基层兽医采集送检病羊、病料的要点

姜东平

摘要：在基层兽医工作中，一些疾病是常规诊断不出来的，必须进行实验室检查，这就涉及收集动物的病原体。科学地掌握动物病料的采集技术，是确保疾病诊断准确率的关键。本文从采集前准备、采集时应注意的问题、采集过程中的操作技巧等几个方面谈了一些看法，希望能为基层兽医工作者提高采集技术水平提供一些有益的借鉴。

关键词：基层兽医；送检病羊；病料；采集原则

动物疫病监测是我国动物疫病防治工作中的一个重要环节，它直接影响着我国的重大动物疫病防控、公共卫生安全和畜牧业的发展，也影响着广大人民群众的身体健康。动物疫病材料的收集是动物疫病监测工作的先决条件，取样方法、取样部位、取样数量和保存质量直接影响到动物疫病诊断、流行病学调查、免疫监测和动物疫病防治。所以，对动物病料进行收集、送检，是临床医务工作者必须掌握的一门实用技术。动物疫病监测是动物防疫工作的重要内容，也是基层兽医工作的重点。动物疫病不仅关系到动物疫病的监测是动物疫病防治工作中的一个重要环节，也是广大基层兽医工作的重中之重。动物疫病是影响畜牧业发展和公众健康的重要因素，也是影响广大人民群众健康的重要因素。

1 采前准备

防护用品（防护服，口罩，眼镜，手套和橡胶雨靴等），消毒容器（试管，玻璃瓶，塑料瓶，塑料袋，有制冷剂的容器），试验用具器械（刀，剪，镊子，吸管，碘酊药棉，注射器，针头，采血器，棉拭子等），试验药品（酒精，抗凝剂，抗生素等），病料保存液（蒸馏水，生理盐水，甘油缓冲液，磷酸盐缓冲液，甲醛缓冲液等），固定液（95%酒精，10%福尔马林溶液），消毒用品，纱布，取样单，取样标签，记号笔等。

1.1 采集前的准备工作

提前制订好送检病羊及病料的收集计划，备好取样器具及防护用品。取样器具有：玻璃试管、塑料瓶以及采血管等灭菌器具；医疗用具，如剪刀，镊子，药棉，注射器，针头，纱布等；试验药物，如酒精、麻醉剂、抗凝剂等；另外，还有取样单，取样标签和标记等。防护用品包括防护服，防护口罩，透明眼镜，手套，雨鞋。

1.2 采集原则

1.2.1 时间性和新鲜性

病料应尽可能地从活的动物身上采集。如果在动物死后采集时，会导致尸体出现不同程度的腐烂现象，进而会对最终的诊断结果有一定的影响。而且应该在动物死亡后24小时内进行采集工作。

1.2.2 针对性

在采集病料之前，要对患病羊的临床表现进行分析。根据患病羊的发病特点，大致推断患病羊的病因，并根据患病羊所患疾病的实验室诊断方法所需要的相关的病料，进行有针对性的收集。若患病羊或已死亡的羊没有明显的临床表现，或其发病特点比较复杂，则需进行全面的病料收集。同时，为避免单一动物的误诊，对多只动物进行病料收集，确保了诊断的正确性。

1.2.3 无菌性和安全性

为避免病原菌通过空气传播，从而危及人体健康，对病料的采集应严格执行消毒措施。在收集的时候，所有的样品在使用前必须进行灭菌操作。不同类型的患病羊的病料，要分开放置，如有需要，要用密闭容器，以避免空气传染。基层兽医在收集病料的过程中，要注意在采集时的个人的健康和安全，避免在取样时受到传染，从而对自身的健康产生一定程度的影响。

1.2.4 顺序性

采集患病羊病料的过程中必须遵循一定的操作顺序，首先收集采集的是胸腔脏器，之后采集的是腹腔脏器，并且要注意，首先取样实质器官，再采集管状器官。采集的患病羊送检病料的放置仪器，要一一按照先后次序进行编号。

1.2.5 计划性和送检单

患病羊病料的采集工作要有计划地进行操作，切记不能盲目地、无规范地进行。首先要提前准备好患病羊的病料取样时所需的试验器具、消毒用品以及个人防护用品，并对取样器具进行消毒、灭菌等操作，之后才能进行患病羊的病料采集工作。送检报告单必须要和相同编号的患病羊病料一起送到化验室，而且还要附上患病羊病料的详细资料，例如：患病羊所属的品种，患病羊的临床症状以及相关的患病羊病料的采集时间和地点以及患病羊病料的名称和保存的液体等一系列的信息。同时，还要说明患病羊以及病料送检的目的。送检报告单一式三份，一份由相關的送检人员保管，一份由检验机构在检验报告上签字后进行保存，最后一张报告单随着检查报告单一并送回。

2 采样时的注意事项

第一，基层兽医在采集患病羊的病料时，必须穿戴防护衣、雨鞋、口罩、手套、眼镜等，如果采集者的皮肤有损伤，必须要做好相关的防护措施，防止病原体从受损伤口侵入人体。采集场所必须要采取灭菌及隔离等措施，以避免因人体或空气传播致病菌。在进行患病羊病例的操作过程中，要特别小心，不要让任何生病或死去的动物的血液沾染到其他部位。防止疫情蔓延，造成更大的伤害和经济损失。

