廖云琼, 吕颜枝, 陈永亮, 康永刚
(徐州生物工程职业技术学院,江苏徐州 221006)
近年来, 由于养殖过程中长期使用抗生素和化学添加剂,导致食品安全出现较多问题,因此开发安全高效新型生物饲料具有非常重要的意义(苏晨曦等,2015)。微生物发酵饲料是利用微生物菌剂在人为控制条件下, 对饲料进行发酵而成的一种新型微生物饲料(阮栋等,2019),研究表明,微生物发酵可以提高饲料中粗蛋白质含量, 降低粗纤维含量, 还可以产生大量有益于畜禽健康的代谢产物,具有提高饲料利用率、改善肠道健康、加强肉鸡免疫功能等特点(陈晓春等,2021;Cheng等,2014)。目前,用于生产发酵饲料的微生物菌剂主要有乳酸杆菌、芽孢杆菌、酵母菌、链球菌、黑曲霉和米曲霉等(翟晓莉,2011),其中枯草芽孢杆菌能够改善畜禽肠道的菌群结构, 抑制或杀灭致病菌,促进机体的消化吸收,增强机体免疫力和提高抗应激能力(Molnar 等,2011)。 目前,以枯草芽孢杆菌和酵母菌作为混合菌剂用来发酵饲料在白羽肉鸡中的应用鲜见报道。 本试验以枯草芽孢杆菌和酵母菌为发酵菌剂,肉鸡基础饲粮为底物,通过微生物发酵制作发酵饲料, 饲喂白羽肉鸡以研究其对白羽肉鸡生长性能、 免疫性能及肉品质的影响, 为复合微生物发酵饲料在肉鸡生产中的应用提供参考。
1.1 试验材料 复合微生物菌剂由枯草芽孢杆菌N-8、枯草芽孢杆菌N-10 和酵母菌组成,按4∶4∶3 的比例混合, 活菌数平均为 1.0×1010cfu/g,由徐州市隆兴生物科技有限公司提供。
发酵饲料的制备: 在基础饲粮中加入40%水,将配制好的复合微生物菌剂以40 mL/kg 均匀喷洒在基础饲粮上,边喷洒边混匀,然后装入规格为50 kg 的发酵塑料袋中,排出空气密封后,在温度为30 ℃的条件下发酵3 d,发酵结束后将其烘干, 即得复合微生物发酵饲料。 基础饲粮组成及营养水平见表1。
1.2 试验动物与试验设计 试验选取体重相近、健康无病的爱拔益加(AA+)1 日龄肉仔鸡600只,公母各半,随机分为5组,每组120只,每组6个重复,每个重复20只。对照组饲喂基础饲粮,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组分别用25%、50%、75%和100%发酵饲料替代基础饲粮,试验期为42 d。 试验肉仔鸡由汤阴县全达家禽育种有限公司提供。
1.3 饲养管理 试验在徐州生物工程职业技术学院养殖场进行。 试验前彻底清扫、冲洗、消毒鸡舍、鸡笼及饲喂设备,采用层叠式鸡笼饲养,每笼5只鸡,定时饲喂,自由采食、饮水,早晚观察鸡只采食及健康情况, 严格按照肉仔鸡饲养管理手册饲喂,定期清扫消毒鸡舍,严格按照免疫程序接种疫苗。
1.4 测定指标及方法
1.4.1 生产性能测定 分别在1 日龄和42 日龄时对每只鸡空腹称重,详细记录饲料消耗量,计算平均日采食量、平均日增重、料重比。
1.4.2 免疫性能测定 试验结束后, 随机抽取接近平均体重且健康的鸡60只, 每个重复2只,于翅下静脉采血5 mL,分离血清后置于-20 ℃冰箱中保存待测,采用酶联免疫吸附法(ELISA 法)测定免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白 G(IgG)和免疫球蛋白M(IgM)含量,试剂盒购自南京建成生物工程研究所, 各指标由徐州市动物疫病工程技术研究中心协助完成。
1.4.3 肉品质测定 试验结束后, 于次日08:00颈静脉放血屠宰随机抽取的60只鸡, 宰前禁食12 h,禁水2 h,取胸肌肉样进行肉品质测定。采用上海雷磁生产的精密酸度计 (PHS-3C)45 min 内测定pH, 采用柯尼卡美能达生产的色彩色差计(CR-400)测定肉样亮度(L*)、红度(a*)和黄度(b*), 采用德国麦特斯生产的肌肉嫩度测定仪(C-LM3B)测定肉样剪切力值,采用北京布拉德生产的失水率测定仪(Bulader-M10)测定肉样失水率。
