电化学发光法检测抗甲状腺过氧化物酶抗体的性能验证及其在甲状腺疾病诊断中的应用价值

刘孝文 云南省文山州人民医院检验科 （云南 文山 663000）

内容提要： 目的：探讨电化学发光法检测抗甲状腺过氧化物酶抗体（TPOAb）的性能验证及其在甲状腺疾病诊断中的应用价值。方法：使用罗氏Cobas e602电化学发光免疫分析仪对TPOAb进行检测，观察精密度实验结果、准确度实验结果与线性范围情况；同时选取2018年4月～2019年12月本院收治的120例甲状腺疾病患者与40名健康人员，对不同类型患者及健康人员的TPOAb、血清促甲状腺激素（TSH）、血清游离三碘甲状腺素原氨酸（FT3）、血清游离甲状腺素（FT4）水平进行观察。结果：TPOAb的批内与批间不精密度符合厂家所提供的性能标准；检测厂商的4份定值校准品，结果与靶值的相对偏倚-2.98%～3.82%之间；TPOAb在5.8IU/mL～588.5IU/mL之间线性良好。甲亢组患者与甲减组患者的TPOAb水平明显高于甲肿组患者与健康人员，差异显著（P＜0.05）；但甲肿组患者与健康人员的TPOAb水平则无显著差异（P＞0.05）。结论：电化学发光法检测抗甲状腺过氧化物酶抗体的分析性能符合质量目标要求，通过检测甲状腺过氧化物酶抗体水平对于不同类型的甲状腺疾病具有良好的鉴别作用。

通过查阅相关的临床调查资料可知，近年来甲状腺疾病的发病率不断增加，将会对身体健康与正常生活均造成严重的不良影响，由于甲状腺疾病包括诸多类型，因此需要予以及时有效的鉴别诊断，以便能够进行针对性的治疗[1]。随着研究的不断深入，目前临床中多以抗甲状腺过氧化物酶抗体（TPOAb）作为鉴别诊断的重要指标[2]，为确保该种指标的可靠性，则需要对其进行有效的验证，目前临床中多使用罗氏Cobas e602及其配套的TPOAb试剂盒进行实验验证[3]。本文将探讨电化学发光法检测抗甲状腺过氧化物酶抗体的性能验证及其在甲状腺疾病诊断中的应用价值。

1.资料与方法

1.1 临床资料

选取2018年4月～2019年12月本院收治的120例甲状腺疾病患者与40例健康人员。120例甲状腺疾病患者中，男79例，女41例，平均年龄为（42.3±4.9）岁，其中包括56例甲状腺功能亢进患者（甲亢组）、41例甲状腺功能减退患者（甲减组）、23例单纯甲状腺肿大患者（甲肿组）；40例健康人员中，男29例，女11例，平均年龄为（42.9±5.1）岁。选取同时期本院门诊患者与健康体检中心高、低值浓度混合血清标本。

纳入标准：①患者均符合甲状腺疾病的临床诊断标准；②家属均自愿签署同意书；③血液标本均无溶血、黄疸与脂血。排除标准：①无法积极配合完成检测过程；②患有其他免疫性疾病。

1.2 方法

选择罗氏Cobas e602电化学发光免疫分析仪及其配套试剂（批号175454）、校准品（批号168471、168301与172212）。

1.2.1 精密度测量。按照CLSI EP15-A2文件中的标准进行测量。选择2个高、低值水平浓度混合血清，每日进行3次测量，连续测量5d，对批内不精密度（CV）与批间不精密度（CV）进行分别统计，并与厂商声明的批内CV与批间CV进行比较，判断标准：小于厂商声明的不精密度则符合要求。

1.2.2 准确度测量。选择不同于当前使用校准品批号的校准品，之后对其进行检测，与被测校准品的靶值比较，计算相对偏差。判断标准：相对偏差在±10%以内。

1.2.3 告知所有研究对象晨起空腹，抽取其4mL静脉血，将其装入盛有抗凝剂的试管中，之后对其进行离心处理，取上层清液待检。使用罗氏Cobas e602电化学发光免疫分析仪及其配套试剂对样本进行检测，包括TPOAb、血清促甲状腺激素（TSH）、血清游离三碘甲状腺素原氨酸（FT3）、血清游离甲状腺素（FT4）水平。

