云浮地区小细胞低色素性贫血儿童的病因分析

温日葵 江炎章

贫血是由多种原因引起外周血的血红蛋白(Hb)浓度、红细胞计数和血细胞压积(HCT)低于正常人参考值下限的一种症状；一般可分为正常细胞性贫血、小细胞低色素性贫血和大细胞性贫血。贫血在儿童期是常见病,可使儿童生长发育减慢甚至智力低下［1］。小细胞低色素性贫血是因为Hb、平均红细胞体积(MCV)、平均红细胞血红蛋白含量(MCH)以及平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)四项检测结果同时下降的一种疾病,其中分别以缺铁性贫血(IDA)和地中海贫血最为常见［2］。缺铁性贫血是由于体内缺乏铁元素或者是体内铁元素的利用障碍,从而导致人体内Hb 的生成不足而出现的贫血,根据相关研究提示［3］,我国儿童是缺铁性贫血的高发人群,因为儿童处于生长发育期,体内的新陈代谢快,在成长过程中所需的营养物质包括铁元素较成人的要多,所以缺铁性贫血在我国也是重要防治疾病之一。地中海贫血是一种遗传性疾病。其因是合成血红蛋白的珠蛋白链减少或缺失导致血红蛋白结构异常而导致的贫血［4］。为了解本地区小细胞低色素性贫血儿童的主要病因,为临床诊断和治疗提供科学准确的依据,作者选取2019 年1 月～2020 年10 月期间在本院进行体检的小细胞低色素性贫血儿童进行地中海贫血基因和铁蛋白联合检测,对检测结果分析如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2019 年1 月～2020 年10 月期间60例在本院进行体检诊断为小细胞低色素性贫血患儿,小细胞低色素症的临床诊断标准［5］：血常规检测平均红细胞体积<80 fl,平均红细胞血红蛋白含量<26 pg,平均红细胞血红蛋白浓度<320 g/L。

1.2 仪器 抽EDTA 抗凝血3 ml,采用血常规分析仪DxH800 检测血常规；于干燥管抽3 ml 静脉血,采用罗氏电化学发光免疫分析仪E411 检测铁蛋白；抽枸椽酸盐抗凝血3 ml,采用分子杂交仪检测地中海贫血基因标本。

1.4 检测原理

1.4.1 铁蛋白 电化学发光双抗体夹心法。

1.4.2 地中海贫血基因 PCR-反向点杂交法。根据α 链珠蛋白基因(α2和α1)突变区域序列特点,在序列保守区设计3 对高度特异的引物且5′端用生物素进行标记,用于检测3 种缺失型α-地中海贫血基因突变(-SEA、-α3.7 和-α4.2)；根据α 链珠蛋白基因(α2)突变区域序列特点,在序列保守区设计1 对高度特异的引物且5′端用生物素进行标记用于检测3 种非缺失型α-地中海贫血基因突变(αCSα、αQSα 和αWSα)；根据β 链珠蛋白基因基因突变区域序列特点,在序列保守区设计2 对高度特异的引物且5′端用生物素进行标记,用于检测17 种β-地中海贫血基因突变(41-42M、-28M、654M、71-72M、17M、βEM、IVS-I-1M、IVS-I-5M、27/28M、43M、-29M、-30M、31M、-32M、14-15M、IntM 和CAPM)。根据检测位点碱基差异,按照碱基互补配对原则,设计特异性识别某种基因型的寡核苷酸探针组合,分别固定在尼龙膜的特定位置上,制成检测膜条。聚合酶链式反应(PCR)扩增产物与探针通过分子杂交反应及显色反应,观察检测膜条上各位点信号的有无(信号为蓝色斑点),判断该探针是否与PCR 产物杂交,从而确定待检样品基因型。

1.5 观察指标 分析小细胞低色素性贫血患儿病因以及小细胞低色素性地中海贫血患儿基因型。

2 结果

2.1 60 例小细胞低色素性贫血患儿病因分析 60 例小细胞低色素性贫血患儿单纯地中海贫血有35 例,阳性率为58.3%,单纯缺铁性贫血有12 例,阳性率为20.0%,地中海贫血合并缺铁性贫血有9 例,阳性率为15.0%,其他类型有4 例,阳性率为6.7%。见表1。

表1 60 例小细胞低色素性贫血患儿病因分析(n,%)

2.2 44 例小细胞低色素性地中海贫血患儿基因型分析 44 例小细胞低色素性地中海贫血患儿(单纯地中海贫血35 例,地中海贫血合并缺铁性贫血9 例),其中主要基因型：α-地中海贫血有32 例,主要基因型为αα/--SEA,有26 例(59.1%)；β-地中海贫血有12 例,主要基因型为41-42M/N,有5 例(11.4%)。见表2。

