鼻咽部黏膜细胞FH检测联合EB-DNA、CEA在鼻咽癌早期诊断中的价值研究

高海彦 杨海宁 张会玲 王发治

甘肃省武威市凉州医院 733000

鼻咽癌是耳鼻喉科疾病中一种常见的恶性肿瘤，好发于鼻咽腔顶部和侧壁，在东南亚、华南地区常见[1-2]。鼻咽癌的发病率在头颈部肿瘤中居于首位[3]，严重危害人类身体健康。鼻咽癌患者早期症状不明显，不易与其他疾病区分开，加之生理解剖位置又比较隐蔽，一般体格检查难以发现，给临床诊治工作带来不少困扰。另外，鼻咽癌的局部复发率和远处转移率高，而总存活率很低[4]。因此，早发现早治疗是改善鼻咽癌预后的关键环节，寻求有实际意义的高敏感性检测方法对鼻咽癌患者提高生存率至关重要[5]。在本次研究中，对108例鼻咽癌患者、80例良性病变患者、80例健康体检者进行FH检测以及血浆EB-DNA、CEA的检测，为临床医师对鼻咽癌的早期诊断提供依据。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 采用回顾性方法，选取本院耳鼻喉科2018年6月—2020年6月收治的鼻咽癌患者108例作为A组，良性病变组80例作为B组。所有患者均以手术后病理活检为金标准进行分组。同期选取选取体检中心80例健康体检者作为C组。其中A组年龄25～66岁，平均年龄(44.26±13.86岁)；B组年龄26～64岁，平均年龄(45.26±14.23岁)；C组年龄24～64岁，平均年龄(44.13±13.62岁)。排除标准：合并其他恶性肿瘤、免疫系统或血液系统疾病。三组研究对象的性别、年龄等一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05)。所有入组患者均知情同意，本研究经医院伦理委员会批准备案。

1.2 检测方法 三组受试者禁食10h以上于第二天早晨8点空腹采集静脉血各两管：EDTA-K2抗凝2ml及无抗凝剂3ml。3 000r/min离心10min，取上清液进行检测。采用中山大学达安基因股份有限公司实时荧光定量PCR仪检测EB病毒DNA；采用德国贝克曼公司DXI-800全自动化学发光分析仪检测CEA。所有检测试剂均采用仪器配套试剂，所有检测项目室内质控、室间质评均在控。同时，对所有入组患者采用鼻咽部黏膜渗液采样器，从鼻咽部位缓慢插入，左右旋转180°，按照鼻咽后壁、咽鼓管咽口及圆枕、咽隐窝的顺序进行缓慢擦拭，采集鼻咽部黏膜渗液，并充分蘸取，将取样器放入试剂内搅动，使其充分混匀，静置10min后检验。

1.3 判断标准 所有检测项目的阳性标准均参考试剂盒说明书。EB病毒DNA检测曲线呈典型的S型曲线且含量>1×103copies/ml时判定EB-DNA为阳性。CEA>5μg/L可判断为阳性。FH检测显示蓝色、绿色、蓝绿色为阳性，不变色为阴性。联合检测中出现一项阳性即可判断为阳性。

2 结果

2.1 三组患者血浆EB-DNA、CEA检测比较 三组患者中A组患者的血浆EB-DNA、CEA检测值显著高于B组、C组，B组EB-DNA、CEA明显高于C组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 三组患者的EB-DNA、CEA-检测平均值比较

2.2 A、B组患者鼻咽部FH检测以及血浆EB-DNA、CEA的阳性率比较 A组的鼻咽部黏膜细胞稳定性FH检测、EB-DNA、CEA检测阳性率明显高于B组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 A、B组患者鼻咽部FH检测以及血浆EB-DNA、CEA的阳性率比较(%)

2.3 鼻咽癌组患者各项联合检测的诊断效能比较 鼻咽癌组的FH检测联合血浆EB-DNA、CEA三项检测的灵敏度、特异度、准确度、阳性预测值、阴性预测值、约登指数分别为92.60%，91.25%，92.02%，93.46%，90.12%，83.85%，三项联合检测的诊断效能均有很大程度提高。见表3。

表3 鼻咽癌组的EB病毒DNA、CEA、SF各项联合检测效能的比较(%)

3 讨论

鼻咽癌是头颈部的恶性肿瘤之一，转移性和侵袭性都比较高，我国南方地区的发病率可以达到20～30/10万[6]。鼻咽部肿瘤多在深部位置，不易发现，早期可能无症状或症状不明显，容易误诊、漏诊，错过最佳诊断时间。手术有时无法完全切除原发病灶，因此转移复发是鼻咽癌患者治疗失败最主要的原因[7]。临床上早发现早治疗是提高鼻咽癌患者生存率及预后的关键。

有研究表明[8]，EB病毒感染、食物以及遗传是造成鼻咽癌发病地域不同的主要原因。EB病毒的检测已经发展成为鼻咽癌早期诊断的主要实验室指标之一。EB病毒是Epstein和Barr在1964年研究非洲儿童Burkitt淋巴瘤时发现的一种病毒，是传染性单核细胞增多症的病原体，与鼻咽癌密切相关。随着分子诊断技术的飞速发展，EB-DNA已逐渐成为检测鼻咽癌的早期诊断指标，具有敏感性高、特异性好的优点[9]。EB病毒的DNA一般采用实时荧光定量PCR检测技术，能准确测定病毒的拷贝数，真实反映机体病毒的感染情况。EB病毒具有明显的潜在癌基因，在一定的条件刺激下可从潜在状态转化为增殖状态，在鼻咽癌肿瘤细胞中高度表达，且在早期阶段有一定传染作用[10]。因此对于鼻咽癌的早期诊断作用巨大。

CEA是一种酸性糖蛋白，具有人类胚胎抗原特性，可引起患者的免疫反应。它是一种广谱的肿瘤标志物，在很多肿瘤细胞中均可表达，在大肠癌、结肠癌、卵巢癌、乳腺癌等中均有表达，针对某种肿瘤单独检测特异度、灵敏度不高。在肿瘤的鉴别诊断中一般和其他肿瘤标志物联合检测以提高灵敏度和特异度。在本研究中，CEA在鼻咽癌中也有一定程度的表达，这与何平[11]的报道一致。

鼻咽部黏膜细胞FH物质一般是以结合的形式存在于上皮细胞蛋白中。当一些致病因子出现以后会导致细胞稳定性失调、蛋白质的结构发生改变，FH物质从细胞的蛋白质中脱落下来，上皮细胞内FH物质含量也因此增加。基于鼻咽部黏膜细胞稳定性FH检测可以提示鼻咽部细胞恶变的程度，是具有临床疾病标志意义的亚细胞分子[12]。

临床上针对鼻咽癌的单一检测价值并不高，每一种肿瘤标志物均存在不同程度的缺陷。联合检测对提高鼻咽癌的早期诊断水平十分重要[13]。本研究中，鼻咽部黏膜细胞FH检测联合血浆EB-DNA、CEA检测在鼻咽癌的早期诊断中具有较高的诊断效能，联合检测的指标可达到灵敏度92.60%、特异度91.25%、准确度92.02%、阳性预测值93.46%、阴性预测值90.12%、约登指数83.85%，这与邱烨等[14]的报道一致。但本次研究样本量较小，观察时间较短，尚需要加大样本量进行更深层次研究。