硒对热应激下黄羽肉鸡生产性能、血液指标、器官和肠道发育的作用

钟 光 ， 朱沛霁 ， 贾代汉 ， 齐玉凯 ， 施寿荣

（1.江苏立华牧业股份有限公司，江苏常州 231000；2.中国农业科学院家禽研究所，江苏扬州 225125）

动物在高温环境下极易发生热应激， 从而造成机体采食下降，生产性能降低，组织器官的正常发育也受到不同程度的损伤， 如免疫器官的发育被抑制、肠道绒毛高度降低等，对畜禽生产和繁殖带来不利影响 （Toghyani 等，2012；Mckee，Sams，1997）。 为缓解热应激损伤，各种措施被不断的研究和利用。从营养学角度着手，是一种缓解乃至解决热应激的兼顾经济性和便利性的措施。 研究表明，元素硒有缓解热应激的作用。给予热应激状态下的AA 肉鸡0.2 mg/kg 的硒元素， 发现其体重、采食量和饲料转化率显著提高 （Ai Wakeel 等，2017；Habibian 等，2015；Niu 等，2009）。 也有研究表明， 给予热应激状态下母猪0.4 mg/kg 的硒元素，发现添加组母猪的体温调节能力、泌乳性能和产仔重显著提高， 背膘重和负增重显著降低（Liu等，2017）。黄羽肉鸡是华东、华南地区广泛分布的配套系，出栏量大，但当前对其抗热应激添加剂的相关报道较少。 其次， 黄羽肉鸡体型较白羽肉鸡小，生长速度慢，生理特点与白羽肉鸡等商品鸡也可能存在差异， 因此研究黄羽肉鸡的抗热应激添加剂， 对其生产有着重要的指导作用。 硒作为GSH-Px 的重要组成部分， 其本身或许也有较强的抗氧化功能。本试验在饲粮中添加0.3 mg/kg 的硒，研究其对热应激下黄羽肉鸡生产性能、血液指标、器官和肠道发育的作用，为黄羽肉鸡规模化生产中缓解热应激损伤提供一定的指导作用。

1 材料与方法

1.1 试验材料 黄羽肉鸡（中速型，“优黄”系列，扬州立华畜禽有限公司提供，江苏省），亚硒酸钠（Na2SeO3，纯度＞96%，Se 含量为 45.66%，购买自江苏易实生物科技有限公司）。

1.2 试验设计 选择体重相近、 健康的32 d 雄性黄羽肉鸡180只，随机分为常温组（CN）、热应激组（HS）和硒添加组（HS+Se），每组 6个重复，每重复10只鸡。 常温组和热应激组饲喂基础饲粮，硒添加组在基础饲粮中添加0.3 mg/kg 的硒。常温组环境为26 ℃，热应激组和硒添加组环境温度为35 ℃，试验设计和温度处理见表1。

表 1 试验设计与处理

1.3 饲养管理 试验共14 d， 采用三层笼养，鸡笼规格为120 cm×80 cm，保证饲养密度在0.1 m2/只左右。 使用北京库蓝科技有限公司生产的动物营养代谢环控仓控制温度， 湿度在55% ～60%。为避免高温环境（35 ℃）降低肉鸡采食量造成硒元素的摄入不足， 正式试验前7 d 开始饲喂对应的试验饲粮。 自由采食和饮水，24 h 光照，其他管理措施同黄羽肉鸡饲养标准。 配制饲粮时， 按照0.30 mg/kg 的硒（Se）添加量及其试验用亚硒酸钠的纯度（96%），在饲粮中添加0.70 mg/kg 的亚硒酸钠（Na2SeO3）。 基础饲粮按照我国《鸡饲养标准》（NY/T33-2004）进行配制并制粒，基础饲粮组成与营养水平见表2。

表2 基础饲粮组成与营养水平（风干基础）

1.4 采样指标和方法

1.4.1 生产性能 每日喂料时称料重， 试验结束时统计每个重复的余料重， 试验开始和采样前统计每个重复的体重（BW），计算32 ～45 d 的平均日增重（ADG），平均日采食量（ADFI），料重比（F/G）和死淘率。

1.4.2 血液指标 热应激14 d，从每个重复中随机选取2只鸡，翅下静脉采血并置于促凝管中，静置离心并分离血清。 采用UniCel DxC 800 Synchron 全自动生化分析系统 （Beckman Coulter，美国）测定血清中丙氨酸转氨酶（ALT，又称谷丙转氨酶）、天冬氨酸转氨酶（AST，又称谷草转氨酶）、乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）的活力和内毒素（RSE）的含量。 试剂盒购买自中山标佳生物科技有限公司（中国广东）。