表2 44 例小细胞低色素性地中海贫血患儿基因型分析(n,%)

3 讨论

缺铁性贫血和地中海贫血的血常规结果常常相似,两者都为小细胞低色素贫血,且临床上患儿较为多见。地中海贫血又名海洋性贫血,因为最初发患者多为地中海沿岸民族的原因。本病是因为遗传的珠蛋白基因缺失,使血红蛋白中一种或一种以上珠蛋白链合成缺如或不足所导致的贫血。临床上常见分为α-地中海贫血和β-地中海贫血,其中α-地中海贫血可分为轻型α-地中海贫血：又包括静止型和标准型,静止型仅有轻度α 链合成减少,α/β 链合成比约为0.9,一般无临床症状；标准型有轻度贫血或红细胞形态异常,α/β 链合成比约为0.6。中间型α-地中海贫血又称为血红蛋白H 病,因为缺失3 个α 基因,临床上表现为轻度或中度贫血,伴有肝脾肿大、黄疸。重型α-地贫又称为胎儿水肿综合征,因为缺失4 个α 基因,无α 链合成,胎儿容易造成死胎或流产。β-地贫也可分轻型β 地贫,β 链与α 链比率为0.5,一般其他临床无临床症状和贫血；重型β 地贫的β 与α 两链比率为0～0.3,一般有贫血、黄疸、肝脾肿大等临床症状,患儿易发生感染和出血,常常会合并发生心肌炎、胆结石、下肢溃疡性损害,容易夭折；中间型β 地贫严重程度介于轻型和重型之间［6-8］。地贫是人类单基因遗传病发病率最高的其中一种,夫妻双方如果都是轻型地中海贫血患者,都可能生出中型或重型的地中海贫血患儿［9］。根据相关研究所示,我国α 地中海贫血者的基因型普遍以--SEA、-α3.7 和-α4.2 位点缺失多见［10］。孕妇如果怀有重型地贫胎儿,很可能会发生胎儿死于宫内,或早产或流产［8］,重型地中海贫血患儿需终生输血,中间型地贫患者多无劳动力或劳动力下降［11］,所以减少中、重型地中海贫血患儿的出生会减轻家庭的不少负担。

缺铁性贫血是体内一种慢性渐进性缺铁的发展结果。缺铁性贫血早期一般为正常细胞性贫血,表现为轻度贫血,随着病程的进展,体内贮存铁慢慢消耗殆尽,红细胞和血红蛋白会进一步下降,出现明显的小细胞低色素性贫血,呈典型的缺铁性贫血［12］。缺铁性贫血临床症状表现为部分患者可出现异食癖,患儿会出现生长发育迟缓、易激动、注意力不集中、智力低下［13］,指甲缺乏光泽、脆薄、易裂,出现口腔炎和舌炎,还有少部分患者会有轻度的脾肿大。从上述的缺铁性贫血症状和危害可知,缺铁性贫血的防治在儿童中也不容轻视。

本研究显示,本地区小细胞低色素性贫血儿童其中单纯地中海贫血基因携带率为58.0%,以α 地中海贫血为主,其中以αα/--SEA 基因型为主；单纯缺铁性贫血占20%,地中海贫血合并缺铁性贫血占15.0%,可见缺铁性贫血的儿童比例也不低。地中海贫血在我国广东(地中海贫血阳性率11.07%)、广西、四川多见［14］,且云浮处于广东省经济欠发达地区,有很大部分人们的生活质量和意识不高,儿童期的小细胞低色素性贫血情况不被重视,会对儿童的成长造成不可逆的伤害,因此营养性贫血如缺铁性贫血等也不容忽视［15］。地中海贫血患者体内红细胞的生存期比正常人红细胞要短,在患者体内呈慢性溶血状态,地贫患者体内铁元素含量是超标的,需要进行排铁的治疗,以前的旧观点认为,体查地中海贫血基因确诊是地中海贫血患者后,一般都不做铁蛋白的检查,认为该患者不会缺铁的。其实结果不然,因为很多儿童生长快,所需的营养物质多,还因为有不少儿童会偏食,营养不均衡,同样会导致缺铁的。

综上所述,小细胞低色素性贫血会对患儿的生长发育和生活学习造成这么多的危害,通过地中海贫血基因和铁蛋白的同时检测,帮助临床找出小细胞低色素性贫血儿童的正确病因,对症治疗,让祖国的花朵有一个健康快乐的童年。