US-CNB免疫组织化学检测对乳腺癌腋窝淋巴结转移患者诊断效能的影响

陈大伟，钱跃军

(1.河南电力医院 病理科，河南 郑州 450000；2.郑州大学附属郑州中心医院 甲状腺乳腺外科，河南 郑州 450000)

乳腺癌是临床常见恶性肿瘤，可发生肝、肺、脑、骨等转移，进而破坏正常器官、组织，若未及时治疗，严重可危及患者生命安全[1]。腋窝淋巴结是常见乳腺癌转移部位，肿瘤细胞可通过胸大肌外侧、逆行等途径侵袭腋窝淋巴结，而不同的转移状态、有无转移，临床治疗方式有差别，故早期鉴别、判断乳腺癌有无腋窝淋巴结转移对临床制定治疗方案有重要价值[2]。超声检查是临床重要的疾病诊断方式，能准确观察病灶形态，为临床鉴别、诊断提供依据。本研究选取49例乳腺癌患者作为研究对象，探讨超声引导下粗针穿刺(ultrasound-guided core needle biopsy，US-CNB)免疫组织化学检测对有无腋窝淋巴结转移的诊断效能。

1 资料与方法

1.1 一般资料选取2018年5月至2019年4月河南电力医院收治的49例乳腺癌患者作为研究对象，均为女性，年龄32～67岁，平均(49.38±8.24)岁，基因蛋白达情况：34例雌激素(ER)阳性，28例孕激素(PR)阳性，14例人表皮生长因子受体2(HER2)阳性。本研究经河南电力医院伦理委员会审核批准。

1.2 选取标准(1)纳入标准：①经病理学检查确诊为乳腺癌，符合《中国抗癌协会乳腺癌诊治指南与规范》标准[3]；②签署同意书。(2)排除标准：①合并凝血功能障碍、肝肾严重功能不全；②合并其他严重基础疾病、其他恶性肿瘤。

1.3 方法(1)US-CNB活检：仪器选择：彩色多普勒超声诊断仪(Philips iu22)，探头频率：5～12 MHz；自动活检枪(美国巴德，MG1522)，射程：1.5～2.2 cm；活检针(美国巴德，14 G)；依照病灶位置，取侧卧位(仰卧位)，超声扫描观察肿块大小、形态、血流分布、内部结构、边界是否清晰，确定穿刺点、进针方向；20 g·L-1利多卡因(湖南科伦制药有限公司，国药准字H20057816)2 mL局麻，常规消毒，超声引导下斜向刺入穿刺针，避开病灶附近器官、组织，肿块不同区域3次以上取材，取材标准：15～22 mm，4%(体积分数)甲醛固定所取组织，加压止血。(2)免疫组织化学检测：标本以甲醛固定，石蜡包埋处理，二甲苯Ⅰ、Ⅱ中浸泡载玻片各10 min，以体积分数为75%、95%、100%乙醇溶液浸泡载玻片各5 min，磷酸缓冲盐(PBS)溶液冲洗、晾干；加热修复液到沸腾，加热2 min载玻片，冷却，洗净；把载玻片浸泡在过氧化氢中，常温孵育10 min，取出，洗净；滴加一抗于载玻片上，4 ℃孵育1晚；洗净载玻片，滴增强剂，孵育20 min；洗净，常温孵育30 min；滴显色液，显微镜观察；以苏木精再次染色，酸化、反蓝；封片。(3)腋窝淋巴结清扫术(axillary lymph node dissection，ALND)诊断：常规取材，甲醛固定，石蜡包埋、切片，苏木精染色，显微镜观察。

1.4 US-CNB免疫组织化学检测淋巴结转移判断标准结果分类：细胞呈腺样、树枝样、乳头状排列，存在大量良性裸核细胞为Ⅰ级；细胞呈片状、拥挤重叠状排列，良性裸核细胞数量减少为Ⅱ级；细胞以重叠团块状排列为主，可看到核分裂坏死，细胞黏附性降低为Ⅲ级；细胞呈无规则团块状排列，未发现良性裸核细胞，可看到大量核分裂坏死为Ⅳ级。阴性(未转移)：Ⅰ级、Ⅱ级；阳性(转移)：Ⅲ级、Ⅳ级。

1.5 基因蛋白阳性评定标准(1)PR、ER阳性：二者阳性染色均定位至细胞质或细胞核上，棕黄色颗粒出现在细胞核为阳性，而棕黄色颗粒出现在细胞质或细胞膜为阴性。(2)HER2阳性：10%以上肿瘤细胞可见微弱、不完整、难以察觉细胞膜染色为1+；10%及以下肿瘤细胞可见完整细胞膜强阳性染色或10%以上肿瘤细胞可见中强度、微弱、不完整染色为2+；10%以上肿瘤细胞可见完整强染色为3+。两名医生共同判断结果，若意见一致则评价为阳性。

