乳腺癌彩色多普勒血流成像与雌激素受体、人表皮生长因子受体 2、p53和Ki-67的相关性分析

张鹏飞，王茂，冉兵#

陕西中医药大学第二附属医院1超声科，2肿瘤乳腺外科，陕西 咸阳 712000

乳腺癌是临床妇科上常见的一种恶性疾病，近年来，其发病率呈不断增高趋势，所以早期诊断治疗对乳腺癌患者具有的重要意义。超声、X线检查、CT等影像学手段是临床诊断乳腺癌的主要方法，其中超声因操作简便、可重复性强成为首选筛查手段，尤其是高频彩色多普勒血流成像（color Doppler flow imaging，CDFI）。在肿瘤发展过程中，分子生物具有重要意义，可在一定程度上影响肿瘤的形态、恶性程度等，进而影响其影像学征象。国内外文献发现，雌激素受体（estrogen receptor，ER）、人表皮生长因子受体2（human epidermal growth factor receptor 2，HER2）、p53及Ki-67等免疫组织化学指标与乳腺癌诊治、预后关系密切。本研究旨在探讨乳腺癌CDFI征象与ER、HER2、p53及Ki-67的相关性，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2019年9月至2020年12月陕西中医药大学第二附属医院收治的乳腺癌患者。纳入标准：①经病理组织学检查确诊为乳腺癌；②无超声检查禁忌证；③未进行放疗、化疗等治疗；④临床资料完整。排除标准：①孕妇；②伴精神性疾病，有意识、沟通障碍；③合并其他脏器恶性肿瘤、器官衰竭等严重疾病；④伴循环功能严重障碍、肝肾功能严重损伤。根据纳入与排除标准，本研究共纳入76例乳腺癌患者，其中年龄26～86岁，平均（44.33±8.24）岁。

1.2 检查方法

1.2.1 超声检查 选用西门子彩色多普勒超声诊断仪，频率为9～11 MHz的线阵探头。患者均充分暴露胸部和腋窝，行常规二维超声多切面扫描，观察病灶回声、位置、大小等情况，利用CDFI观察血流情况。

1.2.2 免疫组织化学法 取乳腺癌患者手术切除24 h内的乳腺癌组织，使用4%甲醛溶液固定，常规石蜡包埋，4 μm连续厚切片。免疫组织化学染色链霉抗生物素蛋白-过氧化物酶（streptavidin-peroxidase，SP）法检测ER、HER2、p53、Ki-67，分别用兔抗人ER及鼠抗人HER2、p53、Ki-67单克隆抗体，染色试剂购自福建迈新生物科技制剂公司。根据阳性细胞百分比、染色强度评分进行染色结果判断，其中阳性细胞百分比评分：无阳性细胞为0分，＜10%为1分，10%～50%为2分，＞50%为3分；染色强度评分：无色为0分，淡黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分。阳性细胞百分比评分与染色强度评分的乘积为总分，总分≥3分即判断为阳性。

1.3 观察指标

观察患者的CDFI特征（肿瘤直径、边缘毛刺征、微钙化、血流分级、淋巴结转移、后方回声衰减），并分析其与ER、HER2、p53及Ki-67表达的关系。

1.4 统计学方法

2 结果

2.1 ER、HER 2、 p53及Ki-67的阳性表达情况

乳腺癌患者ER、HER2、p53及Ki-67阳性表达率分别为 73.68%（56/76）、60.53%（46/76）、48.68%（37/76）、40.79%（31/76），其中ER阳性表达率最高，Ki-67阳性表达率最低。

2.2 不同超声特征的乳腺癌患者乳腺癌组织中ER、HER 2、 p53及Ki-67阳性表达率的比较

不同肿瘤直径、后方回声衰减情况的乳腺癌患者乳腺癌组织中ER、HER2、p53及Ki-67阳性表达率比较，差异均无统计学意义（

P

＞0.05）。有边缘毛刺征、血流分级为0～1级、有淋巴结转移的乳腺癌患者乳腺癌组织中ER阳性表达率均高于无边缘毛刺征、血流分级为2～3级、无淋巴结转移者，差异有统计学意义（

χ

=29.545、8.924、30.456，

P

＜0.05）。有微钙化、血流分级为2～3级、有淋巴结转移的乳腺癌患者乳腺癌组织中HER2阳性表达率均高于无微钙化、血流分级为0～1级、无淋巴结转移者，差异有统计学意义（

