多方面均可对诊断结果产生一定的影响。血清神经元特异性烯醇化酶是神经内分泌细胞核神经元细胞所特有的一种酸性蛋白酶[11-12],神经内分泌肿瘤的特异性标志,可用于评估复发、临床效果、监测病情、鉴别诊断等。在非小细胞肺癌的病情缓解期,约有80%~96%患者的神经元特异性烯醇化酶浓度正常,而当病情复发时,其浓度则显著增高;部分病例在1~4月潜伏期中期神经元烯醇化酶指标升高,与生存期密切相关[13-14]。研究[15]表明,NSE可用于评估小细胞肺癌患者的相关病因、治疗有效性和预后情况。嗜铬粒蛋白A属于48 kD的亲水性、酸性分泌蛋白,位于神经内分泌细胞的嗜铬性颗粒内,在鳞癌、大细胞癌、肺腺癌等非小细胞肺癌中也会出现神经内分泌分化,CGA与III期非小细胞肺癌的神经内分泌密切相关,可作为评估神经内分泌活化指标[16]。嗜铬粒蛋白A属于前体肽,可在不同的组织中分解成不同的片段,对机体的内环境的稳定起到维持作用,如对胃肠道的动力维持和缓解疼痛、参与组织修复、对机体的炎性因子的反应抑制,对儿茶酚胺的释放起到抑制作用,同时调节细胞内外的钙离子的平衡,对于机体能量代谢进行调节[17];同时可对肿瘤细胞的凋亡起到促进作用,对成纤维细胞的聚集、黏附起到抑制作用,对于肿瘤细胞的生长及多瘤生长模式起到抑制作用,属于对外来微生物(包括酵母菌、真菌、细菌)的侵袭起到第一道防御作用。同时研究发现[18],嗜铬粒蛋白A的蛋白水解作用具有组织特异性,该蛋白在甲状腺组织、肠道内分泌组织、中枢和神经组织、胰腺、心肌等组织中均有分泌。患者的生存期与血浆中CGA高表达水平呈正相关。Syn(突触素)也称为主要突触囊泡蛋白p38,是一种在人类中由SYP基因编码的蛋白质。它与基本的突触囊泡蛋白相互作用,但当在动物身上实验性地灭活时,它们仍正常表达和发挥功能。Syn与人体的肾上腺髓质、颈动脉、皮肤、脑垂体、甲状腺、肺、胰腺和胃肠道黏膜的神经内分泌细胞发生反应[19]。这种抗体能识别正常的神经内分泌细胞和神经内分泌肿瘤。Syn不与其他神经鉴别标记一起表达,可被用作肿瘤诊断的鉴别标记[20]。本研究发现,非小细胞肺癌中肺腺癌标本的NSE阳性、CgA阳性、Syn阳性指标显著增高,且与病理检查结果比较,病理组织大切片检查准确性均较高,说明非小细胞肺癌进行病理组织大切片检查可为非小细胞肺癌的检查确诊和后续治疗方案的选择提供科学依据[21]。综上所述,对非小细胞肺癌患者进行病理组织大切片检查,可对肿瘤组织的状态进行全面监测,分析肿瘤细胞的异质性有助于为后续治疗及病理诊断提供准确的依据。

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