愈创木酚甘油醚对家兔血浆莫西沙星药动学的影响

张 瑶，赵宣平，张 磊

（平顶山学院，河南 平顶山 467000）

莫西沙星（Moxifloxacin）是第四代氟喹诺酮类抗菌药物[1]。该药具有半衰期长、生物利用度高、组织穿透力强及生物活性强等优点[2]。莫西沙星可抑制细菌的DNA回旋酶和拓扑异构酶Ⅳ，从而起到抗菌的作用[3]。与使用左氧氟沙星相比，使用莫西沙星治疗肺结核的效果更好。愈创木酚甘油醚是一种恶心性祛痰药。该药可刺激患者的胃黏膜，引起轻微的恶心，反射性地增强支气管腺体的分泌功能，稀释痰液，降低痰液的黏稠度，起到祛痰的作用[4-5]。目前已有很多关于愈创木酚甘油醚或莫西沙星在家兔体内药动学的研究[1,6]。但鲜有研究探讨愈创木酚甘油醚对家兔体内莫西沙星药动学的影响。本文主要是探讨愈创木酚甘油醚对家兔血浆莫西沙星药动学的影响，为临床用药提供参考。

1 研究资料

1.1 仪器与试剂

仪器：高效液相色谱仪（型号：LC-551，生产厂家：陕西华信环保工程有限公司），高速离心机（型号：TG16X-Ⅱ，生产厂家：长沙东旺仪器有限公司），超声清洗机（型号：SYU-22-600DT，生产厂家：郑州生元仪器有限公司），加热兔台（型号：JR-20，生产厂家：泰盟医药集团）。试剂：愈创木酚甘油醚（生产厂家：湖北远成赛创科技有限公司），莫西沙星（生产厂家：湖北欣莹合化工有限公司），高氯酸（生产厂家：杭州邦易有限公司），四丁基硫酸氢铵（生产厂家：华夏化学北京公司），磷酸二氢钾（生产厂家：深圳市江源商贸有限公司）。其中，四丁基硫酸氢铵和磷酸二氢钾用于配置流动相。

1.2 研究对象

选取12只健康家兔作为研究对象。随机将12只家兔分为单用组和联用组。

2 方法与结果

2.1 给药及采血方法

对家兔禁食24 h。在家兔禁食24 h后的9：00am为6只单用组家兔使用200 mg/kg的莫西沙星灌胃；为6只联用组家兔先使用200 mg/kg的愈创木酚甘油醚灌胃，2 h后再使用200 mg/kg的莫西沙星灌胃[6]。在给药前（0 h）及给药后0.5 h、1 h、1.5 h 、2 h 、2.5 h 、3 h 、3.5 h、4 h分别经家兔心脏取血2 mL。在加热兔台上进行灌药和采血操作。使用超声清洗机清洗试验设备。

2.2 空白血浆的制备和预处理方法

将血液注入离心管（已预先注入肝素钠）中，混合均匀。将离心管放入离心机中，以6000 r/min的速度离心10 min。将上层清液（约0.4mL）保存在-20℃的环境中待测。将血浆过滤，放入高效液相色谱仪，记录色谱图。

2.3 线性关系考察

分 别 配 置1 mL浓 度 为10 μg/mL、20 μg/mL、30 μg/mL、40 μg/mL、50 μg/mL及60 μg/mL的莫西沙星标准溶液。将溶液放入离心管中，加入2 mL的空白血浆和2 mL浓度为10%的高氯酸，得到浓度为2 μg/mL、4 μg/mL、6 μg/mL、8 μg/mL、10 μg/mL及12 μg/mL的血浆药物溶液。将血浆药物溶液放入离心机中，以6000 r/min的速度离心10 min。留取上层清液。进样。用高效液相色谱仪记录峰面积，并计算标准曲线。计算结果显示，标准曲线为A=16.596C+3.2113（R2=0.9936）。不同浓度血浆药物溶液的峰面积见表1。

表1 不同浓度血浆药物溶液的峰面积

2.4 精密度实验

取100 μl浓度为20 μg/mL的莫西沙星标准溶液，分5次进样，每次进样20 μl。将每次进样按顺序分别标注为1～5号。得到5组莫西沙星的峰面积。根据5组莫西沙星的峰面积计算出相对标准偏差（relative standard deviation，RSD）。计算结果显示，RSD小于5%。详细的精密度实验数据见表2。

