3种酶联免疫吸附试验试剂检测丙型肝炎抗体结果分析

赵 姝

（辽宁省本溪市桓仁县人民医院检验科，辽宁 本溪 117200）

丙型肝炎简称为丙肝，是患者肝部受HCV（丙型肝炎病毒）感染而导致一种疾病[1]，感染此种病毒的途径主要包括输血、吸毒、针刺伤等[2]，临床上对于丙型肝炎的治疗有着一定的难度，如何提高其治疗效果一直是临床研究的热点所在，众所周知，诊断是治疗的第一步，有效的诊断方法不仅可以帮助医师确定患者的病变位置，而且可以帮助医师为患者制订针对性的治疗计划。酶联免疫吸附试验试剂（ELISA）一直是临床上常用于检测丙型肝炎的方法[3-5]，但其方法较多，具体哪种方法的效果最好仍需通过临床研究进行探讨。本次研究选取300例患者的血液标本，研究3种酶联免疫吸附试验试剂（ELISA）对丙型肝炎抗体的检测结果。

1 资料与方法

1.1 一般资料 本研究选取在我院确诊为丙型肝炎的患者300例为研究对象，时间为2017年6月至2018年6月，将其血液标本300例作为检测对象，根据随机抽签分组的方法，将300例血液标本平分为了3个组别，即A组、B组和C组，患者一般资料如下。A组：男女患者为48∶52，年龄31～75岁，平均（52.34±1.31）岁；B组：男女患者为50∶50，年龄30～76岁，平均（52.76±1.13）岁；C组：男女患者为49∶51，年龄32～74岁，平均（52.35±1.69）岁。患者、家属对此次研究知情且同意，3组患者的一般资料比较，P＞0.05，具有可比性。

纳入标准：患者均知情并签署知情同意书。排除标准：①身体有其他严重不可逆的并发症者。②存在电解质紊乱、酸碱平衡失调、心律失常者。③患有获得性免疫缺陷综合征者。④严重精神疾病或语言沟通有障碍的患者、无人照顾者。⑤患有肝肾功能异常者。⑥在此次研究进行前，服用过会影响此次研究结果类药物者。⑦患有恶性肿瘤、或预计生存期＜3个月者。⑧在研究过程中对研究存在异议者[3-7]。

1.2 方法 将患者标本分别用试剂A和试剂B行常规抗HCV抗体ELISA初步检测，对标本进行阴性、阳性的判定，对检测结果为阳性和弱阳性的标本进行PCR、RIAB检测，确定标本是否包含HCV，之后同时对标本行3中ELISA试剂进行再次检查，再与之前的结果进行对比。对血清（1 NCU/mL）进行稀释处理，倍数为512倍，得9份标本，分别以试剂A、试剂B、试剂C对标本进行平行检测，并对结果进行对比分析；利用试剂A、试剂B、试剂C 3种试剂对RIBA检测结果为阳性的标本进行再次检测，以S/CO值进行比对分析。

1.3 观察指标 将A、B、C 3组标本检测的阳性率作为观察指标。

1.4 统计学处理 本研究所得数据用SPSS20.0统计软件进行处理，计数资料予以χ2检验，数据用[n（%）]表示，计量资料予以t检验，数据用（）表示，P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

A组标本检测的阳性例数为58例，阳性率为58%；B组标本检测的阳性例数为78例，阳性率为78%；C组标本检测的阳性例数为91例，阳性率为91%，将C组检测的阳性率与A组、B组进行组间对比，结果显示P＜0.05。见表1。

表1 检测结果对比

3 讨论

丙型肝炎是临床上常见的一种感染类疾病，血液传播、性传播和母婴传播是该疾病常见的传播途径，患者的临床表现为恶心、食欲下降、全身无力等症状[8]，临床统计显示，丙型肝炎病毒在全球的感染率高达3%，全球约1.8亿人患有丙型肝炎，每年新发丙型肝炎患者约有3.5万例，丙型肝炎是一种全球性流行疾病，会导致患者出现肝脏坏死和肝脏纤维化，严重时甚至会导致肝癌，最终威胁患者的生命安全[9-10]，是当下极为严重的社会以及公共卫生问题。对于乙型肝炎的治疗，诊断是的第一步，有效的诊断方法不仅可以帮助医师确定患者的病变位置，而且可以帮助医师为患者制订针对性的治疗计划，并且可以帮助医师评价治疗的有效性，但是何种检验途径最佳仍需进行进一步的临床研究。

