免疫组化技术在制作病理组织切片中的应用价值分析

李博

大庆油田总医院,黑龙江 大庆 163001

在恶性肿瘤诊断中组织病理诊断一直是金标准[1]，也是主要方式，在病理组织切片制作过程中，免疫组化技术就是主要的一种，是通过染色反应，对细胞内抗原或组织进行定位，在恶性肿瘤诊断、鉴别、预后判定等方面被广泛应用。有着操作简单、标本保存时间长、定位准确等优点[2]。为了进一步确定其应用价值本院进行了此次研究，详情如下：

1 资料和方法

1.1一般资料 将90例2019年9月-2020年9月在本院做病理组织检验患者的病理组织标本作为本次研究对象，并利用数字表法分组，随机分成各45片(例)。对照组患者35～65岁，中间值(49.62±5.58)岁，男女比例20:25，标本来源：8例胃癌、7例乳腺癌、12例肺癌、18例肝癌。研究组患者37～68岁，中间值(43.71±5.26)岁，男女比例21:24，标本来源：9例胃癌、6例乳腺癌、13例肺癌、17例肝癌。比较两组标本及患者的基础信息无显著差异(P>0.05)，不会对研究结果产生影响。

1.2方法

1.2.1对照组 在病理组织切片制作过程中采用传统方法，①病理组织离体后30分钟内固定处理，放到低温环境中或是放在固定液中保存。之后将其放到10%中性缓冲甲醛溶液内，处理8～24小时[3]。②经过处理的标本通过热修复法，修复和引导抗原，抗原修复时间为3～15分钟，修复液pH值7.5～8.5，修复温度大于100℃。③根据病理组织切片制作流程规范操作，为了防止发生边缘效应，要均匀添加试剂、剂量充足，脱蜡时间充足，试剂面积比切片组织大0.05～0.35cm。

1.2.2研究组 在病理组织切片制作过程中采用免疫组化技术，①在室温环境中，进行常规脱蜡切片操作，之后在3%双氧水中浸泡组织标本20分钟，再对组织切片反复冲洗三次，冲洗液为磷酸盐缓冲液，每次冲洗时长为5分钟，共冲洗15分钟[4]。②在1000mL烧杯中放入pH值为6的柠檬酸缓冲液(700mL)，加热到沸腾状态，将组织切片放入其中，继续加热15分钟取出，所有切片滴加一抗后进行过夜孵育，冰箱温度为40℃。③取出组织切片，使用磷酸盐缓冲液反复冲洗三次，每次5分钟[5]。④在室温状态下，所有切片滴加二抗，进行15分钟的孵育，之后再次使用磷酸盐缓冲液反复冲洗三次，每次5分钟。⑤把组织切片放到显色剂中5～10分钟，取出后用苏木精衬染、水洗，再用脱水透明树胶封固。

1.3观察指标 对两组病理组织切片制作质量做评估，显微镜下不容易观察，对比不明显，气泡或褶皱较多、组织结构受损、编号不清，则为差质片；显微镜下比较容易观察，没有脱片、非特异性着色等情况，无气泡或污染，褶皱少，无组织结构受损，则为良质片；显微镜下非常容易观察，染色明显，可见清晰的细胞形态、没有裂痕损害情况，薄厚均匀，组织结构完整，则为优质片。

1.4统计学分析 借助SPSS22.0软件处理研究数据，x2检验定数资料，用百分比描述，统计学意义成立时P<0.05。

2 结 果

研究组差质片2片(4.44%)、良质片16片(35.56%)、优质片27片(60.00%)，制片优良率为95.56%；对照组差质片12片(26.67%)、良质片18片(40.00%)、优质片15片(33.33%)，制片优良率为73.33%，统计学意义成立(P<0.05)。

3 讨 论

在恶性肿瘤病理组织学诊断中，免疫组化技术是主要技术，有着较高的准确率[6]。所谓免疫组化，主要是定位、定性、定量分析病理组织中的抗原，从根本上讲，免疫组化显色属于酶催化作用，在与抗原抗体复合物中的过氧化物、底物、碱性磷酸酶产生反应过程中，产生的复合物带有相应的颜色，同时在组织、细胞抗原中沉淀，所以可以体现出组织病理的阳性表达情况。细胞标本、石蜡切片是两种常用的病理组织标本，后者应用率更高[7]。与传统的制作病理组织切片的技术相比较，免疫组化技术不仅准确性高，而且敏感性好、反应时间短，能鉴别肿瘤细胞属性、确定肿瘤分期、判定肿瘤性质。另外，有研究表明[8]，在未分化的恶性肿瘤分类诊断中，免疫组化技术也有着良好的效果。

在此次研究中，利用免疫组化技术的研究组，制片优良率为95.56%，利用传统制片技术的对照组仅为73.33%，统计学意义成立(P<0.05)。充分说明，免疫组化技术的运用有助于改善病理组织制片质量，染色明显，组织结构完整不容易受损，不容易产生气泡或褶皱，细胞形态清晰可见，在显微镜下更容易观察。

总而言之，在制作病理组织切片中免疫组化技术有着较高的应用价值，制片质量更高，有助于提高病理检验水平，值得深入推广应用。