1.5 数据处理 采用Excel 2020 对数据进行初步统计处理,SPSS 20.0 进行单因素方差分析,并进行Duncan’s 多重比较,数据结果以“平均值±标准差”表示。
2.1 复合微生物发酵饲料对白羽肉鸡生长性能的影响 由表2 可知,试验Ⅳ组平均日增重最高,显著高于对照组和试验Ⅰ、Ⅱ组(P <0.05),与试验Ⅲ组相比差异不显著(P >0.05),试验Ⅳ组比对照组和试验Ⅰ、 Ⅱ、 Ⅲ组分别提高了9.20%、8.35%、6.19%、2.58%;试验Ⅳ、Ⅲ、Ⅱ组料重比显著低于对照组和试验Ⅰ组(P < 0.05),试验Ⅳ、Ⅲ、Ⅱ组组间差异不显著(P >0.05),试验Ⅳ组比对照组、试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别降低了 0.04、0.03、0.01、0.01。
表2 复合微生物发酵饲料对白羽肉鸡生长性能的影响
2.2 复合微生物发酵饲料对白羽肉鸡免疫性能的影响 由表3 可知, 复合微生物发酵饲料对白羽肉鸡免疫性能影响显著, 试验Ⅳ组IgA、IgG 和IgM 含量均显著高于对照组(P < 0.05),且随着饲粮中发酵饲料比例的增加而增加, 其中试验Ⅳ组IgA 含量比对照组和试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别提高了97.11、89.44、44.04、34.86 ng/mL(P < 0.05);试验Ⅳ组IgG 含量显著高于对照组和试验Ⅰ、 Ⅱ组(P< 0.05),与试验Ⅲ组相比差异不显著(P > 0.05);试验Ⅳ组IgM 含量最高,显著高于对照组、试验Ⅰ组(P <0.05),与试验Ⅱ、Ⅲ组相比差异不显著(P > 0.05)。
表3 复合微生物发酵饲料对白羽肉鸡免疫性能的影响 μg/mL
2.3 复合微生物发酵饲料对白羽肉鸡肉品质的影响 由表4 可知, 复合微生物发酵饲料对鸡胸肌黄度(b*)和失水率均无显著影响(P > 0.05)。试验Ⅲ、Ⅳ组 pH 均显著低于其他组(P < 0.05);试验Ⅲ和Ⅳ组亮度(L*)和红度(a*)均显著高于其他组(P <0.05);试验Ⅳ组剪切力最小,显著低于对照组、试验Ⅰ、Ⅱ组(P <0.05),与试验Ⅲ组相比差异不显著(P >0.05);试验Ⅰ组失水率最低,与其他组相比差异不显著(P >0.05)。
表4 复合微生物发酵饲料对白羽肉鸡肉品质的影响
3.1 复合微生物发酵饲料对白羽肉鸡生长性能的影响 微生物发酵饲料是利用微生物菌剂大量繁殖,将饲料中蛋白质、淀粉、纤维素等大分子物质分解成有机酸、 游离氨基酸、 可溶性多肽、维生素等小分子物质,使发酵后的饲料更容易被消化吸收(孙波等,2021;吴逸飞等,2016),同时发酵可去除抗营养因子, 提高饲料的营养品质、适口性及消化能力,从而提高动物的生产性能(梁天柱等,2021),但由于受到微生物菌剂种类、配比、试验动物、饲养环境、饲养管理模式等影响, 微生物发酵饲料在肉鸡饲养中的应用有着不同的饲喂效果(赵永玉,2021)。 Ashayerizadeh 等(2018)研究发现,饲用发酵菜籽粕对肉鸡生长性能、 肉质和脂质代谢能等产生了有益影响。叶成智等(2021)研究发现,日粮添加2.5%发酵饲料可提高肉鸡的日采食量和日增重。 本试验研究表明, 复合微生物发酵饲料能显著提高白羽肉鸡平均日采食量和日增重, 降低料重比, 这可能是因为发酵饲料通过微生物发酵产生了特殊的香味,提高了适口性,增加了肉鸡的采食量,进而提高了日增重(杨荣等,2019;刘晶晶等,2014),与孙汝江等(2012)、舒刚等(2013)的研究结果一致。 但也有研究认为,添加5% ~10%发酵饲料对肉仔鸡生长性能无显著影响,添加15%时对肉仔鸡平均日增重有显著影响 (倪玉姣等,2012), 与本试验中微生物菌剂添加比例不同,比文献报道的比例高,这可能与选择的菌剂种类、菌剂配比、试验动物、饲养管理模式等不同有关。
