天麻素固体分散体的制备与体外溶出度测定

周 妮，谢 瑶，黄 静，谭思荣

(湖北三峡职业技术学院 医学院，湖北 宜昌 443003)

天麻为传统名贵中药，以块茎入药，主要含有天麻素、天麻多糖等有效成分，具有熄风平肝、去风定惊的功能。主治风湿腰痛、头昏、肢体麻木、神经痛、抽搐中风等症。近年来的研究发现,天麻还具有增智、健脑、延缓衰老的作用,对老年性痴呆症有一定的疗效[1-2]。天麻越来越受到人们的关注。湖北宜昌产区是目前为止发展较为成熟的天麻产区，近年来呈现出良好的发展势头，但成品制剂少、产品粗放(缺乏技术化)、中药材药物难以溶解、生物利用度不高等问题亟须解决。

固体分散体是目前世界范围内研究比较热门的一种新剂型，可明显改善难溶性药物的溶出速率与溶解度，但将天麻以固体分散体的形式做成中成药制剂在国内罕见报告。本实验通过将天麻素制备成固体分散体，考察其含量和体外溶出度，为天麻中成药制剂开发提供参考依据。

1 仪器与试药

1.1 仪器

Agilent 1200型高效液相色谱仪(美国Agilent公司)；TC-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm，5 μm)(美国Agilent公司)；BSA124S电子天平(德国Sartorius公司)；MG6热熔混合制粒机(深圳信宜特)。

1.2 试剂和材料

天麻素对照品(成都曼斯特，批号MUST-18030827)；天麻素原料药(西安天康，批号TX20200915-8，质量分数5%)，聚乙二醇4000(PEG4000)(天津科密欧，批号20170710)；乙腈(色谱纯)；磷酸(分析纯)；色谱用水为娃哈哈纯净水。

2 方法与结果

2.1 天麻素原料药-PEG4000物理混合物与天麻素固体分散体的制备

2.1.1 天麻素原料药与PEG4000物理混合物的制备

将PEG4000粉碎，过80目筛，按照天麻素原料药和PEG4000质量比为1∶4称取物料并混匀，得到二者的物理混合物(以下简称物理混合物)。

2.1.2 天麻素固体分散体的制备

设定物料温度为54℃，设定主机搅拌转速为60 r/min。按“2.1.1”制备物理混合物，投入热熔制粒机中；待温度升高到设定值，并观测到物料热熔后，出料；趁热用粉碎机粉碎，过20目筛。得到天麻素固体分散体颗粒，备用。

2.1.3 含量测定

分别取天麻素原料药1 g、天麻素原料药与PEG4000物理混合物5 g、天麻素固体分散体5 g，精密称定，置于100 mL量瓶中；超声30 min溶解并稀释至刻度，过滤，滤液按“2.2.1”项下色谱条件测定含量，记录色谱图(见图1)。

图1 天麻素固体分散体

2.2 方法学考察

2.2.1 色谱条件

流动相为V(乙腈)∶V(0.1%磷酸溶液)=3∶97，柱温25 ℃，检测波长220 nm，流速1.0 mL/min，进样量20 μL。

2.2.2 对照品溶液

精密称取天麻素对照品7.8 mg置于100 mL量瓶中，以流动相溶解并稀释至刻度，制成质量浓度为78 μg/mL天麻素对照品储备液。取上述溶液20 μL 进样，按“2.2.1”项下色谱条件测定，记录色谱图(见图2)。

图2 天麻素对照品溶液

2.2.3 标准曲线的制备

精密吸取2.2.2项下天麻素对照品储备液1.0、2.0、4.0、6.0、8.0 mL，分别置于不同的10 mL量瓶中，以流动相稀释至刻度，得到质量浓度为7.8、15.6、31.2、46.8、62.4 μg/mL的天麻素对照品溶液，摇匀进样。以峰面积为纵坐标，质量浓度为横坐标绘制标准曲线，得线性回归方程：Y=34.199X-0.9402，R2=1。结果表明，天麻素在7.8～62.4 μg/mL范围内线性关系良好。

2.2.4 精密度试验

取同一供试品溶液，连续进样6次，按照“2.2.1”项下条件测定，记录峰面积。RSD为0.12%，结果表明仪器精密度良好。

2.2.5 稳定性试验

取同一供试品溶液，在0、2、4、8、12、24 h进样，记录峰面积。RSD为1.25%，表明供试品溶液在24 h内稳定性良好。

2.2.6 重复性试验

按“2.2.3”项下制备7.8 μg/mL天麻素对照品溶液6份，分别进样，记录峰面积，以标准曲线法计算含量。RSD为0.27%，表明该方法重复性良好。

2.2.7 加样回收率

精密称取同一批天麻素原料药6份，分别置于100 mL容量瓶中，分别精密加入2 mg天麻素对照品，以流动相定容，摇匀进样，记录峰面积，计算回收率和RSD。平均回收率为97.75%，RSD为0.97%，表明加样回收率试验结果符合要求。结果见表1。

表1 加样回收率试验结果

2.3 体外溶出度的测定

分别取天麻素原料药、天麻素原料药与PEG4000物理混合物、天麻素固体分散体适量[3](相当于含有天麻素50 mg)，投入溶出杯内；以900 mL纯化水为溶出介质，温度37±0.5 ℃，转速为75 r/min,按照《中国药典》2020年版(第四部)通则0931第二法测定。在5、15、30、60、120、240 min，取溶液10 mL，同时补加相同温度的纯化水10 mL，溶液经0.22 μm微孔滤膜过滤。取滤液按“2.2.1”项下色谱条件测定,根据标准曲线计算天麻素的溶出度。结果见图3。显示天麻素固体分散体的溶出度显著高于天麻素原料及其PEG时与物理混合物。

图3 天麻素原料药、物理混合物、固体分散体的体外溶出度

3 讨论

常进[4]曾以甲醇-磷酸作为流动相，但在该色谱条件下，天麻素出峰时间在20 min以上，即使调节甲醇-磷酸的比例，最快出峰时间也在18 min；改用乙腈-磷酸作为流动相后，保留时间明显缩短。采用本法测定天麻素含量，精密度、稳定性、重复性、加样回收率均较好，方法可靠。

采用PEG4000为载体，按照药物和载体的质量比为1∶4制备固体分散体，其含量和溶出度均比天麻素原料药及其与载体的物理混合物高，说明将天麻素制成固体分散体能有效提高其溶解性与溶出度。但除了PEG，还有聚维酮(PVP)、羟丙甲基纤维素(HPMC)、聚环氧乙烷(PEO)等多种常用载体[5-6]，天麻素与何种载体、在何种比例制备固体分散体有最佳效果，仍需进一步探索研究。