癫痫持续状态患者血清NSE、TNF-α及GAL水平与脑电图异常程度的关系

赵安容 王圣之 崔利君 李波★

癫痫是临床常见的神经系统疾病；其发病机制复杂，至今认为明确，但医学界普遍认为神经免疫调节网络失衡是导致其发生的主要原因之一［1］。癫痫持续状态是患者癫痫发作时间持续5 分钟以上无法停止，在临床中致死率、致残率极高，而且部分得到救治患者可因此出现不可逆脑损伤［2］。炎症状态会刺激神经元持续性放电会导致大脑胶质细胞功能障碍，细胞凋亡速度加快加重癫痫发作频率与时间。神经元特异烯醇化酶（neuron-specific enolase，NSE）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor α，TNF-α）与甘丙肽（Galanin，GAL）在临床中被认为与癫痫的发生有密切关系；而脑电图是目前临床中诊断癫痫的首选方法，也是最有价值的方式［3-4］。临床中对于癫痫持续状态患者脑电图异常情况的研究较少，而癫痫持续状态患者脑电图结果与NSE、TNF-α 与GAL 水平存在何种关系，目前也未阐明。本文旨在探讨NSE、TNF-α 与GAL 水平与患者脑电图的关系，为癫痫持续状态患者的诊断及后续治疗提供相应帮助。报告如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取巴中市中心医院2019年3月至2021年4月癫痫持续状态患者进行筛选，符合标准者共136例将其设置为观察组；另选本院同期体检健康者65例为对照组。观察组男性70 例、女性66 例；平均年龄（48.3±15.2）岁；病程平均（6.0±1.0）年。对照组男性38 例、女性27 例；平均年龄（47.8±15.3）岁。两组性别、年龄比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。

纳入标准：①观察组患者临床资料完整无缺失；②对照组均为巴中市中心医院同期体检健康者无各类急慢性疾病；③观察组符合国际抗癫痫联盟制定的癫痫发作与癫痫综合征诊断指南标准［5］；④观察组患者均在癫痫发作时意识尚未恢复又再次发作癫痫或是发作时间＞5 min 无法自行停止。排除标准：①患有各类急慢性病者；②心、肝、肾患有严重疾病或是各项对应检查结果≥2 项指标与正常值存在明显差异；③患有精神抑郁类疾病者且长期服用治疗药物者；④继发性癫痫者；⑤近3 个月内服用过免疫制剂、激素类药物者；⑥内分泌功能紊乱；⑦有脑卒中、脑出血、脑部手术史者；⑧神经系统疾病。本研究已通过单位伦理委员会通过。所有入试者及家属均知情并签署同意书。

1.2 方法

抽取两组研究对象外周血5 mL（观察组抽取其癫痫发作后2 h 内与24 h 后血液），3 000 r/min 离心5 min，r=13.5 cm，留取血清放入-70℃环境中保存，采用酶联免疫吸附法对NES、TNF-α 与GAL 水平。试剂盒生产商为上海恒远生物科技有限公司。

脑电图检查：采用16 导数字化无纸记录脑电图仪对观察组患者进行检查，根据国际10/20 系统安置头皮电极，使用平均参考导联与双极导联进行扫描记录。检查过程中让患者作出睁眼、闭眼等行为，同时进行闪光刺激与过度换气诱发实验，患者脑电图记录时间需＞30 min。

1.3 观察指标

异常脑电图评定标准［6］：轻度异常：α 节律呈现规则或是不稳定表现，患者睁眼时无明显消失或是抑制反应表现，β 波出现高波幅，且Q 波在各区活动增加，也可表现为主要活动区活动增加，在过度唤起时Q 波出现高幅波动。中度异常：α 节律出现明显不对称，甚至出现消失，Q 波活动呈现弥散性，Q 波可出现活动阵发性发作，过度换气后高波幅δ 波成群出现。重度异常：Q 波、δ 波的活动出现弥散性发作，α波变慢或是消失，δ 波阵发性出现或是自发并伴有高波幅棘波、棘慢综合波、尖波；偶尔出现暴发性活动。

对观察组患者进行随访2年，采用Engel 分级［7］对不同类型患者预后情况进行判断，Ⅰ级：患者药物或是手术治疗后到随访结束癫痫未发作，Ⅱ级：癫痫发作次数显著减少，1年内发作次数≤2 次，Ⅳ级：发作次数＞3 次/年，但发作频率减少75%；Ⅳ级患者发作次数无减少，甚至出现增加。预后良好：Ⅰ级，预后不良：Ⅱ～Ⅳ级；记录不同预后患者NES、TNF-α 与GAL 水平，并分析不同脑电图结果患者预后情况。

