气相色谱法中内标法和外标法检测甲醇的对比分析

陆溶艳 陈伟洁 陀扬阳 莫志斌

（中华人民共和国梧州海关 广西梧州 543002）

1 前言

现如今市售酒的种类越来越多，酒类的质量安全关系到消费者的健康。甲醇是酒类检测中的一项重要指标，因此，国家对其含量有严格规定[2]，甲醇的检测方法有很多，例如气相色谱法顶空测定、内标法或外标法测定，其中毛细管柱气相色谱法因其快速、高效的特点被广泛应用于白酒样品成分的检测中[3]，本文主要对内标法和外标法测定甲醇的方法进行分析，通过对这2种方法的浓度范围及精密度、准确度（回收率实验）进行研究来进行评价[4]。

2 实验原理

蒸馏去除发酵酒中的不挥发性物质，加入内标（酒精、蒸馏酒及其配制酒直接加入内标），经气相色谱法分离、氢火焰离子化检测器检测，以保证保留时间定性，外标法定量[1]。

3 实验过程

3.1 仪器与试剂

安捷伦GC9000气相色谱仪（美国安捷伦公司）；G4513A自动进样器；安捷伦超高惰性衬管（5190—3165）；FPD检测器；甲醇：TEDIA，99.8%；叔戊醇：麦克林，99.0%；乙醇：色谱纯。

3.2 标准曲线及样品的制备

3.2.1内标法

标准曲线的制备：分别吸取0.5、1.0、2.0、4.0、5.0 mL甲醇标准储备液（5 038.9 mg/L）于5个25 mL容量瓶中，用乙醇溶液定容至刻度，依次配制成甲醇含量为100.8、201.6、403.2、806.4、1008.0 mg/L；标曲与样品分别取10.0 mL于试管中，加入0.10 mL叔戊醇标准溶液，混匀，备用。

3.2.2外标法

标准曲线的制备：分别吸取0.5、1.0、2.0、4.0、5.0mL甲醇标准储备液（5 038.9 mg/L）于5个25 mL容量瓶中，用乙醇溶液定容至刻度，依次配制成甲醇含量为100.8、201.6、403.2、806.4、1008.0 mg/L；标曲与样品直接取样进样。

3.3 仪器条件

详见表1。

表1 仪器条件

4 实验结果与分析

本次实验分别用内标法和外标法进行精密度与加标回收率的比较，精密度进行6次平行测定，对不同浓度加标回收，对其进行计算平均值、标准偏差（S）和相对标准偏差（RSD），具体结果见表2、表3。

4.1 图谱

见图1。

图1

4.2 标准曲线（甲醇标准储备液：5 038.9 mg/L），见图2。

图2

内标法：线性方程：Y=41.0068X+0.0061；

线性范围：100.8～1 008 mg/L；

相关系数：0.99994

外标法：线性方程：Y=0.1528X+0.6281；

线性范围：100.8～1 008 mg/L；

相关系数：0.99992

4.3 精密度实验结果

结果详见表2。

表2 内标法与外标法测实际样品精密度结果

甲醇保留时间：4.076 min；叔戊醇保留时间：5.848 min；甲醇保留时间：4.078 min。

4.4 加标回收实验结果

4.4.1内标法

分别吸取已配制的5038.9mg/L甲醇溶液0.25、0.50、1.0、1.5、1.7 mL于10 mL容量瓶中，用样品定容至刻度，再加入0.10 mL叔戊醇标准溶液，混匀，进样。

4.4.2外标法

分别吸取已配制的5038.9 mg/L甲醇溶液0.25、0.50、1.0、1.5、1.7 mL于10 mL容量瓶中，用样品定容至刻度，混匀，进样；结果详见表3。

表3 内标法与外标法加标回收率结果

5 结果讨论

测试结果表明内标法和外标法测定酒中甲醇的精密度结果相对标准偏差（RSD）值分别为0.16%、0.23%，符合GB 5009.266-2016食品中甲醇的测定在重复测定条件下获得的2次独立测定结果的绝对差值不超过其算术平均值±10%[1]的要求。其中用内标法测定不同浓度范围的回收率的结果分别为118.45%、107.86%、103.00%、102.79%、101.63%，平均回收率为106.7%，标准偏差为6.97%，相对标准偏差为6.53%；而用外标法测定不同浓度范围的回收率的结果分别为110.95%、95.04%、102.13%、101.58%、101.53%，平均回收率为102.2%，标准偏差为5.67%，相对标准偏差为5.55%；总体来看内标法与外标法回收率结果相差不大。

6 结论

通过比较这2种方法测定结果可以看出，外标法与内标法对于定性定量数值相差不大，这2种方法对检测样品的结果的重现性也很好，这2种方法对低浓度加标回收率较差，而中高浓度加标回收率较好，但外标法操作更简单，误差相对较少，这2种方法均值得推荐使用。