乌骨鸡细菌混合感染的病原分离鉴定

文│刘敏 李欧 徐立朋 康超（吉林省白城市动物疫病预防控制中心）

近年来，沙门氏菌和大肠杆菌混合感染呈逐年上升趋势，对乌骨鸡养殖业造成很大的危害，降低了养殖效益。因此，乌骨鸡沙门氏菌病和大肠杆菌混合感染的分离鉴定和实验室检查对养殖业有很重要的影响。本研究对大肠杆菌和沙门氏菌进行分离培养试验，为高效敏感药物的选择奠定基础，并通过科学的治疗与预防措施来提高乌骨鸡群抗病能力，以此提高养殖效益。

一、试验材料

1.试验病料。病死乌骨鸡的心脏、肝、肠管、气囊、肺组织、肾等。

2.主要仪器。立式压力蒸汽灭菌器、生物安全柜、电热恒温干燥箱、电子天平、微波炉、生物显微镜等。

二、研究方法

1.剖检变化。解剖死亡乌骨鸡发现，心包膜增厚，心包液增多、混浊，在心包膜表面有淡黄色纤维凝固物，有的与胸膜发生粘连有纤维素性渗出，心肌出血；肺肿大呈红黄色，部分鸡肺有1～2厘米坏死灶；肝肿大，色泽不匀，并有针尖大白色坏死灶，表面覆盖有黄白色纤维素性渗出物；肠道有轻度炎症，十二指肠有出血性肠炎变化，盲肠扁桃体肿胀出血；嗉囊积食，有酸臭液体肿大；肾肿大，有出血点，有尿酸盐沉积。

2.培养基的制备。

（1）称取改良马丁肉汤培养粉12.6克、营养琼脂培养粉17.8克、ss培养粉35克、麦康凯培养粉30克，分别溶于400毫升的开水中，用于制备肉汤培养基、营养琼脂培养基、ss培养基、麦康凯培养基。再分别放入微波炉高温度加热5分钟，反复3次，之后将培养液共同高压灭菌30分钟，冷却后浇入已灭菌过的平板培养皿中备用。

（2）将研碎的病料（肝、脾、等）先接种在营养肉汤培养试管中，37℃恒温培养24小时。长出的病原菌分别接种于普通琼脂平板、ss琼脂培养基和麦康凯琼脂培养基上，恒温箱培养18小时。

（3）培养后挑取有明显特征的菌落。以划线法再次接种于培养基上。再37℃恒温培养24小时。培养24小时后，分离到2种不同菌落，分别命名为Ⅰ和Ⅱ。

三、试验结果

1.细菌分离培养。经过培养分离出两种菌，分别为菌Ⅰ和Ⅱ菌，培养特性见表1。

表1 菌Ⅰ和菌Ⅱ的培养特性及菌落特征

2.生化鉴定结果。

（1）菌I生化鉴定结果。经过多种生化试验后，对菌Ⅰ表现出的各种反应进行观察、记录结果见表2。

表2 菌I生化试验结果

（2）菌Ⅱ生化鉴定结果。经过多种生化试验后，对该菌Ⅱ所表现出的各种反应进行观察、记录结果见表3。

表3 菌Ⅱ生化试验结果

3.结果。试验确定菌I为大肠杆菌，菌Ⅱ为沙门氏菌。

四、结论

试验表明，对病死乌骨鸡采取的病料进行病原分离鉴定，发现大肠杆菌和沙门氏菌为主要病原菌，从而指导鸡场进行准确用药，达到精准治疗的目的。