印度梨形孢对铁皮石斛种子萌发和原球茎生长的影响

许凤来，朱志炎，何勇，田志宏

印度梨形孢对铁皮石斛种子萌发和原球茎生长的影响

许凤来，朱志炎，何勇，田志宏*

(长江大学生命科学学院，湖北 荆州 434025)

为探究印度梨形孢()对铁皮石斛()种子萌发和原球茎生长的影响，在铁皮石斛种子离体培养和原球茎生长阶段分别接种印度梨形孢，对其形态发育特征和生理特性进行研究。结果表明，接种印度梨形孢的铁皮石斛种子的起始萌发时间提前，接种印度梨形孢的铁皮石斛原球茎的株高、鲜质量、干质量、叶片数、叶长、叶宽、根数、根长等都高于对照。在接种60 d的种子萌发率为68.8%，高于对照(28.6%)；在接种80 d的铁皮石斛原球茎的叶绿素a、叶绿素b、总叶绿素含量显著高于对照，叶绿素a/b小于对照，净光合速率、气孔导度、蒸腾速率均高于对照，药用多糖含量显著高于对照。因此，接种印度梨形孢能促进铁皮石斛种子萌发和原球茎的生长，提高铁皮石斛的品质和产量。

铁皮石斛；印度梨形孢；种子；萌发；原球茎；生长

目前，药用石斛属()植物有40多种,其中铁皮石斛()是栽培面积最大的种类, 其干燥茎是珍贵的药材，素有“药中黄金”之称[1]。铁皮石斛含有多糖、芪类、联苄类、生物碱等化学成分, 多糖具有调节免疫力和调节肝细胞活性的药理作用,生物碱具有抗氧化、抗癌和神经保护的药理作用，其他化合物具有抗氧化、抗癌和提高免疫力的药理作用[2–3]。铁皮石斛具有益胃生津、滋阴清热、明目强身等功效[1]，其提取物具有抑制肝癌细胞增殖、生津改善干燥症、促进头发生长等多种药用价值[4–6]。

印度梨形孢()是一种根部内生真菌，可定殖多个厚垣孢子于多种植物的根系中，促进植物的生长和发育，增强植物对胁迫的抵抗力，提高作物产量。其可缩短水稻()、玉米()、烟草()等种子的萌发时间，同时明显提高种子的萌发率和生长速率[7]，对甘蔗()、辣椒()、甘蓝()、向日葵()、番茄()、吊兰()等有明显促进生长的作用[8–9]，也能促进纹瓣兰()的生长和增加假马齿苋()的生物量[10–11]。印度梨形孢能促进兰科幼苗的生长[12]，但尚未有提高兰科种子萌发率的报道。鉴于印度梨形孢对植物种子萌发和幼苗生长发育的作用，我们推测印度梨形孢可能对铁皮石斛种子萌发和原球茎生长产生积极影响，以期后续能推进印度梨形孢生物菌肥的研发，提高铁皮石斛的品质和产量。

1 材料和方法

1.1 材料

铁皮石斛()种子和原球茎由江苏同人生物科技有限公司牟永花女士惠赠，为来自浙江省雁荡山地方种选育的‘同人1号’品种; 印度梨形孢()菌种由德国耶拿大学Ralf Oelmüller教授和台湾大学叶开温教授惠赠，本实验室保存，在PDA培养基上活化待用。

1.2 方法

培养基 铁皮石斛种子萌发培养基为MS+ 10 g/L香蕉粉+8 g/L琼脂；原球茎生长培养基为1/2MS+100 g/L马铃薯+8 g/L琼脂，pH均调至5.8。

种子萌发试验 将无菌的铁皮石斛种子放置到MS液体培养基(无糖)中，充分摇匀，制作成种子悬浮液，浸泡30 min，吸取1 000L均匀播种于铺有无菌滤纸的萌发培养基上。用接种器取边缘活力强的印度梨形孢菌丝体，在培养基中间添加3 mm带有印度梨形孢的琼脂块，对照为同样大小的不含印度梨形孢的PDA琼脂块。每处理20个培养皿, 3次重复。铁皮石斛种子萌发阶段划分参照吴慧凤等[13]的方法。