第二，对于死亡原因不明确的羊，在进行解剖操作之前，必须先要了解该羊生前的病情和表现症状，对其进行细致的检查，然后进行抽血化验工作，逐个排除掉患各类疾病的可能性，最终确定造成其死亡的原因，之后就可以对其进行采集工作。

第三，要进行采集工作的病料必须要取自所患病情况较为典型、临近死亡或者是已死亡的患病羊身上，而且最好是未服用任何药物的羊体，以提高病料的采集质量，从而可以确保最终诊断的准确性。

第四，采集后样品最优的保藏方式是冷冻保存。收集样品的玻璃容器必须采用合适的方法封好，然后马上送去检验，或者将患病羊病料浸泡在保存液中。若收集到的样品不能及时送去化验，必须妥善保管，避免患病羊病料发生变质，从而对最终的检验结果产生一定的影响。

第五，在收集患病羊病料的时候，要特别注重卫生健康问题，确保操作过程中的无菌性，而且采集患病羊病料的工具要做到一只牲畜对应一套操作工具。

3 采集工作

保护好自己。病料采集人员应佩戴口罩、手套、护目镜、穿戴防护衣、雨鞋，尤其是在出现皮肤破损的情况下，应特别注意预防布鲁氏杆菌等传染性疾病的发生。在确定的收集点，进行灭菌、隔离，避免因病原的传播。凡是发现有病的病人，都不要随意解剖。首先要采集末梢血液涂片，以确定炭疽菌的存在，尤其要注意操作，不要让血液沾染其他部位，以免引起病菌的扩散和危害。如果怀疑是炭疽杆菌，不能随便解剖，必须要确认是不是炭疽杆菌后，才可以进行解剖操作。取样时间，要按照不同的检测要求、检测目的以及测试对象，对患病羊病料要在适当的时间内进行取样。先采集发病早期并且有明显临床表现以及没有使用抗生素的病羊。要选择濒临死亡的羊或者是刚刚死去的羊，对于病死的羊，必须立即采样或者在羊死亡后的6h之内取样。在采集患病羊病料时，由于不同的疫病所需的样本也不尽相同，因此，要根据可能的流行病重点取样，如果怀疑是一种疾病，则要从其经常侵犯的地方进行取样，并有选择地收集病变典型的脏器或内容物，同时兼顾病变与健康组织。若小型反刍动物疫病，可采用羊口鼻棉拭子、淋巴结或血沉褐黄。败血症可以通过心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、淋巴结、胃肠等疾病来治疗。羊肠毒血症，采集羊的小肠和肠内容物，口蹄疫，羊痘，则采集的是羊体的水泡（痘）或结痂。当羊有神经性病症时，可采集脑以及脊髓等部位。当要检测血清中的抗体时，如果不知道是什么传染性疾病或者无法确定可疑的羊体时，可以把所有的病羊都送去检查或者全部处理，所收集的样本数应符合检验与再检验的要求。

3.1 全血样品的采集

羊自颈静脉采血并做好标记。用注射器吸5％枸橼酸钠溶液0.5～1ml（0.1ml5％枸橼酸钠溶液可抗1ml血液），注入灭菌离管中。无菌采血5～l0ml加入离心管混匀，盖紧离心管盖，做好标记。

3.2 血清样品的采集

羊自颈静脉采血取3～5ml并做好标记。置于无菌的试管内，置于倾斜的位置，等血液完全凝固后，即可立起来。当血清完全沉淀后，或经离心分离后，用无菌针将血液抽出来，然后将其注射到消毒的离心管内，并将其盖上，做好记号。

3.3 乳汁

用新苯扎氯铵清洁取乳者的双手，同时对乳房、乳头进行消毒，并湿润乳房周围的毛发。先将第一次挤出来的奶排出，再将10～20ml的奶注射到消毒过的试管或瓶子里，并做好记号。

3.4 脓汁、水疱液、水肿液和出液

用消毒棉签沾湿后，将其置于消毒离心处，将外露的部分剪掉，盖上离心帽，做好记号，然后将无破裂的脓灶密封，用消毒注射器将脓液倒入消毒容器，做好记号，然后密封保存。

3.5 鼻拭子、咽拭子、肛拭

用消毒棉拭子在患病羊的鼻部、咽喉、肛部旋转三周以上，沾上分泌物，然后将其倒入加有1mlPBS或是含有生理盐水的无菌离心管内，将裸露部位切下，盖上瓶盖，做好记号，然后冷藏。

