Lp⁃PLA2、Hcy及γ⁃GGT在下肢动脉硬化闭塞症中的表达及临床意义

张温温 孙灿龙 吴延庆 史洪涛

下肢动脉硬化闭塞症（Arteriosclerosis obliter⁃ans，ASO）属于一种慢性疾病，主要由于动脉粥样硬化累及下肢动脉导致动脉狭窄或闭塞，从而使得肢体出现缺血症状，是全身动脉硬化性疾病在下肢的表现［1⁃2］。ASO 病变特点以累及大中动脉为主。近年来，ASO 已成为血管外科常见病与多发病，发病率约为0.6%～9.2%，多好发于老年人［3］。药物、外科手术及血管腔内治疗等方式是临床上治疗ASO 的常用手段，虽具有一定疗效，但ASO仍是导致患者截肢、致残的主要原因之一。诸多研究均证实，在ASO 发生、发展过程中，脂蛋白相关磷脂酶A2（Lipoprotein associated phospholipase A2，Lp⁃PLA2）、同型半胱氨酸（Homocysteine，Hcy）及γ⁃谷氨酰转肽酶（γ⁃Glutamyl transpeptidase，γ⁃GGT）等因子扮演着重要的角色［4⁃5］。本研究将进一步阐述上述因子在不同类型、分期的ASO 患者中的表达情况及其意义。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集本院2017年1月至2020年1月收治的112 例ASO 患者作为ASO 组。纳入标准：①所有患者均符合ASO 的诊断标准［6］；②临床资料完整，无缺损或丢失；③伴有间歇性跛行、下肢静息痛等下肢症状；④年龄≥60 岁，且无意识障碍。排除标准：①合并血液病、泌尿系感染者；②合并严重肝肾疾病、感染性疾病者；③下肢深静脉血栓及严重皮肤损伤或溃疡者；④动脉钙化者。男77 例，女35 例，平均年龄（64.63±8.49）岁；平均体重指数（24.15±3.23）kg/m2；Fontaine 分期［7］：Ⅰ期，间歇性跛行38 例；Ⅱ期，患肢有静息痛43 例；Ⅲ期，患足有溃疡或坏疽31 例。另选取同期52 例体检的健康老年人作为对照组，男40 例，女12 例，平均年龄（65.25±9.01）岁；平均体重指数（23.51±2.42）kg/m2。两组性别、年龄等一般资料比较差异无统计学意义（P>0.05）。本研究经医院医学伦理委员会批准通过，受试者均签署知情同意书。

1.2 方法

清晨抽取所有受检者5 mL 空腹外周静脉血，置于3 000 r/min 速度下离心10 min，离心半径10 cm，随后抽取上层血清，置于-80℃环境中保存。Lp⁃PLA2 采用散射比浊法检测，Hcy、γ⁃GGT 采用酶联免疫吸附法检测，试剂盒均由南京建成生物公司提供。详细步骤严格按照说明书执行。

1.3 观察指标

①比较两组Lp⁃PLA2、Hcy 及γ⁃GGT 水平。②计算ASO 患者中ABI 大小情况，并比较不同ABI 大小及不同分期患者的Lp⁃PLA2、Hcy 及γ⁃GGT 水平。ABI 测量：采用8MHz 多普勒听诊器先对肱动脉收缩压进行测量，随后在踝部胫前动脉、胫后动脉、腓动脉或足背动脉之间选择动脉搏动最强的血管测量踝部，所测踝部动脉与肱动脉收缩压之比为踝舷指数。参考Gregson 等［8］文献，以0.43 为界限，将患者分为ABI>0.43 组，ABI≤0.43 组。

1.4 统计学方法

采用SPSS 22.0 统计软件进行统计分析，计量资料以（±s）表示，行t检验；相关性采用spearman相关性分析法，以P<0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 ASO 组、对照组Lp⁃PLA2、Hcy 及γ⁃GGT 水平比较

