多发伤合并脓毒症患者血浆s-CD62P水平与炎症因子、凝血指标的相关性研究*

陆畅，薛建华，刘佳佳，杨洋

（南通大学附属医院 创伤中心，江苏 南通226001）

多发伤，指的是由同一致伤因素造成的至少两个解剖部位同时发生的创伤，且其中至少有一处创伤可能危及生命[1]。多发伤患者常合并脓毒症、多器官功能障碍综合征、全身炎症反应综合征等，有较高的致残率和病死率，其中脓毒症是多发伤患者死亡的一个重要原因。脓毒症被认为是全身炎症平衡失调所引起的进行性内皮细胞损伤、血小板及白细胞激活、凝血系统受损，进而造成的多器官功能障碍[2]。可溶性颗粒膜蛋白CD62P（s-CD62P）是黏附分子选择素家族的成员之一，是血小板活化及内皮损伤的重要标志物，同时在启动和维持炎症状态过程中也发挥重要作用[3]。既往关于s-CD62P 的研究重心基本上都放在心血管疾病方面，较少有研究揭示s-CD62P 与脓毒症患者凝血系统、炎症反应的关系。本研究拟探讨s-CD62P 与多发伤脓毒症患者炎症因子、凝血指标之间的关系，以期为脓毒症以s-CD62P 为靶点的抗黏附治疗提供科学依据，提高患者的救治成功率。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2017年1月—2019年12月南通大学附属医院ICU 收治的102 例多发伤合并脓毒症患者为观察组。其中，男性60 例，女性42 例；年龄24～76 岁，平均（48.85±18.24）岁；致伤原因：交通事故61 例，高处坠落12 例，锐器刺伤12 例，钝器砸伤10 例，其他7 例；伴颅脑损伤66 例，伴胸部伤60 例，伴腹部伤48 例，伴骨盆四肢骨折90 例，伴面部损伤12 例，伴体表损伤10 例。纳入标准：年龄≥18 岁；符合多发伤诊断标准；符合《中国严重脓毒症/脓毒性休克治疗指南（2014）》的脓毒症诊断标准[4]：白细胞计数升高，有发热、心动过速、呼吸急促等症状； 伴有全身炎症反应综合征（systemic inflammatory response syndrome, SIRS）[5]；创伤严重度评分＜16 分；受伤至入住ICU 时间不超过24 h，且ICU 入住时间不低于48 h。排除标准：合并糖尿病、高血压、心脏疾病；处于妊娠期；伴有呼吸系统疾病；近期应用过免疫抑制剂。另选取同期100 例体检健康者为对照组，身体状况良好，各项体检结果正常。其中，男性55 例，女性45 例；年龄28～74 岁，平均（50.04±16.38）岁。两组的性别构成、年龄比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。本研究通过医院伦理委员会批准，患者或家属知情并签署知情同意书。

1.2 方法

观察组在入住ICU 后24～48 h 内、对照组在体检时分别采集空腹静脉血6 mL。采集的血液标本分为3 份，各2 mL。一份以乙二胺四乙酸二钾抗凝管保存（1 号管），一份以分离胶促凝管保存（2 号管），一份以枸橼酸钠抗凝管保存（3 号管）。1 号管血样3 000 r/min 离心10 min，去除上清液，保留血浆，采用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测血浆s-CD62P 水平，试剂盒购自美国R&D 公司，严格按照试剂盒说明书操作。2 号管血样4 000 r/min 离心5 min，取上清液，用Beckman Coulter AU5821 全自动生化分析仪（购自美国贝克曼库尔特有限公司），采用双抗夹心免疫发光法检测降钙素原（PCT）水平，采用酶联免疫吸附法检测炎症因子，包括肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、超敏C 反应蛋白（hs-CRP）、白细胞介素-6（IL-6）水平，试剂盒购自北京晶美生物公司，严格按照试剂盒说明书操作。3 号管血样4 000 r/min 离心5 min，去除上清液，保留血浆，用Sysmex CS 5100 全自动凝血分析仪（购自日本希森美康公司）检测凝血相关指标，包括凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、血小板计数（PLT）、D-二聚体（D-D）。分离出的血浆需及时送检，室温放置不得超过2 h，2～8℃保存时间不得超过4 h，以保证检测结果的准确性。

1.3 统计学方法

数据分析采用SPSS 20.0 统计软件。计数资料以构成比（%）表示，比较用χ2检验；计量资料以均数±标准差（±s）表示，比较用t检验；相关性分析用Pearson 法。P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组炎症因子、血浆s-CD62P水平比较

两组的TNF-α、hs-CRP、PCT、IL-6 及血浆s-CD62P 水平比较，差异有统计学意义（P＜0.05），观察组高于对照组。见表1。

表1 两组的炎症因子、血浆s-CD62P水平比较 （±s）

表1 两组的炎症因子、血浆s-CD62P水平比较 （±s）

组别观察组对照组t 值P 值n 102 100 TNF-α/（pg/mL）32.35±13.82 5.37±1.14 19.457 0.000 hs-CRP/（mg/L）92.46±20.25 3.37±1.86 43.812 0.000 PCT/（μg/L）153.17±63.54 8.48±2.30 22.756 0.000 IL-6/（ng/L）158.27±9.05 62.64±11.28 66.525 0.000 s-CD62P/（ng/mL）223.05±69.14 96.25±31.54 16.713 0.000

2.2 两组凝血指标比较

两组PT、APTT、PLT、D-D 比较，差异有统计学意义（P＜0.05），观察组的PT、APTT 长于对照组，D-D 水平高于对照组，PLT 低于对照组。见表2。