种子萌发阶段划分 铁皮石斛种子在萌发培养基上吸水膨胀，种皮透明，完整，为阶段0; 30 d左右进入阶段1，种胚膨大，转绿；60 d左右进入阶段2，种子突破种皮，种子开始萌发；出现原生组织为阶段3；长出第1片叶为阶段4；长出第2片叶为阶段5 (图1)。

原球茎生长 每个培养瓶里放置6个原球茎,呈圆形排列。在培养基中间添加3 mm带有印度梨形孢的琼脂块，对照为同样大小的不含印度梨形孢的PDA琼脂块。每处理60个培养瓶，3次重复。

图1 铁皮石斛种子萌发过程。A: 阶段0; B: 阶段1; C: 阶段2; D: 阶段3; E: 阶段4; F: 阶段5。

1.3 印度梨形孢定殖观察

随机选取处于第2阶段铁皮石斛种子，先用无菌水冲洗3次，用10% KOH浸泡16 h，再用无菌水冲洗3次，再用1% HCl浸泡30 min，然后用0.05%台盼蓝染色7~10 min后用无菌水冲洗3次。在显微镜下观察印度梨形孢是否定殖，使用正置显微镜拍照。

印度梨形孢与铁皮石斛原球茎共培养7、10、15 d时随机选取原球茎，用无菌水冲洗3次，徒手纵切成厚度为0.05~0.1 cm的小片。取生长40 d的原球茎的根，用无菌水洗涤3次，徒手纵切根系成长1 cm，厚度0.05~0.1 cm的小段，用上述方法处理后观察印度梨形孢在原球茎阶段的定殖情况。

1.4 生理指标的测定

取铁皮石斛与印度梨形孢共生的种子在体式显微镜下统计萌发率。最早萌发时间参照Stewart等的方法[14]，参照周雨等的方法[15]，以阶段3为萌发标准，随机取3个视野统计萌发率。原球茎接种印度梨形孢80 d时，分别测定株高、鲜质量、干质量、叶片数、叶长、叶宽、根数和根长，取9个原球茎统计生物量，重复3次。

原球茎接种印度梨形孢80 d时，选择从下往上第2、3叶片测定叶绿素含量，用紫外可见分光光度计在663和645 nm波长下测定吸光度，参照Arnon的公式计算[16]。接种印度梨形孢80 d的早上9:00- 11:00，使用Li-6400便捷式光合测定仪，选择从下往上第3片叶测定净光合速率、气孔导度、蒸腾速率，PFD设定为1 000mol/(m2·s)，温度(25±1)℃，CO2浓度(390±10)L/L，每组测定3株，3次重复。接种印度梨形孢80 d时取原球茎的茎，采用超声提取水溶性多糖，用苯酚-硫酸方法测定多糖含量[17]。

2 结果和分析

2.1 对种子萌发的影响

从图2可见，印度梨形孢处理的铁皮石斛种子起始萌发时间约22 d，对照约60 d。接种印度梨形孢的种子发育形成的原球茎更绿、更大，生长速度较快；对照种子发育形成的原球茎偏小, 颜色偏黄，生长速度较慢。接种印度梨形孢22 d的铁皮石斛种子萌发率约为31.8%，接种60 d的萌发率约为68.8%，而对照仅为28.6%。这表明印度梨形孢处理的种子萌发提前了约38 d，萌发率提高了40.2%。

图2 印度梨形孢对铁皮石斛种子萌发的影响

2.2 对原球茎生长和叶绿素含量的影响

与对照相比，接种印度梨形孢的铁皮石斛原球茎的株高、鲜质量、干质量、叶片数、叶长、叶宽、根数和根长均有提高(表1)，且随接种时间延长持续促进原球茎生长(图3)。接种80 d的原球茎叶绿素含量比对照高(表2)，叶绿素a/b则小于对照, 这表明叶片中的叶绿素a、叶绿素b含量比对照的更稳定。

表1 接种印度梨形孢80 d的铁皮石斛原球茎的生长特性

*:<0.05; **:<0.01。下表同。

*:<0.05; **:<0.01. The same is following Tables.