1.4.3 器官和肠道发育 热应激14 d，从每个重复中随机选取2只鸡，称重并记录，经颈静脉放血致死，而后打开腹腔，分离心脏、肝脏、胸腺、脾脏、法氏囊并称重、记录，计算器官的相对比重。

器官比重/%=器官重/活重×100。

分离整个肠段， 而后悬空剪取空肠和回肠中间约1 cm 肠段并置于4%的甲醛溶液中，快速固定24 h，然后用连续浓度的乙醇脱水。 标本在二甲苯中清除， 并在56 ℃的热风炉中放入石蜡中24 h。 石蜡组织块用切片机 （徕卡手动旋转切片机，RM-2235 型，德国徕卡微系统有限公司）制备用于横切片。 在玻片上采集组织切片，脱蜡，苏木精和伊红染色，然后分别在光学显微镜下（50 倍放大，DM-1000 型，德国徕卡微系统有限公司）检查组织学特征。 利用Leica X 应用软件，对每张切片测量绒毛高度和隐窝深度。 绒毛高度是从隐窝-绒毛交界处到绒毛顶的长度， 而隐窝深度是从肌肉黏膜到隐窝-绒毛交界处的长度， 因此可以计算绒毛高度：隐窝深度比（V/C）。

1.5 数据分析 数据经Excel 2013 进行统计和简单处理后， 用 SPSS 20.0 软件的 One-Way-ANOVA 进行单因素方差分析， 均值显著性分析用 LSD 和 Duncan’s 法进行多重比较，结果以“平均数±标准误”表示，并以P ＜0.05 作为显著差异水平，同时根据LSD 的组间显著性，分别以P1、P2作为“温度”因素和“硒”因素的显著性。

2 结果与分析

2.1 硒对热应激下黄羽肉鸡生产性能的作用由表 3 可知，HS组黄羽肉鸡的 45 d BW、32 ～ 45 d ADG、ADFI 显著低于 CN组（P ＜ 0.05），32 ～ 45 d的料重比和死淘率显著高于对照组（P ＜0.05）；与HS组相比，HS+Se组45 d 黄羽肉鸡的体重显著提高了 12.3%，32 ～ 45 d 的 ADG 和 ADFI 显著提高了 112.3%、36.1%（P ＜ 0.05）， 料重比显著降低了 35.6%（P ＜ 0.05）。

表3 硒对热应激下黄羽肉鸡生产性能的作用

2.2 硒对热应激下黄羽肉鸡血液指标的作用由表 4 可知，HS组黄羽肉鸡的血清 ALT、AST、LDH、CK 活力和内毒素含量显著高于 CN组（P ＜0.05）； 与 HS组相比，HS+Se组的 AST、LDH、CK活力和内毒素含量分别显著降低了38.8%、34.9%、51.5%和 28.5%（P ＜ 0.05）。

表4 硒对热应激下黄羽肉鸡血液指标的作用

2.3 硒对热应激下黄羽肉鸡器官和肠道发育的作用 由表5 可知，HS组的胸腺比重、脾脏比重和法氏囊比重显著低于 CN组 （P ＜ 0.05）； 与 HS组相比，HS+Se组的胸腺比重、 脾脏比重和法氏囊比重分别显著提高了56.3%、30.8%和62.5%（P ＜0.05）。

表5 硒对热应激下黄羽肉鸡器官发育的作用 %

由表6 可知，HS组空肠和回肠的绒毛高度、绒毛高度/隐窝深度显著低于对照组 （P ＜0.05）；与HS组相比，HS+Se组的空肠绒毛高度和绒毛高度/隐窝深度分别显著提高了9.5%、13.3%（P ＜0.05），回肠绒毛高度和绒毛高度/隐窝深度分别显著提高了 26.4%、75.1%（P ＜ 0.05）。

表6 硒对热应激下黄羽肉鸡肠道发育的作用

3 讨论

3.1 硒对热应激下黄羽肉鸡生产性能的作用高热环境对家禽生长的不良影响已经得到大量的研究。 例如，热应激能够显著降低42 日龄的肉仔鸡体重和饲料利用效率，给生产带来不利影响；会改变机体的生理机能，并随着强度增强，机体代谢发生紊乱，体重下降甚至发生负增长，严重的会导致死亡 （潘子意等，2020；Sohail 等，2012）。硒缓解热应激对家禽生产性能的损伤也有研究证实。 研究表明，硒可改善热应激条件下泰和乌骨鸡的生产性能， 适宜的添加水平为0.5 ～0.7 mg/kg，能够改善热应激下肉鸡的体重、饲料转化率、 存活率 （许兰娇等，2014；Ei-sheikh 等，2006）。 本试验结果表明，热应激显著降低了黄羽肉鸡的体重、ADG、ADFI， 显著升高了料重比和死淘率， 说明本试验温度构建的热应激模型成功。 与热应激组相比，硒添加组的体重、日增重、日采食量显著提高，料重比显著降低，说明饲粮添加0.3 mg/kg 的硒能够提高热应激下黄羽肉鸡的生产性能， 这与前人研究的结果相一致， 可能是因为硒是三碘甲状腺原氨酸合成酶的重要辅助因子和活化剂， 能通过活化三碘甲状腺原氨酸，调控营养物质的吸收和代谢（田金可等，2011）。 此外，与热应激组相比，硒添加组的死淘率有降低的趋势， 说明硒有提高热应激下黄羽肉鸡的存活的可能， 这可能与硒的抗氧化作用有关。

