酶联免疫吸附试验和电化学发光免疫法检测孕妇乙型肝炎表面抗原结果的比较

费静

（沈阳市妇幼保健院检验科 辽宁沈阳 110000）

1 前言

乙型肝炎表面抗原是诊断乙型肝炎主要标志物，也是评估乙型肝炎治疗效果、预后质量的重要指标[1]。当前我国乙肝表面抗原总携带率约为7.18%，其携带率呈逐年增加趋势[2]。乙型肝炎病毒主要是经血液、母婴垂直、性行为等方式进行传播，但仅根据病灶定性检测，检测率较低，无法为临床治疗提供依据[3]。另外母婴传播是乙型肝炎的主要途径，准确判断乙型肝炎感染，直接影响到新生儿是否需要接受乙肝疫苗免疫接种[4]。因此提高乙型肝炎表面抗原结果的筛查率，降低乙肝病毒感染风险十分必要。酶联免疫吸附试验和电化学发光免疫法是目前筛查乙型肝炎病毒的主要方法，临床检测低浓度标本，影响因素多，需要选择一种诊断效能高的检测方法。现本研究比较两种不同检测方法对孕妇乙型肝炎表面抗原结果的检出效果，报道如下。

2 资料与方法

2.1 临床资料

选取在2018年5月—2020年5月期间于我院产前健康保健3600例活产儿分娩孕妇，收集孕妇人口学特征，年龄20～36岁，平均（28.68±2.91）岁；孕周36～41周，平均（38.34±0.51）周。纳入标准：入组孕妇均在我院分娩；活产儿；孕妇及家属知情研究，签署同意书。排除标准：伴全身感染、凝血机制异常；拒绝参与此次研究者；临床资料不完整者。该研究符合本院医学伦理委员会审批标准，且审核通过。

2.2 检查方法

所有孕妇于入院第2天知情同意，采集外周静脉血5 mL，室温静置60 min，4 000r/min，离心15 min，吸取足量上清液，分别置入A、B灭菌管，置入-80℃保存备检。安图多功能酶标仪及配套试剂，乙型肝炎病毒表面抗体试剂盒（上海科华生物技术有限公司），cobas6000电化学发光仪及配套试剂（德国罗氏公司）。酶联免疫吸附法测定血标本，按照说明书操作，以酶标仪读取吸光度，检测乙型肝炎病毒HBsAg、HBsAb、HBeAb、HBeAg、HBcAb五项标志物，计算临界值，阳性：临界值>1；阴性：临界值≤1。电化学发光免疫法测定血标本，按照说明书操作，采用双抗体夹心法测定乙型肝炎病毒抗原，阳性：临界值<1；阴性：≥1。

2.3 观察指标

（1）比较酶联免疫吸附试验和电化学发光免疫法对乙型肝炎表面抗原阳性率检出率；

（2）比较2种检测方法的诊断敏感性、特异性及准确性。

2.4 统计学方法

SPSS23.0统计学软件。计数资料经百分比率（%）表示，采取χ2检验；P<0.05为差异有统计学意义。

3 结果

3.1 比较酶联免疫吸附试验和电化学发光免疫法对乙型肝炎表面抗原阳性率检出率

酶联免疫吸附法检测乙型肝炎表面抗原阳性率1.36%，与电化学发光免疫法阳性率1.31%相比，差异无统计学意义（P>0.05），见表1。

表1 比较酶联免疫吸附法和电化学发光免疫法对乙型肝炎表面抗原阳性率[n（%）]

3.2 比较2种检测方法阳性检出一致率

2种检测方法阳性检出一致率为96.88%，一致率高，见表2。

表2 比较2种检测方法阳性检出一致率

3.3 比较2种检测方法的诊断敏感性、特异性及准确性

2种检测方法结合检出阳性例数48例，阳性率1.33%；酶联免疫吸附法检测乙型肝炎表面抗原的诊断敏感性97.92%、特异性99.94%、准确性99.92%；电化学发光免疫法诊断敏感性93.75%、特异性99.94%、准确性99.86%；差异无统计学意义（P>0.05），见表3。

表3 酶联免疫吸附法诊断敏感性、特异性及准确性

表4 电化学发光免疫法诊断敏感性、特异性及准确性

4 讨论

乙型肝炎是社会公共卫生中的常见问题，母婴传播是乙型肝炎病毒感染的主要途径。因此必须准确筛查乙型肝炎病毒，做好感染干预策略，使新生儿及时接受乙型肝炎疫苗的免疫治疗，确保胎儿安全。酶联免疫吸附法是检测乙型肝炎表面抗原的主要试剂分析方法，尤其是医疗水平的发展，各种试剂盒应用日渐广泛，并拓宽了各种检测试剂盒的应用范围[5]。但血清同时存在HBsAg、HBsAb阳性时，容易造成ABsAb漏检。可能是血清内HBsAg颗粒会包裹ABsAb，无法充分暴露ABsAb，难以结合该试剂盒的固相载体表面的抗原，使ABsAb浓度降低，检测率下降[6]；酶联免疫吸附法测定ABsAb时，采用基因重组乙肝表面抗原，与天然血源性表面抗原不同，会相应降低其结合能力，使阳性检出率下降[7]。随着诸多检验技术的发展，电化学发光免疫法是一种新型检测技术，敏感度、准确度高、特异性明显、具有微定量及自动化诊断技术。该检测技术结合了电化学发光技术及免疫测定技术，重复性高，其标准差及均值比例低于5.0%，对同一样本进行重复检测，减少干扰因素对检测结果的影响[8]；同时可以利用全自动检测仪器自主完成乙型肝炎表面抗原的检测，检测效率明显提高[9]。

本组研究中，酶联免疫吸附法检测乙型肝炎表面抗原阳性率1.36%，电化学发光免疫法阳性率1.31%，酶联免疫吸附法诊断敏感性97.92%、特异性99.94%、准确性99.92%；电化学发光免疫法诊断敏感性93.75%、特异性99.94%、准确性99.86%；差异无统计学意义（P>0.05）。其结果与张叶锋等[10]研究相一致，酶联免疫检测敏感度0.97、特异度0.99、准确度0.98，较电化学发光免疫法检测敏感度0.98、0.99、0.99，2种方法比较（P>0.05）。结果表明，2种检测方法对乙型肝炎表面抗原均有较高的检测价值，而且2种检测方法阳性检出一致率为96.88%，一致率高。因此在孕妇乙型肝炎表面抗原阳性筛查时，电化学发光免疫法均能在孕期阳性抗原筛查中获得理想效果，且定量检测技术不受黄疸、脂质、溶血、抗病毒等药物的影响；酶联免疫吸附法能够筛查较低浓度的HBeAg；因此2种检测技术存在相应的假阳性反应，现有的酶联免疫吸附法的敏感度、准确度存在一定局限，需进一步对检测技术进行改进。

综上所述，酶联免疫吸附试验和电化学发光免疫法对孕妇乙型肝炎表面抗原标志物的检出率高，必要时应当优化检测程序，相互联合，提高其检出率。一般有条件的实验室，先采用酶联免疫吸附法对乙型肝炎病毒进行初次筛查，再采用电化学发光免疫法对部分项目进行重新筛查，以此提高检验结果的准确性。