NQO1基因C609T多态性和食管癌易感性关系的Meta分析

张向超，李小珍

食管癌(esophageal cancer，EC)是我国发生率较高的消化系统恶性肿瘤之一，其发病率和死亡率分居第六位和第四位[1]。EC的发生是一个复杂的、多因素的过程，其发生可能与环境、饮食、吸烟、遗传等因素有关，但具体病因仍不清楚[2]。醌氧化还原酶1(quinone oxidoreductase 1,NQO1)是一种黄素酶，可以充当辅酶Q的还原酶，催化醌双电子还原反应，防止细胞膜被氧自由基破坏，具有较强的抗氧化作用[3]。NQO1作为重要的化学致癌物代谢酶与食管癌、乳腺癌、肺癌、膀胱癌和前列腺癌等肿瘤的发生密切相关[4-6]，这可能与NQO1活力降低有关，而NQO1基因C609T多态性可以导致其编码蛋白质上第187位脯氨酸/丝氨酸的转变，从而使其活性下降或消失，进而导致相关肿瘤的发生。故本研究对NQO1基因C609T(rs1800566，Pro187Ser)多态性与EC发生易感性关系的相关文献进行Meta分析，探讨两者之间的关系，为下一步研究方向或临床决策提供科学依据。

1 资料与方法

1.1 文献检索途经和策略由两位检索人员独立检索NQO1基因C609T多态性与EC发生风险关系的相关文献，检索的期刊数据库为中国知网、万方数据库、维普资讯、PubMed和Medline。其中中文主题词或关键词为：醌氧化还原酶或NQO、基因、多态性、食管癌。英文主题词或关键词为：quinone oxidoreductase or NQO，gene，polymorphism or variant，esophageal cancer。检索日期自建库至2021年1月25日，检索语种为中文和英文。

1.2 文献纳入标准①病例-对照研究；②病例组食管癌诊断明确；③病例组和对照组的各基因型数据能够有效的计算OR和95%CI；④对照组的基因型分布满足Hardy-weinberg平衡(Hardy-Weinberg equilibrium, HWE)；⑤以纽卡斯尔-渥太华量表(Newcastle-Ottawa Scale，NOS)评价文献，文献质量评分需≥5分。

1.3 统计学方法通过OR值和95%CI评价NQO1基因C609T多态性与EC发生风险关系的关联强度，共包括5种基因型模型：纯合子模型(TT VS CC)、杂合子模型(CT VS CC)、显性模型(TT+CT VS CC)、隐性模型(TT VS CT+CC)和直接比较基因频率(T VS C)。数据的合并采用Review Manager 5.3软件进行，对照组HWE的评估采用χ2检验，异质性的评估采用Q检验。其中，检验水准α=0.05，若P≥0.05，表示对照组的基因分布符合HWE，采用固定效应模型合并数据，否则，表示对照组的基因分布不符合HWE，采用随机效应模型合并数据。应用漏斗图评估发表性偏倚。

2 结果

2.1 纳入文献的基本情况经过文献检索，去除重复文献后共检索到17篇文献(具体情况见图1、表1)，其中有2篇文献对照组的基因型分布不符合HWE，将其剔除，最终纳入研究的文献共15篇，包括16个病例-对照研究，其中EC患者3 186例，对照组4 075例。

图1 文献检索流程图

2.2 Meta分析结果根据异质性检验结果选择不同的效应模型合并OR值，Meta分析结果显示，在整体人群中，NQO1基因C609T纯合子模型(TT VS CC)、显性模型(TT+CT VS CC)和等位基因模型(T VS C)与EC有关，其他模型与EC均无关。根据地域人种的不同进行亚组分析，结果显示，在亚洲人群中NQO1基因C609T纯合子模型(TT VS CC)、杂合子模型(CT VS CC)、显性模型(TT+CT VS CC)和等位基因模型(T VS C)与EC有关，而隐性模型(TT VS CT+CC)与EC无关；在高加索人群中NQO1基因C609T各基因模型与EC均无关。具体结果见表2。

表2 NQO1基因C609T各基因模型的异质性检验结果及Meta分析结果

CI：confidence interval；df：degrees of freedom；M-H：Mantel-Haenszel method。

2.3 发表性偏倚与敏感度分析漏斗图中各点分布基本对称(见图3)，说明无明显的发表性偏倚。在敏感度分析过程，依次剔除每一组病例-对照研究后重新合并OR值，各模型剔除前后的结果并不一致，说明目前所得结果并不稳定。

OR：odds ratio；SE：standard error。

3 讨论

NQO1又称为D-硫辛酰胺脱氢酶，其基因位于人类染色体16q22.1上，共包括6个外显子和5个内含子[24]。在NQO1基因中发现了多种多态性，如C465T、G406C和C609T，其中NQO1基因C609T位于第六外显子，等位基因C/T的转变可以导致蛋白质序列中第187位氨基酸由脯氨酸变为丝氨酸，其中由CC纯合基因型编码的NQO1蛋白质具有完整的酶促活性，由TT基因型编码的蛋白质活性消失，由CT杂合子基因型编码的蛋白质活性降低。NQO1蛋白质是一种多功能的抗氧化剂，在细胞的抗氧化应激中起到重要的保护作用，而NQO1蛋白质活性的降低可能与肿瘤的发生有关[25-26]。既往已有很多关于NQO1基因C609T多态性与EC发病相关性的研究，但是各研究间的结果并不一致。因此，通过研究NQO1基因C609T各基因模型与EC之间的关系，为将来进行有效的EC防治提供重要的理论基础，进而降低EC的发生率。

本Meta分析共包括16个病例-对照研究，其中EC患者3 186例，对照组4 075例。Meta分析结果显示：在总体人群，NQO1基因C609T纯合子模型(TT VS CC)、显性模型(TT+CT VS CC)和等位基因模型(T VS C)与EC易感性有关；亚组分析显示，在亚洲人群，除了隐性模型(TT VS CT+CC)外，NQO1基因C609T其余各模型均与EC有关，而在高加索人群NQO1基因C609T各模型均与EC无关。同时，漏斗图未检测出显著的发表性偏倚，而敏感度分析过程显示目前所得的结果并不稳定，原因可能是有限的研究也使得按种族划分的亚组分析的结果不太可靠。此外，遗传背景和所居住环境的差异可能会影响NQO1基因C609T多态性与EC风险之间的关联。因此，本结果应谨慎解释。值得注意的是，与既往Meta分析相比，本文通过增大样本容量，同时剔除对照组基因型分布不符合HWE的病例-对照研究，使得结果更加可信。但是，进一步深入的研究仍有一定的必要性。总之，本研究表明NQO1基因C609T多态性与EC易感性有关，可作为进一步研究的基础，以期为EC早期诊断、筛查、治疗和预后评估提供新思路和手段。

本研究的优越性和局限性：①与单项研究相比，本文通过增加样本量而增加了统计学效能，使研究结果更加可靠；②在Meta分析之前制定完善的研究方案，尽量减少可能的偏倚；③本研究显示，充分了解NQO1基因单核苷酸多态性的作用可能为检测早期EC提供有希望的方法，而针对NQO1基因靶点所研究的药物有望未来在治疗EC中发挥一定的作用，为治疗EC提供了新的研究思路；④尽管使用了适当的检索策略来检索文献，但本文纳入的研究仅为中文和英文文献，仍有少数符合条件的文献未包含在内，存在一定的发表性偏倚；⑤本Meta分析未考虑混杂因素，如年龄、性别、环境等，所得结果可能存在一定的片面性。