免疫荧光法在微生物快速检验中的应用研究

刘占刚

聊城临清市人民医院,山东 聊城 252600

免疫荧光技术是指应用将抗原和抗体相结合的生物反应与形态学相结合的原理,把血清学特异性、荧光色素的敏感性和显微镜检查法融为一体。在采用这种检测方法中有检测速度快优点，同时还有灵敏度高和特异性强的优点，可以应用在医疗的诊断中。特别是在目前的上呼吸道感染病毒检测，该种感染是由多种病毒感染引起，为了帮助患者采用针对性治疗方法，需要使用准确的诊断手段。而采用免疫荧光法诊断，可以实现对多种类病毒诊断，以此来确定患者病症感染的来源。基于此，本组研究上呼吸道感染患者中采用免疫荧光法检测，观察免疫荧光法检测效果[1]。

1 一般资料与方法

1.1一般资料 将我院在2019年1月--2019年12月收治的220例上呼吸道感染患者作为观察对象，患者总共病毒感染有193例，其中男性患者124例，女94例，平均年龄在49.93±7.15岁。患者病症类型中，咽部感染患者有119例，鼻部感染患者101例。

1.2研究方法

1.2.1检测试剂 在本次检测中总共使用了5种检测试剂，其中有流感病毒A检测试剂，流感病毒B检测试剂；副流感病毒检测试剂；还有两种检测试剂分别是合胞病毒检测试剂与腺病毒检测试剂[2]。

1.2.2检测方法 样本的收集和处理：

(1)用吸附剂1:10稀释患者样本,离心5分钟(2000rpm，室温)。(2)将加样板放在泡沫板上，按顺序分别滴加30μl稀释后血清至加样板的每一反应区，避免产生气泡。(3)将载片覆有生物薄片的一面朝下，盖在加样板的凹槽里，反应立即开始。确保每一样品均与生物薄片接触且样品间互不接触。室温(18-25°C)温育30分钟。(4)用烧杯盛PBS吐温缓冲液流水冲洗载片，然后立即将其浸入装有PBS吐温缓冲液的洗杯中浸泡至少5分钟。(5)滴加25μl FITC标记的抗人球蛋白(荧光二抗)至洁净加样板的反应区，完全加完所有的荧光二抗方可进行下一步室温(18-25°C)温育30分钟。(6)用烧杯盛PBS吐温缓冲液流水冲洗载片，然后立即将其浸入装有PBS吐温缓冲液的洗杯中浸洗至少5分钟。(7)将盖玻片直接放在泡沫板的凹槽里。滴加甘油/PBS至盖玻片：每一反应区约10μl。从PBS吐温缓冲液中取出一张载片，用吸水纸擦干背面和边缘的水分，注意不要擦拭反应区间隙。将载片覆有生物薄片的一面朝下放在已准备好的盖玻片上，立即查看并轻轻调整使盖玻片嵌入到载片的凹槽里。

结果判读：

显微镜下观察荧光模型。观察感染细胞用20×物镜，观察细胞基质用40×物镜。

激发滤片：488nm，分光滤镜：510nm，阻挡滤镜：520nm。光源：100W汞灯。

2 结 果

对220例上呼吸道患者检查中，病毒性感染阳性患者193例，感染率为87.72%；其中流感病毒感染率最高，感染率为37.30%，其次是腺病毒，感染率为26.94%，再次是副流感病毒，感染率为21.76%，最后是合胞病毒，感染率为13.98%。

表1 对193例上呼吸道感染病毒种类统计

3 讨 论

随着人们的生活环境改变，容易导致上呼吸道感染病症的发生。上呼吸道感染病症发生后，如果为细菌性感染，或者是病毒性感染，这些感染都会有一定的传播性，引起大面积群体性病症。对于上呼吸道感染病症传染控制中，需要对患者病症原因进行诊断，并且采用针对性方法避免，以此来减少传播性。在目前的上呼吸道感染病症诊断中，主要使用免疫荧光检测方法，该种方法其诊断准确率高，可以实现对诊断后，采用不同方法治疗病毒感染引起的上呼吸道病症。而且随着免疫荧光检测方法的不断应用，临床上检测人员需要不断研究该种方法，使其更好的在检测临床上使用，以此来提高临床检查效果[3]。

在本组研究中，采用免疫荧光法检测上呼吸道病毒感染患者，对220例上呼吸道患者检查中，病毒性感染阳性患者193例，感染率为87.72%；其中流感病毒感染率最高，感染率为37.30%，其次是腺病毒，感染率为26.94%，再次是副流感病毒，感染率为21.76%，最后是合胞病毒，感染率为13.98%。从上述的数据中分析采用免疫荧光检测方法，可以对上呼吸道感染多种病毒进行有效检测，以便对病毒性感染的种类进行区分。在采用免疫荧光检测上呼吸道感染病症中，不仅仅有着检测正确率高的优点。该种检查方法还有着操作简单优点，基本上可以在基层医院开展检查，只需要对操作人员进行简单的培训，就可以开展检测工作。同时采用免疫荧光检测方法，还有检测费用低廉优点，可以在临床上普遍使用。最后是免疫荧光检测方法的速度快，一般开展检查工作有两个小时能够完成确诊，减少患者等待确诊时间，也减少患者对病症的影响，提高上呼吸道感染患者治疗效果。

综上所述，在上呼吸道感染诊断中，由于免疫荧光检测方法应用多年，有着成熟的技术，并且在临床上使用证明，该种检查正确率高，操作简单和诊断速度快，可以在上呼吸道感染病症检测中应用免疫荧光法，以此来提高检测效果。