χ

=29.690、57.199、16.374，

P

＜0.05）。血流分级为2～3级、有淋巴结转移的乳腺癌患者乳腺癌组织中p53及Ki-67阳性表达率均高于血流分级为0～1级、无淋巴结转移者，差异有统计学意义（

χ

=17.620、4.699，

χ

=29.127、8.440，

P

＜0.05）。（表1）

表1 不同超声特征的乳腺癌患者乳腺癌组织中ER、HER 2、 p53及Ki-67阳性表达情况（ n=76）

2.3 不同超声特征与乳腺癌患者乳腺癌组织中ER、HER 2、 p53及Ki-67阳性表达的相关性分析

乳腺癌患者乳腺癌组织中ER阳性表达与肿瘤边缘毛刺征、淋巴结转移均呈正相关（

P

＜0.05），与血流分级呈负相关（

P

＜0.05），而与肿瘤直径、微钙化、后方回声衰减均无相关性（

P

＞0.05）。乳腺癌患者乳腺癌组织中HER2阳性表达与肿瘤微钙化、血流分级、淋巴结转移均呈正相关（

P

＜0.05），而与肿瘤直径、边缘毛刺征、后方回声衰减均无相关性（

P

＞0.05）。乳腺癌患者乳腺癌组织中p53、Ki-67阳性表达与血流分级、淋巴结转移均呈正相关（

P

＜0.05），而与肿瘤直径、边缘毛刺征、微钙化、后方回声衰减均无相关性（

P

＞0.05）。（表2）

表2 不同超声特征与乳腺癌患者乳腺癌组织中ER、HER 2、 p53及Ki-67阳性表达的相关性分析

3 讨论

肿瘤细胞生物学行为与其分子生物学之间存在一定的联系，对肿瘤的影像学特征有不同程度的影响，ER、HER2、p53及Ki-67等是目前临床上评估乳腺癌生物学行为的常见标志物。故认为，上述指标表达情况与乳腺癌超声特征可能存在某种联系。

ER是调节细胞生长发育的雌激素受体，可刺激乳腺管生长。相关研究证实，肿瘤细胞的分化程度较高时，ER阳性表达率会提高，此时进行内分泌治疗会达到很好的治疗效果，预后亦较好。本研究发现，乳腺癌肿瘤直径与ER表达无明显相关性。由此可见，恶性肿瘤直径并不随其恶性程度升高而增加。而伴淋巴结转移及毛刺征者ER阳性表达率更高，且相关性分析显示，ER表达与上述特征具有一定相关性，说明伴边缘毛刺征、淋巴结转移者ER阳性表达率较高，肿瘤生长依旧受激素调控，适合进行内分泌治疗。于喜法等指出，乳腺癌肿瘤伴边缘毛刺征，ER阳性表达率更高，可预示肿瘤侵袭性行为低，临床治疗效果好，预后更佳。HER2是人体表皮生长因子之一，主要参与细胞生长、增殖及分化等过程，可作为预测肿瘤预后的指标之一。靳凤梅等报道发现，乳腺原位癌钙化常见于HER2的过度表达，HER2无表达时，多无钙化。本研究中HER2阳性表达者伴微钙化率显著高于无微钙化者，且微钙化与HER2阳性表达呈正相关，与上述报道相符。

p53

是一种抑癌基因，其失活对肿瘤形成起重要作用，

p53

基因突变与乳腺癌的发生密切相关。温瑜鹏等发现，p53阳性表达与乳腺癌直径、淋巴结转移具有一定关系。但本研究结果显示，p53与乳腺癌直径无关，与文献报道不符，推测可能与操作者技术、纳入样本量等因素有关。Ki-67是一种核抗原，Ki-67阳性表达率高者肿瘤细胞恶性程度高，侵袭性强，预后较差。本研究结果显示，伴淋巴结转移者Ki-67阳性表达率显著高于无淋巴结转移者。有无淋巴结转移是目前公认的预测乳腺癌预后的一个关键指标，而Ki-67的表达可导致细胞有丝分裂增强，进而增加肿瘤发生其他脏器转移的风险。

乳腺癌是典型的血管依赖性病变，乳腺癌新生血管的存在是CDFI显像的病理学基础。从乳房肿瘤CDFI血流丰富程度来看，恶性程度多为2～3级，良性多为0～1级。本研究结果显示，ER阳性表达者0～1级者多，而HER2、p53、Ki-67阳性表达者以2～3级居多，相关性结果亦显示，血流分级与ER阳性表达呈负相关，与HER2、p53、Ki-67均呈正相关，提示ER低表达，HER2、p53、Ki-67高表达者临床治疗效果、预后可能更差。

综上所述，乳腺癌患者CDFI征象与ER、HER2、p53及Ki-67阳性表达存在一定的相关性，在预测乳腺癌生物学特性中具有一定指导价值。