1.4 统计学方法

采用SPSS 26.0 软件对数据进行统计学分析，计数资料用n（%）表示，采用χ2检验，符合正态分布的计量资料用（±s）表示，NES、TNF-α 与GAL 水平采用独立样本t检验与单因素方差分析，相关性分析采用kendall，以P＜0.05 表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组NES、TNF-α 与GAL 水平比较

观察组发作2、24 h时的NES、TNF-α与GAL水平明显高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 两组NES、TNF-α 与GAL 水平比较（±s）Table 1 nes and TNF in two groups-α Comparison with gal level（±s）

表1 两组NES、TNF-α 与GAL 水平比较（±s）Table 1 nes and TNF in two groups-α Comparison with gal level（±s）

注：与对照组比较，aP＜0.05。

组别观察组时间点发作2 h 内发作24 h 后n对照组F 值P 值136 136 65 NES（μg/L）65.71±7.98a 64.88±8.02a 12.30±1.03 1418.819＜0.05 TNF-α（μg/L）68.79±8.62a 67.39±8.73a 4.01±7.87 1482.402＜0.05 GAL（ng/L）123.36±23.45a 122.65±25.30a 106.85±7.82 13.930＜0.05

2.2 不同脑电图结果患者NES、TNF-α 与GAL 水平比较及相关性

不同脑电图结果患者NES、TNF-α、GAL 水平在发作2 h 内、24 后比较结果：重度异常组＞中度异常组＞轻度异常组。差异有统计学意义（P＜0.05）。见表2、图1A～C。

表2 不同脑电图结果患者NES、TNF-α 与GAL 水平比较及相关性（±s）Table 2 nes and TNF in patients with different EEG results-α Comparison and correlation with gal level（±s）

表2 不同脑电图结果患者NES、TNF-α 与GAL 水平比较及相关性（±s）Table 2 nes and TNF in patients with different EEG results-α Comparison and correlation with gal level（±s）

注：与重度组比较，aP＜0.05；与中度组比较，bP＜0.05。

发作2 h 内发作24 h 后组别轻度异常组中度异常组重度异常组F 值P 值n 15 69 52 NES（μg/L）51.64±4.87ab 63.10±3.10a 73.23±4.92 190.949＜0.001 TNF-α（μg/L）57.58±9.63ab 68.17±5.53a 72.85±8.73 25.341＜0.001 GAL（ng/L）96.73±26.50ab 119.23±17.32a 136.53±21.31 25.943＜0.001 NES（μg/L）53.60±8.12ab 64.16±5.15a 69.09±7.79 32.779＜0.05 TNF-α（μg/L）55.21±11.86ab 67.87±6.26a 70.27±7.65 23.359＜0.05 GAL（ng/L）98.31±27.03ab 119.80±19.82a 133.45±25.81 14.548＜0.05

图1 本文典型轻度患者脑电图检查结果Figure 1 EEG results of typical mild patients in this paper

2.2.1 NES、TNF-α 与GAL 水平与脑电图相关性

脑电图与NES、TNF-α 与GAL 水平相关性分别为（r=0.767，0.311，0.372，P均＜0.05）。

2.3 不同预后患者NES、TNF-α 与GAL 水平比较

观察组136 例患者均得到随访，其中预后良好者60 例、不良者76 例；分析其就诊时发作2 h 内、24 h 后NES、TNF-α 与GAL 水平预后良好者明显低于预后不良者，差异有统计学意义（P＜0.05）；发作2 h 内预后良好、预后不良者NES 水平与发作24 h比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表3。

表3 不同预后患者NES、TNF-α 与GAL 水平比较（±s）Table 3 Nes and TNF in patients with different prognosis-α Comparison with gal level（±s）

表3 不同预后患者NES、TNF-α 与GAL 水平比较（±s）Table 3 Nes and TNF in patients with different prognosis-α Comparison with gal level（±s）