表2 精密度实验数据（n=5）

2.5 回收率实验

分别将5 mL浓度为2 μg/mL、6 μg/mL、12 μg/mL的血浆药物溶液（配置方法与线性关系考察中相同）分成5次进样，每次进样1 mL。根据测得浓度计算回收率。回收率（%）=测得浓度值/加入浓度值×100%。详细的回收率实验数据见表3。

2.6 稳定性实验

将5 mL浓度为2 μg/mL、6 μg/mL、12 μg/mL的血浆药物溶液（配置方法与线性关系考察中相同）放置在室温下，并在放置0 h、1 h、1.5 h、2 h及2.5 h时分别测量莫西沙星的峰面积。根据莫西沙星的峰面积计算RSD。计算结果显示，RSD为3.640%。

表3 回收率实验数据

2.7 血药浓度的测定

使用高效液相色谱仪分析两组家兔用药后不同时间点的血浆样本，得到莫西沙星的峰面积。根据标准曲线回归方程计算这些家兔血浆莫西沙星的浓度。两组家兔血浆莫西沙星的平均血药浓度—时间曲线见图1。

图1 两组家兔血浆莫西沙星的平均血药浓度—时间曲线

2.8 房室模型

将本研究中的数据采用DAS2.0药动学软件进行分析，并使用赤池信息量（Akaike‘s Information Criterion，AIC）进行判断。结果显示，单室模型的AIC最小，故取单室模型的药动学参数进行研究。药动学参数包括：吸收速率常数（Ka），半衰期（t1/2），峰浓度（Cmax），达峰时间（Tmax），从开始时间至所选择的最后一个时间点的血药浓度时间曲线下面积〔AUC（0-t）〕，从开始时间至无穷大时间的血药浓度时间曲线下面积〔AUC（0-∞）〕，根据AUC（0-t）计算出的药物分子驻留时间〔MRT（0-t）〕，根据AUC（0-∞）计算出的药物分子驻留时间〔MRT（0-∞）〕。

2.9 两组家兔血浆莫西沙星的主要药动学参数

采用药动学软件DAS2.0对两组家兔血浆莫西沙星血药浓度与峰面积进行分析，得到主要药动学参数见表4。采用SPSS 22.0统计软件对两组家兔血浆莫西沙星的药动学参数进行处理，计量资料用均数±标准差（±s）表示，采用t检验，以P＜0.05为差异具有统计学意义。统计学处理的结果显示，联用组家兔血浆莫西沙星的Ka、Cmax、AUC(0-t)、AUC(0-∞)及t1/2均高于单用组家兔，P＜0.05。

表4 两组家兔血浆莫西沙星的主要药动学参数（n=6）

3 讨论

本次研究中，我们为家兔采集血样的方式为心脏取血，测定莫西沙星血药浓度的方法为高效液相色谱法。相关的研究结果显示，与使用紫外分光光度法相比，使用高效液相色谱法检测药物含量的操作更简便，检测结果更准确[7]。本次研究中，我们使用高效液相色谱法测定家兔血浆中莫西沙星在最大波长下的峰面积，根据标准曲线回归方程和DAS2.0软件进行了房室模型判断，得出了两组家兔体内莫西沙星的主要药动学参数。在线性关系考察中，得到的标准曲线为A=16.596C+3.2113（R2=0.9936）。这说明，莫西沙星在浓度为10～60 μg/mL的范围内线性关系良好。在精密度实验、回收率试验和稳定型中，莫西沙星血浆药物溶液在不同进样次数、不同浓度及不同时间的条件下，RSD均小于5%，且回收率在100%左右，符合数据分析的要求。RSD可用于检测实验数据的精密度和重复性。若某实验所得的数据精密度高、重复性好，则该实验所得的数据可信度较高。

综上所述，愈创木酚甘油醚对家兔血浆莫西沙星的药动学影响显著。与使用莫西沙星灌胃的家兔相比，使用愈创木酚甘油醚灌胃后再使用莫西沙星灌胃的家兔血浆莫西沙星的t1/2更长，其Cmax更高，其Ka、AUC(0-t)及AUC(0-∞)更大。临床上不可将这两种药物合用，在必须合用这两种药物时应注意调整用药的剂量。