CD14、HIF-1α、CX3CL1与儿童急性牙髓炎易感性关系及诊断价值

白冰 陈梅梅 黄海燕

急性牙髓炎（Acute pulpitis，AP）具有起病急骤、疼痛剧烈的特点，受乳牙纤维成分较小、血管分支较多、牙髓组织疏松等诸多因素影响，随病情迁延可引起进食与睡眠质量障碍，影响恒牙胚发育［1-2］。研究认为［3］，炎症介质蓄积于毛细血管中，导致牙髓组织坏死可能是AP 发生的重要原因。脂多糖信号受体（CD14）是单核细胞活化的标志，亦是一种重要促炎介质［4］；缺氧诱导因子-1α（hypoxia-inducible factor-1α，HIF-1α）主要在缺氧条件下表达，可诱发炎症，反映牙髓损伤程度［5］；趋化因子CX3C 的配体1（Chemokine C-X3-C motif ligand 1，CX3CL1）可能参与外周炎症及疼痛发生、发展过程中［6］，但三者联合对儿童AP 的诊断价值临床缺乏相关循证支持。本研究尝试探讨血清CD14、HIF-1α、CX3CL1 与儿童AP 易感性关系及诊断价值，旨在为临床诊治提供一种有效途径。详情如下。

1 资料和方法

1.1 一般资料

选取2018年1月至2020年12月本院收治的82 例儿童AP 患者（AP 组）及40 例健康儿童（对照组）。纳入标准：①AP 组均符合《口腔内科学》［7］中相关诊断标准，并存在阵发性痛、温度刺激痛、夜间痛、放散痛等临床表现；经口腔检查存在明显深龋；②对照组无上述典型疼痛症状，经口腔检查未发现明显深龋；③两组研究对象监护人均签署知情同意书。排除标准：①合并严重自身免疫系统疾病者；②髓底严重损坏者；③牙根吸收超出根长的1/2 者；④严重营养不良者；⑤伴有神经系统体征、躯体畸形等者。本实验经伦理委员会批准。

1.2 方法

①CD14、HIF-1α、CX3CL1 检测：于入院时空腹取外周静脉血4 mL，静置32 min 后2 500 rpm 离心10 min，取上清液，-70℃低温保存。采用上海江莱生物科技有限公司酶联免疫吸附法试剂盒测定血清CD14、HIF-1α、CX3CL1 水平。②疼痛程度：采用疼痛视觉模拟评分法（visual analogue scale，VAS）［8］进行评估，其中1～4 分为轻度疼痛，5～7 分为中度疼痛，8～10 分为重度疼痛。

1.3 统计学方法

采用统计学软件SPSS 22.0 处理数据，计量资料以（）描述、两组间比较用t检验；计数资料用n（%）表示、χ2检验；采用Logistic 多因素回归分析儿童AP 易感性的相关影响因素；采用Pearson 相关系数模型分析CD14、HIF-1α、CX3CL1 与VAS 评分相关性；采用受试者工作特征（Receiver operating characteristic curve，ROC）曲线得到曲线下面积（areas under the curve，AUC），检验CD14、HIF-1α、CX3CL1 对儿童AP 的诊断价值。P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组基线资料、CD14、HIF-1α、CX3CL1 比较

两组年龄、性别、体质量比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；AP 组CD14、HIF-1α、CX3CL1高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 两组基本资料比较［（±s），n（%）］Table 1 Comparison of baseline data between 2 groups［（±s），n（%）］

表1 两组基本资料比较［（±s），n（%）］Table 1 Comparison of baseline data between 2 groups［（±s），n（%）］

组别AP 组对照组t/χ2值P 值n 女82 40年龄（岁）10.18±1.53 10.35±1.17 1.166 0.246性别男45（54.88）24（60.00）0.287 0.592 37（45.12）16（40.00）CD14（mg/L）4.98±1.55 1.70±0.52 13.007＜0.001 HIF-1α（pg/mL）456.89±103.35 345.17±92.26 5.800＜0.001 CX3CL1（ng/L）52.15±17.18 24.35±7.73 9.748＜0.001

2.2 不同CD14、HIF-1α、CX3CL1 水平者VAS 评分比较

以AP 组CD14、HIF-1α、CX3CL1 均值为分界，将患者分为CD14、HIF-1α、CX3CL1 高水平与低水平者，结果显示，CD14、HIF-1α、CX3CL1 高水平者VAS 评分高于低水平者，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表2 不同CD14、HIF-1α、CX3CL1 水平者VAS 评分比较（±s）Table 2 Comparison of VAS scores in patients with different levels of CD14，HIF-1 α and cx3cl1（±s）

表2 不同CD14、HIF-1α、CX3CL1 水平者VAS 评分比较（±s）Table 2 Comparison of VAS scores in patients with different levels of CD14，HIF-1 α and cx3cl1（±s）

VAS 评分（分）t 值P 值CD14低水平（n=33）6.05±1.81 5.579＜0.001高水平（n=49）7.94±1.26 HIF-1α低水平（n=25）7.13±1.39 3.622 0.001高水平（n=57）8.14±1.05 CX3CL1低水平（n=21）6.56±1.27 6.000＜0.001高水平（n=61）8.32±1.12