ASO 组Lp⁃PLA2、Hcy 及γ⁃GGT 水平均显著高于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。见表1。

表1 ASO 组、对照组Lp⁃PLA2、Hcy 及γ⁃GGT 水平比较（±s）Table 1 comparison of Lp⁃PLA2，Hcy and TNF⁃α between ASO group and control group γ⁃GGT level（±s）

表1 ASO 组、对照组Lp⁃PLA2、Hcy 及γ⁃GGT 水平比较（±s）Table 1 comparison of Lp⁃PLA2，Hcy and TNF⁃α between ASO group and control group γ⁃GGT level（±s）

组别ASO 组对照组t 值P 值n 112 52 Lp⁃PLA2（μg/L）64.76±7.15 26.87±3.63 36.074<0.001 Hcy（μmol/L）26.53±3.84 10.63±2.31 27.603<0.001 γ⁃GGT（U/L）40.36±7.23 22.41±2.44 17.423<0.001

2.2 ASO 不同Fontaine 分期患者Lp⁃PLA2、Hcy及γ⁃GGT 水平比较

ASO 患者Lp⁃PLA2、Hcy 及γ⁃GGT 水平：Ⅰ期<Ⅱ期<Ⅲ期，差异均有统计学意义（P<0.05）。见表2。

表2 ASO 不同Fontaine 分期患者Lp⁃PLA2、Hcy 及γ⁃GGT 水平比较（±s）Table 2 comparison of Lp⁃PLA2，Hcy and Hcy in patients with different Fontaine stages of ASO γ⁃GGT level（±s）

表2 ASO 不同Fontaine 分期患者Lp⁃PLA2、Hcy 及γ⁃GGT 水平比较（±s）Table 2 comparison of Lp⁃PLA2，Hcy and Hcy in patients with different Fontaine stages of ASO γ⁃GGT level（±s）

注：与Ⅰ期比较，aP<0.05；与Ⅱ期比较，bP<0.05。

组别Ⅰ期Ⅱ期Ⅲ期F 值P 值n 38 43 31 Lp⁃PLA2（μg/L）55.25±4.21 63.25±7.46a 78.51±10.32ab 82.700<0.001 Hcy（μmol/L）19.68±3.67 27.54±2.19a 33.52±6.34ab 95.570<0.001 γ⁃GGT（U/L）28.66±4.99 41.63±8.59a 52.94±10.03ab 78.800<0.001

2.3 ASO 不同ABI 大小患者的Lp⁃PLA2、Hcy、γ⁃GGT 水平及ABI 比较

ABI≤0.43 者 50 例，ABI>0.43 者 62 例。ABI≤0.43 组Lp⁃PLA2、Hcy 及γ⁃GGT 水平均显著高于ABI>0.43 组，ABI 低于ABI>0.43 组，差异均有统计学意义（P<0.05）。见表3。

表3 ASO 不同ABI 大小患者的Lp⁃PLA2、Hcy、γ⁃GGT水平及ABI 比较（±s）Table 3 Comparison of Lp⁃PLA2，Hcy，Hcy in ASO patients with different ABI sizes γ⁃GGT level and ABI（±s）

表3 ASO 不同ABI 大小患者的Lp⁃PLA2、Hcy、γ⁃GGT水平及ABI 比较（±s）Table 3 Comparison of Lp⁃PLA2，Hcy，Hcy in ASO patients with different ABI sizes γ⁃GGT level and ABI（±s）

组别ABI≤0.43 组ABI>0.43 组t 值P 值n 50 62 Lp⁃PLA2（μg/L）72.63±8.14 58.41±6.35 10.387<0.001 Hcy（μmol/L）31.71±6.11 22.35±2.02 11.329<0.001 γ⁃GGT（U/L）45.63±9.84 36.11±5.13 6.592<0.001 ABI 0.25±0.06 0.63±0.11 21.926<0.001

