ERCC1基因C8092A多态性与肺癌遗传易感性的关联研究

吕鹏飞，周 静，朱瑞楠，蒙 冲，李晓珍，黄海溶，肖 莎

我国肺癌死亡率较高，严重危害人群健康。单核苷酸多态性 (single nucleotide polymorphism, SNP) 能使基因表达产物发生变化，出现遗传特征的差异。核苷酸切除修复途径 (nucleotide excision repair, NER) 主要修复DNA加合物引起的损伤。ERCC1是DNA修复酶，对DNA损伤进行识别和剪切。目前研究较多的是ERCC1 C8092A和C118T SNP与肺癌遗传易感性的关联。李刘丽研究发现ERCC1 C8092A多态与肺癌遗传易感性相关，AA基因型比CC基因型患肺癌的风险增高；按吸烟分层后，AA基因型比CC基因型患肺癌的风险仍增高。本研究拟选择264例肺癌患者和264例非肺癌患者作为研究对象，提取研究对象血液样品DNA，检测ERCC1 C8092A位点SNP，比较其与肺癌遗传易感性的关系，为肺癌的预防提供依据。

1 材料与方法

1.1 病例资料

2017年1月1日—2017年10月30日，来自海南医学院附属医院和海南医学院第一附属医院肺癌患者264例作为病例组，非肺癌患者264例作为对照组。按照年龄、性别、饮酒情况、吸烟情况进行频数匹配，病例组和对照组比较差异均无统计学意义，具有可比性。

1.2 流行病学调查

获得患者知情同意书后，对患者进行问卷调查，获得基本人口信息(姓名、性别、年龄、籍贯、民族等)、吸烟情况(规定既往吸烟超过半年、平均吸烟>1支/d为吸烟者)、饮酒情况(规定既往饮酒超过半年,平均饮酒>50 ml/d为饮酒者)以及家族肿瘤史等信息。

1.3 DNA提取及其多态性分析

采集患者2～3 ml的外周静脉血于枸橼酸钠抗凝的真空采血管中，在4 ℃的冰箱保存。提取DNA的方法按照TaKaRa全血DNA试剂盒操作步骤进行，采用质谱法分析ERCC1 C8092A位点SNP，委托上海生工生物工程股份有限公司检测。

1.4 统计学处理

采用SPSS 21.0软件进行数据分析。对照组进行Hardy-Weinberg遗传平衡定律检验。组间比较采用χ检验，多因素Logistic回归分析计算比值比 (odds ratio,

OR

)、95% 的置信区间 (confidence interval,

CI

)，以

P

<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 研究对象基本情况

病例组和对照组的基本情况(年龄、性别、饮酒情况、吸烟情况)分布差异均无统计学意义 (χ=3.282,

P

=0.194)，两组具有可比性。528例研究对象中，病例组年龄19～90(60.90±12.44)岁，男性185例 (70.10%)，女性79例 (29.90%)，吸烟者149例 (56.40%)，饮酒者67例 (25.40%)；对照组年龄20～92(61.75±14.92)岁，男性184例 (69.70%)，女性80例 (30.30%)，吸烟者139例 (52.65%)，饮酒者61例 (23.10%)。

2.2 对照组的Hardy-Weinberg遗传平衡定律检验

ERCC1基因C8092A位点SNP分布的观察数和预期数之间差异无统计学意义(

P

>0.05)，符合 Hardy-Weinberg遗传平衡定律，对照组样本具有群体代表性，见表1。

2.3 ERCC1基因C8092A位点SNP与肺癌易感性的关联

ERCC1基因C8092A位点有3种基因型：野生型 (CC)、杂合型 (CA)、突变纯合型 (AA)。病例组与对照组基因分布差异有统计学意义(χ=34.125,

P

<0.001)。与携带CC基因型个体相比，携带CA基因型个体肺癌发病风险显著降低，其

OR

值为0.380。校正混杂因素，年龄、性别、吸烟、饮酒后，ERCC1基因C8092A位点SNPs与肺癌的易感性仍表现相关，与CC基因型比较，CA基因型患肺癌的风险降低。与CC基因型比较，AA基因型患肺癌的风险无显著变化(表2)。

表1 对照组的ERCC1基因C8092A位点SNP Hardy-Weinberg遗传平衡检验

2.4 年龄分层后ERCC1基因C8092A位点SNP与肺癌遗传易感性的关联

对年龄进行分层分析发现，在≥61岁年龄组中，与CC基因型比较，CA基因型患肺癌的风险降低。校正性别、吸烟情况、饮酒情况后，CA基因型患肺癌的风险仍降低(表3)。

2.5 性别分层后ERCC1基因C8092A位点SNP与肺癌遗传易感性的关联

对性别进行分层分析发现，在男性中，与CC基因型比较，CA基因型患肺癌的风险降低，在女性中，与CC基因型比较，CA基因型患肺癌的风险降低。校正年龄、吸烟情况、饮酒情况后，CA基因型患肺癌的风险仍降低(表4)。

