抗核抗体、类风湿抗体在老年人梅毒特异性抗体检测中的影响

江云川 龚丽坤 高 卫 杨 婷 沈 蓝 张 瑛

1 云南省楚雄州中医医院医学检验科，云南省楚雄市 675000； 2 云南省滇南中心医院急诊医学部； 3 云南省昭通市第一人民医院医学检验科

梅毒是严重影响人体健康的性传播疾病，是由感染苍白螺旋体(TP)诱发，可通过血液、母婴、性接触等途径扩散，具有极大危害性,临床可通过青霉素类药物治疗梅毒，部分患者可治愈[1]。目前，临床使用较多的梅毒相关抗体检测包括梅毒血浆快速反应素(RPR)、甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)、梅毒特异性抗体酶联免疫吸附实验(TP-ELISA)、梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)等实验室方法，其中RPR和TRUST极易受到各种因素的影响出现假阳性所以必须联合其他梅毒特异性抗体实验才能诊断梅毒感染[2]。而梅毒特异性抗体酶联免疫吸附实验(TP-ELISA)是临床上应用最多的梅毒特异性抗体检测方法,有报道单纯的TP-ELISA检测的准确性有限，在一些情况下易出现假阳性[3]。相关研究发现自身抗体随年龄增长阳性率逐渐升高，而老年人群梅毒发病率也居高不下，老年人自身抗体水平显著高于其他人群或可影响梅毒抗体检测，但临床尚无系统的研究[4-5]。鉴于此，本研究探讨抗核抗体(ANA)和类风湿抗体对老年人梅毒特异性抗体检测中的影响。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择我院2017年2月—2019年7月TP-ELISA有反应的老年患者1 043例，其中男612例，女431例；年龄60～79岁，平均年龄(69.48±5.62)岁；体质量指数20.75～28.36，平均体质量指数24.31±2.18。

1.2 入选标准 (1)纳入标准：①TP-ELISA有反应；②入组前6个月，未使用免疫增强或抑制药物者；③无严重精神系统疾病者；④患者及其家属均知情同意。(2)排除标准：①存在病原体感染如艾滋病病毒、丙型肝炎、乙型肝炎等；②存在恶性肿瘤者；③不能配合检查或中途退出者。

1.3 检测方法 清晨采集受试者3ml空腹静脉血，30min静置，10min离心，3 000r/min，取血清备用，首先用TP-ELISA对所准备的血清标本进行筛查,对TP-ELISA实验有反应的标本进行ANA、TPPA、类风湿因子(RF)检测。TP-ELISA检测：采用上海科华生物工程股份有限公司生产的梅毒特异性抗体检测试剂盒,操作步骤严格按照试剂盒说明书进行, TP-ELISA实验有反应的判定标准：S/CO>1。ANA检测：采用欧蒙(杭州)医学实验诊断有限公司生产的抗核抗体IgG(接免疫荧光法)检测试剂盒，操作步骤严格按照试剂盒说明书进行，试验结果通过奥林巴斯BX-51荧光显微镜观察，阳性标本判断标准：滴度≥1∶100出现阳性反应。TPPA检测：采用日本富士瑞必欧株式会社生产的TPPA试剂盒，操作步骤严格按照试剂盒说明书进行, 阳性标本判断标准:稀释度≥1∶80出现阳性反应。RF试验：采用德国雅仕通诊断有限两合公司生产的类风湿抗体检测试剂盒, 操作步骤严格按照试剂盒说明书进行, 阳性标本判断标准,类风湿抗体IgA、IgG、IgM任意抗体定量>18U/ml。依据各项检测结果，分为ANA阳性组、RF阳性组、RF、ANA同时阳性组及RF、ANA同时阴性组(对照组)。以TPPA检测结果作为梅毒特异性抗体诊断的“金标准”。分别记录TPPA检测结果，计算TPPA与TP-ELISA不符合率。

1.4 统计学方法 采用SPSS23.0统计学软件分析数据，以%和n表示计数资料，采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

与对照组相比，ANA阳性组、RF阳性组及RF、ANA同时阳性组的TPPA与TP-ELISA不符合率均较高，差异有统计学意义(χ2=24.188、10.432、20.625，P=0.000、0.000、0.000)。见表1。

表1 ANA及RF检测结果

3 讨论

近年来我国梅毒发病率不断增长，主要由TP感染而诱发疾病，其致病机制无准确定论，但有研究发现，因老年人身体条件特殊，免疫力低下，且伴有高血压、糖尿病等合并症，易感染TP，进而损伤器官组织，促使自身免疫原性成分释放，进而刺激免疫系统，使其出现免疫应答，促使自身抗体形成，加重组织损伤。尤其是老年人隐性梅毒发病率比较突出，梅毒螺旋体感染者作为唯一感染源，感染性强烈，唾液、乳汁、精液、血液等多种途径均可传播，但相当一部分梅毒螺旋体感染者无特异性症状，其临床诊断采取合适的实验室方法尤为重要[6]。

目前，临床上常用TP-ELISA、TP-SA方法进行检测，前者适用于大批量检测，但假阳性较高，后者成本高、时间长，检测结果并不理想。本研究采用TPPA检测作为梅毒特异性抗体诊断的“金标准”，其检测特异性强、敏感度高，但不能实现自动化操作和判读结果，在大规模筛查中不适用。而TP-ELISA在多数情况下拥有可靠的特异性、敏感度，而且实现了自动化操作和判读结果临床上应用尤为广泛，但在特殊条件下抗干扰能力较弱。研究结果显示，梅毒特异性抗体TP-ELISA有反应性的1 043例老年人中，对照组TPPA与TP-ELISA不符合率1.10%，ANA阳性组TPPA与TP-ELISA不符合率8.70%，RF阳性组TPPA与TP-ELISA不符合率5.42%，RF、ANA同时阳性组TPPA与TP-ELISA不符合率8.65%，三组结果均与对照组有明显差异，提示TP-ELISA检测梅毒特异性抗体在存在抗核抗体和类风湿抗体时会增加其假阳性率，而临床诊断中如果仅仅使用TP-ELISA+RPR/TRUST诊断在此人群会有较多误诊现象。另外，相关研究还发现，相较于健康人群，老年梅毒感染患者ANA阳性率较高，其原因也可能是老年人身体条件特殊，感染梅毒螺旋体进而损伤器官组织，促使自身免疫原性成分释放，进而刺激免疫系统，使其出现免疫应答，促使自身抗体形成[7-8]。此外，老年患者因自身伴有免疫系统功能异常，在TP感染后，会导致多种非特异成分增加，包括甲胎蛋白、糖尿病自身抗体、嗜异性抗体、治疗性抗体等，更易出现自身免疫反应。而ANA作为一种自身抗体，可作用于细胞核内的蛋白、DNA、RND等成分，识别多种细胞核组分，在自身免疫性溶血性贫血、系统性硬化症、风湿热、类风湿性关节炎等多种自身免疫性疾病可特征性的形成。因此，在TPPA对TP-ELISA的结果进行复查的基础上，可辅助ANA检测，以提高临床诊断符合率，帮助患者早期确诊治疗。

综其所述，TP-ELISA检测梅毒特异性抗体在老年人群特别是有自身抗体存在的人群中假阳性率较高，TP-ELISA+RPR/TRUST在此人群中的应用有很大局限性。在TP-ELISA有反应性的老年人标本中应当使用TPPA对TP-ELISA的结果进行复查确认，有条件的最好同时进行ANA检测，一方面可以提高梅毒感染临床诊断可靠性，另一方面也可发现梅毒感染患者的自身免疫性疾病情况，协助临床相关诊断治疗。