2.4 Lp⁃PLA2、Hcy、γ⁃GGT 水平与ABI 相关性分析

相关性分析结果示，Lp⁃PLA2（r=-0.587）、Hcy（r=-0.641）、γ⁃GGT（r=-0.465）水平与ABI 均呈负相关（P<0.05）。

3 讨论

目前有关ASO 发病机制的报道显示，内皮功能障碍是发生动脉粥样硬化的早期事件，与动脉粥样斑块发生、进展关系密切。近年来，“内皮损伤反应学说”备受广大学者的关注，另一种主要学说是脂质浸润学说。国内外相关研究发现，合并冠状动脉疾病的ASO 比率显著高于其他疾病，高达70%［9］。Lp⁃PLA2、Hcy 及γ⁃GGT 等生物学因子与ASO 之间的关系十分密切。

Lp⁃PLA2 是一种磷脂酶超家族成员，由成熟的巨噬细胞合成分泌，肥大细胞在受到炎症刺激时会有少量分泌，该物质的分泌受到炎症介质的调节［10］。Lp⁃PLA2 对氧化卵磷脂具有水解作用，其生成产物会对血管内皮造成损伤，引起单核细胞浸润，使泡沫细胞发生沉积，进而促进动脉粥样硬化［11］。吴爱成等［12］研究发现，伴有冠状动脉粥样硬化者Lp⁃PLA2 水平会显著上升，Lp⁃PLA2 一定程度上参与了动脉粥样硬化的病理发展过程。Hcy 是一种含硫氨基酸，是甲硫氨酸代谢的中间产物。高Hcy 会导致血管内皮产生羟自由基、过氧化物等氧自由基，并且导致清除氧自由基的酶能力降低，引起蛋白质损伤，破坏弹力胶原纤维；同时可刺激血管平滑肌细胞增生，促进硬化斑块形成，是导致血管硬化的独立危险因素之一［13］。Kozakova 等［14］通过比较有斑块ASO 患者与非斑块ASO 患者的Hcy水平，发现两组比较差异有统计学意义；在ASO 患者不同阶段中，Hcy 均发挥作用。γ⁃GGT 主要存在于人体肝胆系统中，与肥胖、高血脂症、高血压等代谢性疾病具有一定关系。最近流行病学证实血清γ⁃GGT 可作为预测心血管疾病的生化标志物［15］。目前颈动脉、冠状动脉粥样硬化中均发现有γ⁃GGT活性表达，由于γ⁃GGT 可催化低密度脂蛋白氧化反应，而氧低密度脂蛋白在动脉粥样硬化中具有重要作用，因此γ⁃GGT 参与了动脉粥样硬化［16］。进一步具体比较不同分期、ABI 大小的ASO 患者Lp⁃PLA2、Hcy 及γ⁃GGT 水平发现，不同分期、ABI大小的ASO 患者上述因子水平比较差异有统计学意义。故推测Lp⁃PLA2、Hcy 及γ⁃GGT 水平的高低可能是评估ASO 病情严重程度的有效指标。

ABI 是评估周围血管闭塞性疾病病变程度的一种有效手段，其很好地消除了年龄、全身血压计动脉壁硬化等因素对下肢血压绝对值的影响，可较为准确地反映下肢动脉缺血的病变程度［17］。本研究通过分析Lp⁃PLA2、Hcy、γ⁃GGT 水平与ABI 的相关性，发现Lp⁃PLA2、Hcy、γ⁃GGT 水平越高者，ABI 越低，呈显著负相关。ABI 大小反映ASO 患者严重程度，即患者ABI 越低，病情越严重，同时Lp⁃PLA2、Hcy、γ⁃GGT 水平越高，反之亦然。可见当Lp⁃PLA2、Hcy、γ⁃GGT 水平低时，ASO的发病进度放缓。上述因子可作为评估ASO 严重程度的生物指标。

综上所述，Lp⁃PLA2、Hcy 及γ⁃GGT 在ASO 中呈异常表达，且与ABI 具有一定相关性。通过检测上述因子可有效评估ASO 患者病情严重程度