2.3 CD14、HIF-1α、CX3CL1 与VAS 评分相关性

采用Pearson 进行相关性分析，结果分显示，CD14（r=0.769，P＜0.001）、HIF-1α（r=0.684，P＜0.001）、CX3CL1（r=0.709，P＜0.001）与VAS 评分呈正相关。见图1。

图1 CD14、HIF-1α、CX3CL1 与VAS 评分相关性Figure 1 CD14，HIF-1 α、Correlation between cx3cl1 and VAS score

2.4 儿童AP 易感性的相关影响因素

以是否发生AP 为因变量（0=无，1=有），纳入CD14、HIF-1α、CX3CL1 作为自变量（1=低水平，2=高水平），采用多因素Logistic 回归方程分析，结果显示，CD14、HIF-1α、CX3CL1 与儿童AP 的易感性相关（P＜0.05）。见表3。

表3 儿童AP 易感性的Logistic 回归方程分析Table 3 logistic regression equation analysis of AP susceptibility in children

2.5 CD14、HIF-1α、CX3CL1 的诊断价值

以AP 组为阳性样本，以对照组为阴性样本，绘制各指标诊断AP 的ROC 曲线显示，CD14、HIF-1α、CX3CL1 诊断儿童AP 的AUC 分别为0.860、0.757、0.805（P＜0.05）；应用SPSS 软件的联合应用ROC 理论模式，建立各指标联合诊断的ROC 模型，结果显示，CD14、HIF-1α、CX3CL1 联合诊断儿童AP 的AUC 为0.926（P＜0.05）。见表4、图2。

表4 ROC 分析结果Table 4 ROC analysis results

图2 CD14、HIF-1α、CX3CL1 的诊断价值Figure 2 CD14，HIF-1 α、Diagnostic value of cx3cl1

3 讨论

据报道［9］，细菌感染可能是牙髓病发生、发展的重要因素，而脂多糖是诱发牙髓组织感染的主要细菌毒力因子。CD14 是革兰阴性菌细胞壁主要致病成分脂多糖的结合受体，具有高亲和性，与脂多糖结合可刺激炎症级联反应，参与细胞损伤、炎症因子释放进程。本研究结果显示，血清CD14水平在AP 患儿中过度高表达，结合王晓敏等［10］研究考虑机制可能在于CD14 过度表达，可引起脂多糖对牙髓成纤维细胞的直接毒性，促使牙髓成纤维细胞大量释放肿瘤坏死因子-α、白细胞介素等炎性因子，从而导致AP 发生、发展。HIF-1α 是检测组织缺氧程度的重要指标，相关研究表明［11-12］，在炎症反应过程中，可作为重要炎症因子，在相关基因表达调控中起着重要作用。本研究中AP 患儿血清HIF-1α 水平显著升高，这可能归因于牙髓炎症可增加牙髓内压力，降低氧代谢，加重牙髓组织低氧情况，促进局部牙髓形成缺氧环境，从而刺激HIF-1α 表达，直接参与调控炎症微环境，最终形成恶性循环。CX3CL1 是一种CX3CL 趋化因子，主要存在于中枢神经系统小胶质细胞及周围神经巨噬细胞中，可诱导白细胞黏附，趋化B 细胞、T 细胞等，调控炎症进程［13］。本研究发现，AP 患儿血清CX3CL1 水平明显高于健康儿童，这可能是由于CX3CL1 表达升高利用T 细胞、嗜酸性粒细胞及单核细胞上表达受体，可促进肥大细胞活化，刺激白细胞介素等促炎因子释放，提高炎性介质含量，最终导致牙髓组织受损，引起AP。由此推测下调血清CD14、HIF-1α、CX3CL1 表达有望成为阻断儿童AP 发生、发展的潜在靶点。

另有学者指出［14-15］，牙髓内炎症细胞浸润、组织液渗出及组织破坏是造成AP 疼痛的主要因素。VAS 评分是目前广泛应用的评估机体疼痛程度的重要指标。本研究经Pearson 线性相关性分析结果推测血清CD14、HIF-1α、CX3CL1 有助于评估儿童AP 疼痛程度。进一步经Logistic 多因素回归分析，血清CD14、HIF-1α、CX3CL1 升高可能会上调儿童AP 的易感性，再次佐证了血清CD14、HIF-1α、CX3CL1 在儿童AP 诊断方面具有一定作用。本研究通过绘制联合ROC 曲线发现，血清CD14、HIF-1α、CX3CL1 联合诊断儿童AP 的AUC 值优于上述指标单一诊断，特异度可达97.50%。提示共同检测血清CD14、HIF-1α、CX3CL1 有望为临床儿童AP提供一种新的诊断手段，指导临床拟定个性化治疗方案。

综上所述，血清CD14、HIF-1α、CX3CL1 水平升高可能增加儿童AP 易感性，并与疼痛程度存在良好的线性关系，联合检测上述指标有助于提高儿童AP 诊断价值。但受年龄限制本研究纳入样本量较少，研究结果可能存在一定偏倚，今后需扩大样本量进一步深入分析。