3.2 复合微生物发酵饲料对白羽肉鸡免疫性能的影响 动物体血清中IgA、IgG 和 IgM 的含量能够反映机体免疫功能的高低 (马伟斌等,2021),它能与相应抗原特异性结合,在机体抵抗外界病原体侵蚀感染中起着非常重要的作用(闫理东等,2012)。 IgA 可以阻止微生物在呼吸道上皮附着,抑制病毒增殖,是阻碍病原体入侵动物机体的第一道防线;IgG 具有激活补体、中和毒素的作用(张献月,2013)。 有研究认为,复合微生态制剂能够改善肉仔鸡的肠道健康,提高其对饲料的消化吸收率, 促进免疫器官的发育,提高机体免疫球蛋白含量,增强免疫功能,提高机体抗病能力 (吕远蓉等,2017)。 李锦等(2019)研究认为,乳酸菌发酵饲料显著提高了雏鸡体内免疫球蛋白 IgA、IgM、IgG、NDV-Ab 含量, 表明乳酸菌发酵饲料可提高雏鸡体液免疫和细胞免疫功能。 刘淑娇等(2019)研究发现,利用0.4%、0.6%和0.8%的复合益生菌(乳酸菌、枯草芽孢杆菌和酵母菌)可显著提高肉仔鸡21 日龄和 42 日龄的 IgG 含量。 孙焕林(2015)研究也认为, 枯草芽孢杆菌发酵棉籽粕可显著提高29~ 64 d 免疫球蛋白(IgA、IgM、IgG)的含量。 本试验研究表明, 血清中免疫球蛋白的含量随饲粮中复合微生物发酵饲料的增加而增加, 当添加量为 100%时, 血清中 IgA、IgG 和IgM 的含量最高, 说明复合微生物发酵饲料提高了白羽肉鸡血清免疫球蛋白水平,改善了肉鸡的免疫效果,这可能是因为复合微生物发酵饲料中的枯草芽孢杆菌和酵母菌可以调节白羽肉鸡肠道菌群及刺激肠道组织产生免疫球蛋白, 增加肠道中乳酸菌数量,从而提高肉鸡的免疫功能。
3.3 复合微生物发酵饲料对白羽肉鸡肉品质的影响 鸡肉品质评定可以通过pH、颜色、嫩度、系水力等指标衡量,pH 是动物屠宰后肌肉酸度的直观表现(安文俊等,2011),能够反映肌肉糖原酵解的速率,还会影响肌肉颜色、嫩度及贮存期(Calvo 等,2017),是肉品质理化指标的主要检测项目。 朱瑾等(2019)研究发现,枯草芽孢杆菌可以降低肌肉pH,提高系水力,改善肉品质。 本试验研究表明, 复合微生物发酵饲料可显著降低胸肌pH,与陈婷等(2019)研究结果一致。 肉色是消费者衡量肉品好坏的感官指标, 而嫩度是消费者评价肉质口感的重要指标, 通常嫩度由剪切力来反映,剪切力值越大,肌纤维越粗,嫩度则越低,反之嫩度越高(魏清宇等,2018)。有研究表明,饲粮中添加200 mg/kg 枯草芽孢杆菌和200 mg/kg 富硒酵母可显著提高胸肌的系水力、嫩度(王海波等,2021)。 李菊等(2007)研究认为,0.5%乳酸菌发酵液添加到肉鸡日粮中,可使胸肌和腿肌的肉色红度、黄度提高,剪切力值降低。 本试验结果表明,饲粮中添加枯草芽孢杆菌和酵母菌能够增加肌肉a* 值, 说明复合微生物菌剂改善了鸡肉的颜色,延长了货架期,孙波等(2021)研究也表明,复合益生菌发酵饲料能将纳雍土鸡的a* 值提高3.13%, 显著改善了肉色,本试验中,复合微生物发酵饲料为100%时, 胸肌 L*、a* 和 b* 值均高于其他各组, 说明枯草芽孢杆菌和酵母菌在一定程度上能改善鸡肉颜色,与陈婷等(2019)研究结果相似。 梁天柱等(2021)研究表明,发酵饲料可在一定程度上降低广西三黄鸡胸肌、腿肌的剪切力,并且显著降低腿肌剪切力。 本试验研究结果表明,复合微生物发酵饲料100%添加时,剪切力最小,失水率最低,说明饲粮通过枯草芽孢杆菌、酵母菌等混合发酵后, 能显著提高白羽肉鸡对营养物质的转化率,肌肉的抗氧化能力增加,从而使白羽肉鸡肌肉嫩度增加,水分流失减少,从而改善了肉的品质。
复合微生物发酵饲料可显著提高白羽肉鸡的平均日增重、降低料重比,并能有效提高白羽肉鸡的免疫性能, 改善鸡肉品质。 本试验条件下,当添加100%复合微生物发酵饲料时效果最好,值得推广应用。