注：与发作24 h 预后良好比较比较，aP＜0.05；与发作24 h 预后不良比较，bP＜0.05。

发作24 h 内发作24 h 后预后预后良好预后不良t 值P 值n 60 76 NES（μg/L）58.86±5.17a 71.11±5.15b 13.750＜0.001 TNF-α（μg/L）65.41±8.23 71.46±8.01 4.316＜0.001 GAL（ng/L）112.59±22.38 131.87±20.73 5.199＜0.001 NES（μg/L）61.69±7.80 67.40±7.31 4.387＜0.05 TNF-α（μg/L）64.94±9.78 69.33±7.30 2.998＜0.05 GAL（ng/L）114.01±24.22 129.47±24.16 3.700＜0.05

3 讨论

近年来根据统计研究我国癫痫发病率得到了明显上升，且呈现年轻化趋势，部分患者因对抗癫痫治疗存在错误理解，拒绝服用药物或是服药依从性较差，病情控制较差，且癫痫发作存在突然性，若患者在公共场合或是独处时发病，对其心理、生理造成的损害无法量化预估［8］。而癫痫持续状态的发作时因时间长，在公共场所发生时不仅对患者造成严重影响对他人造成的视觉、心理冲击较大，围观群众想帮助患者也可能因不知正确的方法，造成自身或是患者受伤，引起社会舆论关注；若患者独处时发病，因未得到及时救治可造成患者脑部不可逆损伤，严重可因此造成患者终身残疾或是死亡的发生［9-10］。

癫痫发作的主要特征为神经元重复过度异常放电，且经过多年研究，炎症因子与神经元内分泌细胞与其发病存在密切关系。发病时因神经元异常发病诱使神经出现损伤，进而破坏血脑屏障与周围神经胶质细胞［11-12］。NES、TNF-α 与GAL 已被多类研究证实在癫痫患者疾病中的价值，本文分析其在癫痫持续状态患者中的水平发现：在发病2 h 内与24 h 后，上述指标水平并不存在明显差异，但远高于对照组；随后根据患者脑电图结果对异常程度分组再度观察发现脑电图异常程度越高2 h 内与24 h 后NES、TNF-α 与GAL 水平也越高。分析原因：癫痫发作时巨噬细胞会产生大量自由基，血脑屏障被破坏后血液中NSE、TNF-α 浓度随之上升，且研究表明两者与神经细胞损伤存在正相关，脑电图结果异常程度越高则表明患者脑部异常放电情况越严重，因此当患者脑电图结果为重度异常时，神经元内细胞受损程度不断提升，抑制NSE、TNF-α分泌能力逐渐下降，上述指标无法得到制衡，会进一步分泌损害大脑神经，所以表达水平会更高［13-14］。GAL 作为一种神经递质物，其具有对海马区锥体细胞兴奋后突触电位抑制作用，当脑部神经元放电频率过高时，GAL 会大量分泌来组织神经元兴奋，当其呈现高水平表达时，是在降低神经元兴奋度起到缓解癫痫的作用［15］。本文分析NES、TNF-α与GAL 水平与脑电图结果的相关性发现，其相互之间为正相关关系，这表明当上述指标水平升高时脑电图异常程度也将随之升高；反之则下降。

本文对患者进行了2年随访，根据其预后结果对发作2 h 时、发作24 h 后NES、TNF-α 与GAL 水平进行观察发现：预后良好与预后不良者两个时点NES、TNF-α 与GAL 水平均存在明显差异，其中预后良好、不良者发作2 h 时NES 与发作24 h 后水平存在明显差异；另外两项指标却不存在差异。主要原因为：癫痫发生时NSE 在人体脑脊液中也异常兴奋，并通过受损血脑屏障进入人体血液中，癫痫持续状态发作时神经元与神经胶质细胞坏死持续时间长，细胞浆内蛋白外泄进一步刺激了NSE 表达，NSE 不断分泌诱使神经元细胞持续兴奋放电频率、时间增加，脑部神经刺激不断提升，所以脑电图检查与NSE 相关程度会更高［16］。

本文虽得出了相关的研究结果与结论，但本研究为回顾性分析，纳入样本量较少且未对其他影响结果的因素以及患者治疗药物的使用进行考虑，同时观察组患者NES、TNF-α 与GAL 水平为疾病发作2 h内与24 h 后所测结果，无稳定期结果，在对预后的判定上可能存在一定局限。因此，后续要加大样本量并对影响结果的各类因素予以考量进一步分析。

综上所述，血清NES、TNF-α 与GAL 水平与癫痫持续状态患者脑电图结果间存在显著相关关系，且可能参与患者疾病预后。但因本文存在一定局限性不足，后续要进一步分析研究为该病患者的治疗康复提供更全面的数据理论支持。