γ-去氢骆驼蓬碱和去氢骆驼蓬碱小鼠单次经口给药急性毒性实验研究

阿娜古丽·马合木提，祖里皮亚·塔来提

（1.新疆维吾尔自治区维吾尔医药研究所，新疆 乌鲁木齐830001；2.新疆维吾尔重点实验室，新疆 乌鲁木齐 830001）

0 引言

β-咔啉类生物碱是在自然界分布最广，数量最多，也是研究最为深入的咔啉类生物碱，呈现非常广谱的生物活性，如抗肿瘤、抗病毒、抗真菌、抗炎、抗疟疾、杀藻等，其中抗癌作用研究的最多[1]。然而，近年来，与β-咔啉类生物碱相比，γ-咔啉生物碱以更为显著的抗癌活性引起人们的注意[2-3]。目前，天然产物当中报道的γ-咔啉生物碱极少，对其研究主要集中在合成的化合物[4]。本实验采用小鼠单次经口给药急性毒性实验，以γ-去氢骆驼蓬碱和去氢骆驼蓬碱两种成分不同剂量小鼠死亡情况和死亡率，以改良寇氏法计算LD50[5]，为评价γ-去氢骆驼蓬碱和去氢骆驼蓬碱两种化合物的用药安全性提供实验依据。

1 研究材料

1.1 实验动物。KM小鼠，体重18～22g，雌雄各半，购于新疆医科大学动物中心，等级：SPF级。动物饲养于小鼠塑料笼盒内，每笼饲养同性别动物不多于5只，自由饮水、摄食，室温20℃～26℃，相对湿度40%～70%，光照12 h，黑暗12 h；实验开始前适应性饲养3 d，经一般行为观察，选用符合要求的动物作为实验动物。

1.2 药物。γ-去氢骆驼蓬碱和去氢骆驼蓬碱，自制，含量大于98%。溶媒：0.5%羧甲基纤维素钠CMC-Na溶液，批号：181104，购于天津市光复精细化工研究所。

1.3 饲料、垫料及饮用水。SPF鼠维持饲料购于北京科澳协力饲料有限公司；SPF级木屑垫料购于北京科澳协力饲料有限公司；饮用水为通过高压灭菌的纯化水，垫料经高压灭菌后使用。

1.4 实验仪器。MP6001电子天平（上海恒平科学仪器有限公司）。

2 方法

2.1 小鼠经口给药实验。取KM健康小鼠120只，雌雄各半，按体重和性别随机分5组，以γ-去氢骆驼蓬碱和去氢骆驼蓬碱两种化合物，在LD0与LD100间设计5个剂量，每组l0只，间距1∶0.75。每只0.2 mL/10 g经口给药。给药后观察14 d，观察有无异常反应，记录小鼠死亡情况和计算死亡率，以改良寇氏法计算LD50。

2.2 数据处理[5]。改良寇氏法计算LD50：

Xm为最大剂量组剂量的对数值，P为各组小鼠的死亡率，用小数表示，i为相邻两剂量比值的对数，即l g（高/低），n为每组小鼠数。

3 实验结果

3.1 一般症状及解剖观察。γ-去氢骆驼蓬碱组死亡小鼠刚开始出现毒性时，出现自主运动减少，呼吸困难，紫绀等症状。去氢骆驼蓬碱组小鼠死亡前不同程度出现活动减少，呼吸急促等症状。死亡小鼠解剖观察：大部分小鼠心脏、血管瘀血，部分肝脏颜色呈深红色，小部分小鼠肝脏有黄斑，胃肠道颜色胀气等情况。

3.2 小鼠死亡情况，见表1和表2。

表1 γ-去氢骆驼蓬碱单次经口给药实验小鼠死亡情况表

表2 去氢骆驼蓬碱单次经口给药实验小鼠死亡情况表

3.3 计算半数死死量（LD50）。由表1和表2可见：γ-去氢骆驼蓬碱组最大剂量组剂量的对数值Xm为2.6049，去氢骆驼蓬碱组Xm为2.6631。用改良寇氏法计算经口给药LD50，LD5095%的可信区间，LD50的平均可信区间。γ-去氢骆驼蓬碱小鼠单次经口给药LD50为213.75mg/kg。LD5095%的可信区间是184.5～247.63（mg/kg）；LD50的平均可信区间是182.19～245.32（mg/kg）。去氢骆驼蓬碱小鼠单次经口给药LD50为274.22 mg/kg。LD5095%的可信区间是234.15～321.14（mg/kg）；LD50的平均可信区间是230.76～317.68（mg/kg）。

4 讨论

近年来，国内外学者对去氢骆驼蓬碱进行大量的研究，并取得一定成果，但至今对γ-去氢骆驼蓬碱的研究报告极少。前期研究中，本课题组已从民族药材骆驼蓬中分离制备了γ-去氢骆驼蓬碱和去氢骆驼蓬碱，本实验研究针对γ-去氢骆驼蓬碱和去氢骆驼蓬碱等两种化合物进行了安全性试验研究，对其安全性和毒性进行了科学评价，并为临床安全用药的剂量设计提供参考依据，为临床毒性反应的监护及生理生化指标监测提供依据。

本实验研究发现，经口给药一定浓度的γ-去氢骆驼蓬碱小鼠可出现死亡，死亡小鼠急性毒性主要表现为自主运动减少，呼吸困难，紫绀；经口给药一定浓度的去氢骆驼蓬碱小鼠可出现死亡，死亡小鼠急性毒性主要表现为活动减少，呼吸急促。死亡小鼠解剖观察：大部分小鼠心脏、血管瘀血，部分肝脏颜色呈深红色，小部分小鼠肝脏有黄斑，胃肠道颜色胀气等情况。