夹心法试剂C是时下一种检测丙型肝炎抗体的酶联免疫吸附试验试剂，可作为抗丙型肝炎病毒筛查试剂对相关人员予以筛查以及患者的早期诊断。在本次实验之中，设了不同类别的实验，对有关指标进行平行检测，用以与间接法酶联免疫吸附试验试剂的检测结果进行对比分析，实现对于夹心法试剂C的客观评价。在间接法酶联免疫吸附试验之中，由于间接法酶联免疫吸附试验用酶标记抗人免疫球蛋白G作为第二抗体用以检测血清之中是否存在丙型肝炎病毒免疫球蛋白G抗体，而免疫球蛋白G抗体出现于体内的时间要远远晚于免疫球蛋白M，这就容易导致不少献血者在感染早期采集血液时出现漏检的现象。此外，为了避免血清之中诸如类风湿因子或非特异性抗体所带来的干扰，该试验的首要工作即是降低检测样本量以及稀释样本来控制反应的值。此外，在间接法酶联免疫吸附试验过程中，较为容易遭受非特异性抗体所带来的影响，如非特异性免疫球蛋白G抗体的吸附或是类风湿因子的干扰等，导致结果呈假阳性。从这一现象来说，间接法酶联免疫吸附试验试剂的检测敏感度不高，同时存在特异性差的问题。

近些年来，在全球范围内丙肝抗体的诊断试剂实现了由间接法向夹心法的转移。因丙肝重组抗原的活性更加依赖于空间构象，因此，夹心法试剂的研究重点与难点则是抗原结构的稳定性与进行酶标记时所造成的影响。当前，影响抗丙型肝炎病毒试剂盒质量的主要因素是其包被的丙型肝炎病毒抗原。目前，我国血站多是采用不同厂家的间接法酶联免疫吸附试验试剂来对献血对象的丙型肝炎抗体进行初步筛查，其目的就是避免因不同厂家包被的抗原片段不同而引发漏检的问题。间接法酶联免疫吸附试验试剂的试剂盒灵敏度相对较高，不过结合本次实验数据来看，不同厂家间接法酶联免疫吸附试验检测试剂的使用也有导致假阳性增加的可能，进一步加重血液筛查工作的压力以及成本。有关数据报告，在血液筛查工作之中应用夹心法试剂能够大幅提高抗丙型肝炎病毒阳性标本的检出率，降低假阳性率，能够为血液筛查工作提供便利以及更高的精准度。而这一论述与本次实验所得结果基本一致，可作为参考。

目前，对于丙型肝炎病毒感染标志物与检测方法主要有以下两种：首先是上文所提到的，应用不同厂家所生产的酶联免疫吸附试验试剂来检测丙型肝炎病毒抗体；其次则是采用一种酶联免疫吸附试验试剂检测丙型肝炎病毒，再使用另一种试剂来检测乙型肝炎病毒核酸。目前，在欧美等发达国家之中，核酸检测在献血者血液筛查工作之中得到了较为广泛的应用，在我国部分地区也有采供血机构应用这一方法，并做出了大量的实践摸索。总得来说，在选择丙型肝炎病毒感染标志物检测试剂及其方法时，应对夹心法酶联免疫吸附试验试剂、间接法酶联免疫吸附试验试剂以及丙型肝炎病毒核算试剂进行妥善配伍，用以提高丙型肝炎感染标志物阳性标本的检出率，降低假阳性率，为血液筛查工作提供便利的同时，也进一步促进了目前无偿献血工作的可持续发展。

本研究结果显示：A组阳性例数58例，阳性率为58%；B组阳性例数78例，阳性率为78%；C组阳性例数91例，阳性率为91%，将C组检测的阳性率与A组和B组分别进行组间对比，P＜0.05，差异显著。结果提示，对于丙型肝炎抗体的临床检测来说，通过夹心法的酶联免疫吸附试验试剂（ELISA）的检查方法有着较好的效果，阳性率更佳。本次实验所得结果与过往文献资料所得研究结果基本一致，具有一定的参考性。不过囿于样本偏少以及外界因素影响等问题，数据结果在精密性上可能有所欠缺，需待日后扩大实验样本数予以进一步研究分析。

综上所述，在丙型肝炎抗体检测之中，应用夹心法的酶联免疫吸附试验试剂（ELISA）的检查方法检测效果最优优异，临床价值突出，可予以推广应用。