TB-DNA、IgG、IgM 及血沉检测在菌阴肺结核诊断中的应用价值探讨

苏俊梅 谢荣章 欧雅文

肺结核是一种慢性传染病,是由肺部感染结核杆菌所致,会累及许多器官,重要传染源为排菌者,主要经呼吸道传播。近几年,中国肺结核发病率开始逐年上升,其中痰菌阴性患者人数占60%～70%［1］。现阶段,细菌学检查仍为诊断结核病的金标准,传统的抗酸染色涂片敏感性为19.5%～35%［2］,而普通培养分枝杆菌出报告的时间在6～8 周,且要求较高的培养条件,较低的阳性率,很多医院在开展这一方法时条件不够。因此,需深入探究有效的诊断形式,提升诊断效率。本文围绕菌阴肺结核诊断中TB-DNA、IgG、IgM 及血沉检测的应用价值展开研究,具体内容报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取本院2019 年7 月～2020 年9 月收治的146 例肺部疾病患者,所有患者资料完整,经过相关及肿瘤标志物检查排除肿瘤,根据痰涂片、常规检查及临床诊断将患者分为菌阳肺结核组(50 例)、菌阴肺结核组(46 例)及肺部其他疾病组(50 例)。菌阳肺结核组男26 例、女24 例；年龄21～72 岁,平均年龄(46.28±9.10)岁；纳入标准：患者均有典型临床表现,并符合国际传染性肺结核诊断标准。菌阴肺结核组男26 例、女20 例；年龄22～73 岁,平均年龄(47.18±9.06)岁；纳入标准：其他非结核性肺部疾病及其他部位肺结核除外,胸部CT 显示存在活动性肺结核表现,支气管或肺部组织病理证实结核病变,同时符合《肺结核诊断与治疗指南》中有关活动性不排菌肺结核诊断标准。肺部其他疾病组男28 例、女22 例；年龄23～71 岁,平均年龄(47.59±8.36)岁；纳入标准：肺脓肿、慢性阻塞性肺疾病、大叶性肺炎患者等,所有患者均经过确诊并排除存在合并肺结核患者。三组患者一般资料比较差异无统计学意义(P＞0.05),具有可比性。见表1。本文研究通过伦理审核批准。

表1 三组患者一般资料比较(n,±s)

表1 三组患者一般资料比较(n,±s)

注：三组比较,P＞0.05

1.2 方法 三组患者均进行TB-DNA、IgG、IgM 及血沉检测。患者入院后均采取晨痰标本,采用抗酸染色镜检痰涂片,痰涂片阳性：每100 个视野抗酸杆菌＞3 个；以TB-DNA 法测定同份晨痰,患者同时行IgG、IgM 及血沉检测。菌阴判定标准［3］:支气管或肺部组织病理证实结核病变、痰或支气管肺泡灌洗液中未检出抗酸分枝杆菌均可判断确诊。

1.2.1 TB-DNA 检测 患者采取合格晨痰标本,用4%氢氧化钠溶液稀释液化痰液,混匀,静置30 min～1 h,使其充分液化,待无明显固状物且吸出时无拖丝现象,取液化后痰标本离心处理,用于基因扩增。应用实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)技术检测标本中TB-DNA。实验步骤及结果判读严格按照试剂盒上的说明书实施操作,同时做好室内质量控制。

1.2.2 IgG、IgM 检测 实行结核抗体胶体金IgG、IgM 检测,按常规法采集、分离、贮存静脉血清标本,按照各试剂盒说明书要求实施试验步骤,严格按产品操作说明书开展试验过程和判断相关结果。

1.2.3 血沉检测 采用魏氏(Westergren)法进行血沉检测,男性正常值0～10 mm/h,女性正常值0～15 mm/h,大于正常值为阳性,小于正常值为阴性［4］。

1.3 观察指标 比较三组TB-DNA、IgG、IgM、血沉的阳性检出率,TB-DNA、IgG、IgM、血沉单项检测及联合检测菌阴肺结核的敏感度。

1.4 统计学方法 采用SPSS22.0 统计学软件进行数据统计分析。计量资料以均数±标准差 (±s)表示,采用t检验；计数资料以率(%)表示,采用χ2检验。P＜0.05 表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 三组阳性检出率比较 菌阴肺结核组血沉、TB-DNA、IgG、IgM 阳性检出率均明显高于菌阳肺结核组和肺部其他疾病组,菌阳肺结核组血沉、TB-DNA、IgG、IgM 阳性检出率高于肺部其他疾病组,差异有统计学意义(P＜0.05)。见表2。

表2 三组阳性检出率比较［n(%)］

2.2 血沉、TB-DNA、IgG、IgM 单项检测与联合检测菌阴肺结核的敏感度比较 联合检测菌阴肺结核的敏感度显著高于血沉、TB-DNA、IgG、IgM 单项检测,差异有统计学意义(P＜0.05)。见表3。

表3 血沉、TB-DNA、IgG、IgM 单项检测与联合检测菌阴肺结核的敏感度比较(%)

3 讨论

结核病是一种慢性感染性疾病,是由机体接触感染结核分枝杆菌后引发,常见于青年群体,潜伏期为4～8 周,入侵肺部的结核菌感染超过80%被称为肺结核［5］。结核病中常见肺结核,引发肺结核的病原体为结核分枝杆菌,现阶段诊断结核分枝杆菌的主要手段包括免疫学诊断、分子生物学诊断、影像学诊断、细菌学诊断［6］。细菌学检查为检测传染源的主要手段,与此同时,也是确诊肺结核和制定化疗方案的主要依据［7］。但由于肺结核患者痰液呈间歇排菌或处于不合格的痰标本质量,会导致痰涂片或分枝杆菌呈阴性培养结果,以至于部分肺结核患者无法证实病理学［8］。诊断菌阴肺结核除依据胸部影像学检查和临床表现外,实验室的检测指标对诊断可发挥良好作用。对菌阴肺结核采取多种方法联合检测可提升阳性检出率［9］。

随着分子生物技术不断发展,且敏感度、特异度也较高,其快速进入结核病诊断领域。以往血沉在诊断结核病中可作为一种非特异性参考指标,在检查过程中简单易行,目前已经普遍应用于国内,但影响因素较多,从而引发假阳性或假阴性的几率很高［10］。TB-DNA 具有较高的检测敏感度,速度快,但仅能判断是否有结核杆菌,无法对潜伏性感染、死菌及活动性感染行良好鉴别。现阶段结核抗体IgG 主要选择使用纯化的结核菌细胞壁多糖,结核菌脂阿拉伯甘露糖(LAM)是最常用的［11］。患者在结核分枝杆菌感染早期以IgM 型结核抗体为体内主要的免疫球蛋白,中晚期主要为IgG 型。TB-DNA、IgG、IgM 及血沉联合检测可有效弥补单项检测的不足,提升检出率,发挥良好的检测效果［12］。本次研究结果显示,菌阴肺结核组血沉、TB-DNA、IgG、IgM 阳性检出率均明显高于菌阳肺结核组和肺部其他疾病组,菌阳肺结核组血沉、TB-DNA、IgG、IgM 阳性检出率高于肺部其他疾病组,差异有统计学意义(P＜0.05)。联合检测菌阴肺结核的敏感度显著高于血沉、TB-DNA、IgG、IgM 单项检测,差异有统计学意义(P＜0.05)。

综上所述,在菌阴肺结核诊断中应用TB-DNA、IgG、IgM 及血沉联合检测,有利于提升诊断率,增强特异性,为早期诊断菌阴肺结核提供有力依据。