1.6 观察指标(1)以ALND诊断为“金标准”，统计记录US-CNB免疫组织化学检测诊断结果。(2)US-CNB免疫组织化学检测诊断乳腺癌腋窝淋巴结转移灵敏度、特异度、准确度。(3)分析US-CNB免疫组织化学检测PR、ER、HER2表达情况。

2 结果

2.1 诊断结果49例乳腺癌患者经ALND诊断38例阳性，11例阴性；US-CNB免疫组织化学检测33例阳性，10例阴性。见表1。

表1 ALND、US-CNB免疫组织化学检测结果

2.2 诊断效能US-CNB免疫组织化学检测乳腺癌腋窝淋巴结转移灵敏度为86.84%(33/38)，特异度为90.91%(10/11)，准确度为87.76%(43/49)。

2.3 US-CNB免疫组织化学检测PR、ER、HER2表达情况US-CNB免疫组织化学检测显示，49例乳腺癌患者中ER阳性33例，阴性13例；PR阳性26例，阴性20例；HER2阳性13例，阴性33例。US-CNB免疫组织化学检测对PR基因表达灵敏度为92.86%(26/28)，特异度95.24%(20/21)；对ER基因表达灵敏度为97.06%(33/34)，特异度为86.67%(13/15)；而对HER2基因表达灵敏度为92.86%(13/14)，特异度为94.29%(33/35)。

3 讨论

乳腺癌是女性乳腺多发恶性肿瘤，病因和环境、良性乳腺疾病、饮食、生活方式等因素均有一定相关性，其早期症状主要表现为腋窝淋巴结肿大、乳头溢液、乳房肿块，若未及时治疗，随病情进展可向远处转移，导致机体其他器官病变，严重威胁患者生命健康安全。相关研究指出，及时准确地诊断出乳腺癌有无转移是降低乳腺癌患者病死率、延长生存期的关键，而不是治疗方式的选择[4]。腋窝淋巴结是常见乳腺癌转移部位，故早期安全、有效地诊断出腋窝淋巴结状态对乳腺癌的治疗具有重要意义。

前哨淋巴结活检术、ALND是目前临床诊断乳腺癌腋窝淋巴结转移的常用方式，其准确率较高，但ALND检测创伤大，并发症发生风险较高；而SLNB虽然创伤较小，但其耗时长、放射性强、操作复杂，故均不利于临床筛选[5]。穿刺活检通过选取可疑位置组织样本，并进行病理学检查，可提高疾病诊断准确率，可靠性较强，但其存在一定创伤性，易导致穿刺切口感染、淋巴结水肿等。超声诊断是临床常用判断有无淋巴结转移的方式，其具有经济、操作简单、无创、可重复等特点。腋窝淋巴结正常情况下呈长椭圆形、椭圆形，但如果发生肿瘤细胞侵袭，会导致淋巴结被膜损伤，逐渐转变至圆形、类圆形[6]。故通过超声成像有助于判断腋窝淋巴结是否存在异常，但其主要依靠成像结果判断，需要临床医生具有丰富临床经验，因此其判断结果易受主观因素干扰。US-CNB是一种微创活检方式，利用超声检查评估腋窝淋巴结状态，确定可疑区域后穿刺选取标本，可有效减轻创伤，提高诊断准确率；同时与超声引导细针穿刺检查相比，其可以获得更多标本，能显著提高诊断灵敏度、特异度；此外其所取标准还能用于乳腺癌患者相关基因表达的评估，有助于临床制定治疗措施及预后评价[7]。本研究结果显示，US-CNB免疫组织化学检测乳腺癌腋窝淋巴结转移的灵敏度为86.84%，特异度为90.91%，准确度为87.76%，可见US-CNB免疫组织化学检测乳腺癌腋窝淋巴结转移具有较高的灵敏度、特异度、准确度，有助于临床鉴别病情，制定治疗方案。

PR、ER、HER2在乳腺癌治疗方案选择、预后判断中有重要作用，故临床对乳腺癌肿瘤标本PR、ER、HER2基因表达有较高关注[8]。本研究发现，应用US-CNB免疫组织化学法评价PR、ER、HER2表达的特异度、灵敏度均在85%以上，充分证实US-CNB免疫组织化学检测能够辅助鉴别乳腺癌患者基因表达情况，便于临床治疗、预后评估。

综上所述，乳腺癌患者有无腋窝淋巴结转移通过US-CNB免疫组织化学检测，灵敏度、特异度、准确度较高，有助于临床确定病情，制定治疗措施，评估预后。