1.3 观察指标

①精密度实验结果情况；②准确度实验结果情况；③线性范围情况；④不同类型甲状腺疾病患者与健康人员的TPOAb、血清促甲状腺激素（TSH）、血清游离三碘甲状腺素原氨酸（FT3）、血清游离甲状腺素（FT4）水平情况。

1.4 统计学分析

采用SPSS 20.0统计学软件进行数据分析，符合正态分布的计量资料用均数±标准差（±s）表示，两组间比较采用t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2.结果

2.1 精密度实验结果情况

TPOAb的批内与批间不精密度符合厂家所提供的性能标准，具体见表1。

表1.精密度实验结果情况

2.2 准确度实验结果情况

检测厂商的4份定值校准品，结果与靶值的相对偏倚-2.98%～3.82%之间，具体见表2。

表2.准确度实验结果情况

2.3 线性范围情况

TPOAb在5.8～588.5IU/mL之间线性良好，具体见表3。

表3.线性范围情况

2.4 不同类型甲状腺疾病患者与健康人员的TPOAb、TSH、FT3、FT4水平比较

甲亢组患者与甲减组患者的TPOAb水平明显高于甲肿组患者与健康人员，差异显著（P＜0.05）；但甲肿组患者与健康人员的TPOAb水平则无显著差异（P＞0.05），见表4。

表4.不同类型甲状腺疾病患者与健康人员的TPOAb、TSH、FT3、FT4水平比较

3.讨论

甲状腺疾病在临床中十分常见，由于其具有特殊的解剖结构，因而较易发生误诊或漏诊等不良情况[4]，因此需要进行准确有效的检测，以便能够对不同的疾病类型进行鉴别诊断，从而能够对患者采取及时有效的治疗，最终提升患者的健康水平[5]。

伴随着临床医学技术的不断发展进步，目前临床中将甲状腺过氧化物酶抗体作为重要的检测标志物。通过近年来相关的临床研究显示，甲状腺过氧化物酶是一种甲状腺微粒体的主要抗原成分，存在于患者体内的甲状腺过氧化物酶抗体中，因而甲状腺过氧化物酶抗体与甲状腺疾病的发生与发展具有密切关联；同时甲状腺过氧化物酶抗体也是一种重要的免疫学指标，对于甲状腺疾病的诊断具有较高的特异性[6]。对于原发性甲减患者而言，通过检测甲状腺过氧化物酶抗体结合TSH升高的结果，能够及早的明确甲减症状[7]；并且对于可疑甲减患者而言，若甲状腺过氧化物酶抗体水平升高，还有助于对原发与继发甲减症状进行有效的鉴别诊断[8]。通过本研究的结果可知，甲亢组患者与甲减组患者的血清甲状腺过氧化物酶抗体水平明显高于甲肿组患者与健康人员，与上述论述基本一致。

为有效的证明血清甲状腺过氧化物酶抗体的性能，目前临床中多使用电化学发光法进行检测。继放射免疫、酶联免疫、荧光免疫、化学发光免疫之后，电化学发光免疫分析是一种新型的检测方式，通过临床实践证明，该种检测方式具有较高的灵敏度、简便的操作过程、标准曲线范围较宽、不会产生放射性污染、较长的标记物存储时间等特点[9,10]。通过本研究的结果可知，使用电化学发光法对甲状腺过氧化物酶抗体进行检测后可知，甲状腺过氧化物酶抗体的批内与批间不精密度符合厂家所提供的性能标准、检测厂商的4份定值校准品，结果与靶值的相对偏倚-2.98%～3.82%之间，并且甲状腺过氧化物酶抗体在5.8IU/mL～588.5IU/mL之间线性良好。

综上所述，本研究认为电化学发光法检测抗甲状腺过氧化物酶抗体的分析性能符合质量目标要求，通过检测甲状腺过氧化物酶抗体水平对于不同类型的甲状腺疾病具有良好的鉴别作用，可作为首选的甲状腺疾病的临床检测标志物。