2.6 吸烟分层后ERCC1基因C8092A位点SNP与肺癌遗传易感性的关联

对吸烟情况进行分层分析显示，在吸烟组中，与CC基因型比较，CA基因型患肺癌的风险降低。在不吸烟组中，与CC基因型比较，CA基因型患肺癌的风险也降低。校正性别、年龄、饮酒情况后，CA基因型患肺癌的风险仍降低(表5)。

表2 ERCC1基因C8092A位点SNP与肺癌易感性的关系[n=264,n(%)]

表3 根据年龄分层后ERCC1基因C8092A位点SNP与肺癌遗传易感性的关联

表4 根据性别分层后ERCC1基因C8092A位点SNP与肺癌遗传易感性的关联

表5 根据吸烟分层后ERCC1基因C8092A位点SNP与肺癌遗传易感性的关联

表6 根据饮酒分层后ERCC1基因C8092A位点SNP与肺癌遗传易感性的关联

2.7 根据饮酒分层后ERCC1基因C8092A位点SNP与肺癌遗传易感性的关联

对饮酒情况进行分层分析发现，在饮酒组中，与CC基因型比较，CA基因型患肺癌的风险降低。在不饮酒组中，与CC基因型比较，CA基因型患肺癌的风险降低。校正性别、年龄、吸烟情况后，CA基因型患肺癌的风险仍降低(表6)。

3 讨论

肺癌是全世界癌症相关死亡的主要原因之一。肺癌的危险因素包括吸烟、被动吸烟、非肿瘤性肺部疾病、肿瘤家族史、大气污染、室内油烟、免疫性疾病、饮食因素、社会精神因素、体质指数和HIV病毒感染与职业性暴露等。

郭燕 等研究结果显示128例鳞癌患者中ERCC1阳性率64.1%，240例腺癌患者中ERCC1阳性者阳性率为50%，两组间差异有统计学意义 (

P

<0.05)。Lv et al研究表明ERCC1基因多态性可能影响ERCC1 mRNA表达或稳定及蛋白质功能，可使NER功能受影响，增加基因组的不稳定性，引起肿瘤或其他疾病发生恶性转化。戴俊程 等选取1 010例肺癌患者和1 011例正常对照，采用基于通路的候选基因选点策略，从NER相关的8个核心基因中筛选出40个标签SNPs进行检测和分析，结果显示6个SNPs (ERCC1 2个, DDB2 2个, ERCC4/XPF 1个, XPC 1个) 与肺癌的易感性相关。调整年龄、性别、吸烟史和肿肿瘤家族史后，仍有3个SNPs (ERCC1 rs3212948, DDB2 rs830083, ERCC4 rs3136038) 与肺癌易感性存在关联。该研究结果显示携带ERCC1 C8092A位点CA基因型个体的肺癌遗传易感性降低 (CA

vs

CC，

OR

=0.380, 95%

CI

: 0.267～0.541,

P

<0.001)；校正混杂因素年龄、性别、吸烟、饮酒后CA基因型患肺癌的风险降低 (校正

OR

=0.380, 95%

CI

: 0.262～0.538,

P

<0.001)。张增利研究发现携带ERCC1野生纯合基因型 (C/C) 且不吸烟者作为参照,每年吸烟>25包且携带野生纯合基因型 (C/C) 或杂合基因型 (C/T) 者患肺癌的风险均会提高 (

OR

=2.62, 95%

CI

: 1.54～4.44;

OR

=2.41, 95%

CI

: 1.36～4.26,

P

<0.01)。说明ERCC1 C118T位点基因多态与吸烟联合作用会增加患肺癌的风险。而本研究未将CC基因型中不吸烟者作为参照，按吸烟分层后发现ERCC1 C8092A位点CA基因型个体患肺癌风险较低。逯晓波 等研究发现ERCC1 C8092A位点基因多态性与肺癌易感性有关，其AA基因型携带者比CC基因型携带者患肺癌的风险高，尤其在男性中更为显著(

OR

=2.718, 95%

CI

: 1.066～6.931,

P

>0.05)。而本研究结果为无论男女，与CC基因型比较，CA基因型患肺癌的风险均降低。分析其原因可能为该研究对象为东北人群，而本研究对象为海南人群，不同地域人群基因型遗传易感性存在差异，因此需要通过进一步扩大样本量和人群分布范围，同时也应考虑环境因素、肿瘤病理分期、多基因作用等多种混杂因素，以得到更可靠的结论。

综上，ERCC1 C8092A位点CA基因型个体患肺癌风险显著低于其他基因型，可为我国肺癌的防治工作提供科学的理论依据。