3.6 淋巴结、肝、脾、肺、肾淋

巴结可全切，其他器官可采明显的病变部分。用无菌剪刀（肝脾大至豆腐干大小），分别放于消毒仪器内，再取少量病料制成的触片几张，做好记号，一同送检。

3.7 肠

选择合适的肠段长度在5.08cm左右，将结扎线的末端进行结扎，然后放入玻璃瓶或塑料袋内。

3.8 胆汁

取全部胆囊置于一个塑料袋中，或用无菌注射器抽取几毫升的胆汁，然后将其注射到消毒的容器中。

3.9 脑和脊髓

把大脑和脊髓取出来，浸泡在保存液中，或者把整个的头部切下来，用3%的碳酸钠浸泡的纱布包好，然后放进一个塑料袋里。

3.10 小家畜、家禽的尸体和流产胎儿

用浸透消毒剂的纱布包好，用一个塑料袋包装，然后将其整体送往检查。

4 病料保存

采用病料后，要及时送检化验，若无法及时化验，或必须送交外地化验，则需添加适当的保留剂，以保证病料的新鲜，从而得到准确的结果。细菌性传播物质的保藏。病料为组织块，用饱和盐水或30%的甘油缓冲剂贮存，并用盖子密封。用试管将病料灌入密封。病毒性物质的保存。病料为用50%的甘油缓冲剂或蛋清生理盐水中的组织块，用盖子封住。用试管将病料灌入密封。病料采用棉签收集，并置于缓冲液中。保存病例标本。将组织块置于10%福尔马林或95%乙醇中，其含量应为样品体积的10倍或更多。每隔24h更换一次固定液。冬季防冻。将已固定的组织块在送检时取下，用10%福尔马林和甘油等比例的溶液进行保存。血液样本的保存。用于血清学检测的标本不添加抗凝或去纤维，以防止溶血。低温储存，如果有特别要求，可在-5℃低温下储存，避免重复冻融。寄生菌的病原。血液寄生虫（主要是血孢子虫）需要进行血液和全血检测，或制作血涂片。未冷冻处理的线虫粪便标本。线虫是用福尔马林或70%乙醇储存的。

5 病料运送

装有患病羊病料的容器应按顺序一一编号，并注明所送样本的具体状况，而且要附上病料的送检报告单。对有危害的病料，要避免损坏造成散毒的情况，畏热或者畏寒的病料要有针对性地分别采取相应的措施，防止强烈震动，尽早运输，远距离可以安排专人送检，重要的患病羊病料必须由技术人员现场送检。

6 采集病料的原则

6.1 目的明确

动物发病的病因是多种多样的，病原也是多種多样的。对于不同的疾病，需要收集不同的病料进行化验，以确定是否患有某种流行病时，需要收集相关的病料。如果有明显的神经症状，可以进行脑部、脊髓的采集；若有明显的呕吐、腹泻，可收集胃液和肠系膜淋巴结。如果不能确定原因，则可以进行完整的收集。

6.2 剖前检查

如果羊只突然死亡，出现自然孔失血、血液未凝结以及体内含有炭疽杆菌的情况，则不可以将羊体进行解剖，但可以自末梢血管取血来检查。

6.3 病料力求新鲜

要及时有效地收集患病羊病料。在患病羊死后，应该及时采集病料，最长不超过1h。如有需要，可在发病前期或在急需屠宰的羊体上采集病料。

6.4 病料选择

应从有明显临床表现或有典型病理改变的病例中选择。在流行病学调查以及动物健康评价等方面，样本的数量必须符合统计学的要求。

6.5 防止污染环境

收集患病羊病料时，要注意预防环境的污染、疾病的蔓延，注意做好个人卫生以及个人防护，并合理处置好患病羊的尸体，严格预防出现人与动物之间的交叉感染的情况。

6.6 器械消毒

用刀、剪、镊子等器具煮沸杀菌30min，用103kPa的高压加压30min，160℃的条件下烘焙两个小时，或用0.5%～1%的碳酸氢钠溶液煮沸10～15min，然后用干净的纱布擦拭，保存在酒精、乙醚等溶液中。采用一种药物，用一组仪器和一个容器。对已采集的病料进行消毒，然后进行清洁。

6.7 样品记录

送到化验室的样本必须附上一式三份检验报告，一份与样本一起送到化验室，一份之后寄送，一份存档。抽样记录应当包含：畜主姓名、畜场地址、牲畜饲养的种类、数量、受污染的牲畜种类；第一次和第二次发生的时间和损失；牲畜中受影响的动物分布；动物死亡、出现临床症状的动物数量和年龄；包括口腔、眼睛和腿部的症状、产卵记录、死亡、疫苗接种和用药等。

7 结语

基层兽医应从患病羊或已死亡羊的尸体上采集所需的病料，查明病源，才可以有针对性地采取相应的防治措施，以防止、控制、消灭疾病，也可以降低临床工作的盲目性，从而可以有效提高基层兽医技术水平，保障广大养殖户的利益。

参考文献

[1] 宋立岗，张维军，牛艳波.基层兽医采集送检病羊、病料的要点[J].养殖技术顾问，2014（8）：187.

[2] 伊军.基层兽医病料采集的要点分析[J].畜牧与饲料科学，2016，37（5）：111-112.

[3] 贾志江，刘娣琴，杨红梅.采集病料的原则及其技术要点[J].畜牧兽医杂志，2011，30（5）：122-123.

[4] 张姣荣，管艳平.动物病料采集和送检要点[J].养殖与饲料，2013（8）：25-27.