3.2 硒对热应激下黄羽肉鸡血液指标的作用研究表明， 高温环境造成的热应激会改变鸡血清中某些酶的活性， 例如 ALT、AST、LDH 和 CK等这类正常情况下仅存在于细胞内的酶， 仅在机体的组织和器官受损时才释放到血液中（Melesse 等，2011；刘小林等，2008）。 因此，它们在血清中的含量是评估组织和器官受损的重要指标，研究中常用谷丙转氨酶、谷草转氨酶来反映肝脏功能情况。 而内毒素是细菌细胞壁分泌的脂多糖，其含量反映了机体的亚健康程度。 有研究报道， 热应激能够显著升高血清中ALT 和AST 活力，增加组织、细胞的通透性，增加血液中的内毒素含量 （Wan 等；2017；Hosseini-vashan等，2016）。 而硒对血液指标的相关研究报道较少，主要关注硒增强机体抗氧化功能的作用。 研究表明， 硒能参与谷胱甘肽过氧化物酶 （GSHPx）的合成，起到清除机体过量自由基、提高机体抗氧化功能的作用（田金可等，2011）。 本试验结果表明，HS组的 ALT、AST、LDH、CK 活力和内毒素含量显著高于对照组， 这与前人研究结果一致，表明本试验的温度下，热应激模型构建成功，其次，硒添加组AST、LDH、CK 的活性和内毒素含量显著低于热应激组， 说明饲粮中添加0.3 mg/kg 硒元素能显著降低机体器官和组织的受损程度，这可能与硒的抗氧化功能有关，具体原因有待进一步的验证。

3.3 硒对热应激下黄羽肉鸡器官和肠道发育的作用 器官的功能往往与其大小、形态相关。 常用器官的重量或相对重量来反映器官的发育情况。 本试验结果表明，热应激显著降低了黄羽肉鸡胸腺、脾脏、法氏囊的相对比重，这与“热应激能造成机体的器官受损，并发生免疫抑制，从而抑制胸腺、 脾脏、 法氏囊等免疫器官的正常发育”的研究结果相一致（阮炜珊，2016）。 而与热应激组相比，硒添加组的胸腺、脾脏、法氏囊比重显著增加， 说明在本试验条件下， 饲粮添加0.3 mg/kg 的硒能促进热应激下黄羽肉鸡的免疫器官发育， 缓解热应激对黄羽肉鸡器官的发育抑制。 但本试验未发现热应激对黄羽肉鸡心脏、肝脏比重的影响，也未发现硒对黄羽肉鸡心脏、肝脏比重的作用。 这可能与试验天数和动物品种的不同有关。

肠道是消化吸收的主要场所，空肠主要负责吸收营养物质， 回肠在发酵中起着至关重要的作用。 黏膜形态是营养物质吸收的关键，反映了肠道整体健康状况 （Ducatelle 等，2018；Damron等，2005）。 发生热应激时，小肠的结构很容易被破坏，包括绒毛高度缩短、破裂、隐窝变深和黏膜上皮细胞脱落等， 这可能是机体在高温环境下会产生过量的氧自由基， 从而严重破坏肠道黏膜（Yu 等，2010；Tan 等，2010）。 本试验结果表明， 热应激显著降低了空肠和回肠的绒毛高度和绒毛高度/隐窝深度值， 这与前人研究结果相一致，说明本试验温度构建的热应激模型成功。与热应激组相比， 硒添加组空肠和回肠的绒毛高度和绒毛高度/隐窝深度值显著升高， 说明在本试验条件下，饲粮中添加0.3 mg/kg 的硒能显著改善热应激下黄羽肉鸡的肠道黏膜形态，缓解热应激对肠道黏膜形态的损伤。

4 结论

在本试验条件下，饲粮中添加0.3 mg/kg 的硒能提高热应激下32 ～45 日龄黄羽肉鸡的生产性能、器官和肠道发育，缓解热应激对黄羽肉鸡生产性能、血液指标、器官和肠道发育的不良影响。