表2 两组的凝血指标比较 （±s）

表2 两组的凝血指标比较 （±s）

组别观察组对照组t 值P 值n 102 100 PT/s 13.50±2.24 10.13±0.53 14.647 0.000 APTT/s 37.52±13.51 20.36±2.42 12.506 0.000 PLT/（×109/L）153.65±46.24 233.58±24.15 15.354 0.000 D-D/（μg/L）860.14±68.16 192.41±79.54 64.110 0.000

2.3 s-CD62P与炎症因子、凝血指标的相关性

Pearson 相关分析显示，s-CD62P 与TNF-α、hs-CRP、IL-6、PCT 水平呈正相关（均P＜0.05）；s-CD62P 与PT、APTT、D-D 水平呈正相关（均P＜0.05），与PLT 水平呈负相关（P＜0.05）。见表3。

表3 s-CD62P与炎症因子、凝血指标的相关性

2.4 炎症因子与凝血指标的相关性

Pearson 相关分析显示，TNF-α 水平与PT、APTT、D-D 水平呈正相关（均P＜0.05），与PLT 呈负相关（P＜0.05）；hs-CRP 水平与PT、APTT、D-D水平呈正相关（均P＜0.05），与PLT 呈负相关（P＜0.05）；IL-6 水平与PT、APTT、D-D 水平呈正相关（均P＜0.05），与PLT 呈负相关（P＜0.05）；PCT 水平与PT、APTT、D-D 水平呈正相关（均P＜0.05），与PLT 呈负相关（P＜0.05）。见表4。

表4 炎症因子与凝血指标的相关性分析

3 讨论

多发伤患者并发脓毒症是一个渐进的过程，炎症因子在这一过程中发挥着关键性作用。本研究结果显示多发伤合并脓毒症患者的TNF-α、hs-CRP、PCT、IL-6 水平均高于健康者。这是因为创伤本身及创伤引起的失血、休克、疼痛等非特异性反应会使机体处于全身持续高代谢状态，诱发产生大量的炎症介质和血管活性物质。合并脓毒症的多发伤患者病情危重，患者机体内炎症机制与抗炎细胞因子平衡失调，SIRS 无法及时得到纠正，所以这类患者的炎症反应程度更为严重[6]。

s-CD62P 是反映血小板活化情况的特异性标志物，同时也是炎症反应启动并维持所不可或缺的重要物质，所以s-CD62P 同时也是炎症反应的标志物。s-CD62P 是内皮细胞、血小板在炎症介质或组织缺氧刺激下最先表达的一种膜蛋白，其能通过结合细胞表面的P-选择素糖蛋白配体-1（PSGL-1）来启动白细胞与血小板，或者内皮细胞的黏附、迁移，进而引发内皮细胞损伤。s-CD62P 能够介导血管内皮细胞与血小板的黏附、聚集，参与凝血，同时还可促进中性粒细胞在炎症或受损内皮细胞局部的滚动，从而使炎症反应加重[7-8]。本研究显示多发伤合并脓毒症患者的血浆s-CD62P 水平明显比健康者更高。这与同类文献报道[9]结论一致，表明多发伤合并脓毒症患者发生了内皮细胞损伤，s-CD62P 可能通过参与炎症反应促进脓毒症的发生与发展[10]。魏捷等[11]的研究报道指出，在创伤失血性休克、重症脓毒症、脓毒症休克三类患者的s-CD62P 水平均高于正常人，并且三类患者中，感染程度最高的脓毒症休克患者的s-CD62P 水平最高，这表明s-CD62P 与机体炎症反应程度密切相关，且两者为正向关系。这与本次研究得出的多发伤合并脓毒症患者的血浆s-CD62P 水平与炎症因子TNF-α、hs-CRP、IL-6、PCT 均呈正相关结论一致。

本研究结果显示，相比健康者，多发伤合并脓毒症患者的D-D 水平明显升高，PT、APTT 时间明显延长，而PLT 水平明显降低。这提示脓毒症患者严重的炎症反应可能造成了凝血系统活化、抗凝机制下调、纤溶系统抑制。王改锋等[12]的报道指出，APTT、PT 水平脓毒症组＜严重脓毒症组＜脓毒症休克组，纤维蛋白原水平脓毒症组＞严重脓毒症组＞脓毒症休克组，凝血功能障碍随着脓毒症病情的加重而加重。这是因为：脓毒症病情的持续进展会激活机体外源性凝血途径，增强内源性抗凝系统活性，体内凝血/纤溶系统平衡被打破，生理性抗凝物质减少，从而使得机体处于高凝状态[13]。研究[14-15]显示，s-CD62P 能够同时触发炎症和凝血级联反应，介导血小板在内皮细胞和白细胞中的黏附，增强核因子κB 活性，促使单核细胞释放大量组织因子，再与活化血小板膜融合而发生凝血。s-CD62P 表达的升高可促进广泛微血管炎症及血栓的形成，进而增加脓毒症病死的风险。本研究结果也显示s-CD62P 与凝血指标PT、APTT、D-D 呈正相关，与PLT 呈负相关。由此可见，s-CD62P 参与了血小板活化和凝血/纤溶系统失衡，其可能是多发伤脓毒症患者炎症反应，以及机体处于高凝状态的始动因素之一。

综上所述，s-CD62P 水平与炎症因子、凝血指标密切相关，其可诱导脓毒症炎症-凝血网络的形成，临床针对s-CD62P 采取有效的抗黏附治疗，可能有助于改善脓毒症患者的高炎症及高凝状态，改善患者预后。