表2 接种印度梨形孢80 d的铁皮石斛原球茎叶绿素含量

图3 印度梨形孢接种对铁皮石斛原球茎生长的影响。A: 20 d; B: 40 d; C: 60 d; D: 80 d。

2.3 对原球茎叶片光合特性和多糖的影响

接种印度梨形孢80 d的铁皮石斛原球茎叶片的光合性能和多糖含量均有提高(表3)，接种印度梨形孢的原球茎叶片净光合速率比对照显著提高了59.47%，其多糖含量是对照的1.29倍。

2.4 印度梨形孢的定殖

取处于萌发第2~3阶段的种子用台盼蓝染色检测，在显微镜下可观察到印度梨形孢孢子贴着铁皮石斛的种皮，并通过表皮毛进入种子(图4: E)。

印度梨形孢与原球茎共生7、10和15 d时，随机选取10个原球茎用台盼蓝染色检测，在显微镜下可见印度梨形孢孢子通过表皮毛进入原球茎组织中(图4: A~C)。共培养7 d时印度梨形孢孢子接触到处于种子萌发第3阶段的原球茎表皮毛(图4: A)；共培养10 d时孢子开始进入处于种子萌发第4阶段的原球茎表皮毛中(图4: B)；到共培养15 d时原球茎处于种子萌发的第4阶段，孢子大量进入原球茎表皮毛中(图4: C)；共生40 d时原球茎处于种子萌发的第5阶段，可见孢子定殖到原球茎根部细胞内或细胞间(图4: D)。

表3 共培养80 d时印度梨形孢对铁皮石斛原球茎光合参数和多糖的影响

3 结论和讨论

姜鹏等提出兰科植物种子萌发阶段和成年兰花阶段有较多的真菌种类与其共生，幼苗阶段的共生真菌种类较少[18]，真菌可能同时出现在多个时期，也可能只出现在其中的一个时期。本试验证实在铁皮石斛种子和原球茎发育阶段分别接种印度梨形孢，可以达到共生的目的。不同兰科植物对共生萌发真菌的专一性不同，有些植物对特定真菌具有偏好性，有些植物呈现泛化的特征，如火烧兰属植物()可与多种真菌共生[19]。有研究表明，瘤菌根菌属、丝核菌属、角菌根菌属、小菇属真菌可侵染铁皮石斛幼苗，枝孢霉菌、胶膜菌属等真菌可侵染铁皮石斛种子[20–24]。因此，我们推测促进铁皮石斛种子萌发的真菌可能具有一定的泛化特征，但这仍需更多的试验来验证。

兰科植物种子细小且无胚乳，共生微生物可以促进种子发芽，而且可以使成年植物更好地适应环境压力，通常情况下兰科种子与适宜的内生真菌共生后能够较好萌发[25]。王亚妮等报道菌根真菌与兰科植物共生时能主动分泌赤霉素、吲哚乙酸、脱落酸等多种植物激素和生长调节类物质，从而打破细胞休眠，刺激细胞分裂分化，促进兰科植物种子萌发和植株生长[26]。据报道印度梨形孢侵染大麦()后，其植物生长素、赤霉素、脱落酸生长激素代谢基因上调表达[27]。通过镜检，推断印度梨形孢孢子可能是在种子萌发的第0和1阶段粘附种皮，提高铁皮石斛种子的抗逆能力，在第2和3阶段通过表皮毛作用于种子，刺激种子分泌相关生长素，加快种子生长发育。

印度梨形孢可以与被子植物、裸子植物、苔藓植物和蕨类植物共生，提高植物的生物量[28–33]。据报道印度梨形孢可以促进兰科植物的生长[34–35]。本研究表明，印度梨形孢在根没有长出时通过表皮毛作用于原球茎，这和种子的侵入方式相同，在根长出后，再次侵入到已经生长为幼苗的原球茎。与对照相比，接种印度梨形孢80 d的原球茎的叶绿素a、叶绿素b、总叶绿素、多糖含量和净光合速率均提高，推断印度梨形孢可能是通过增强铁皮石斛叶片的光合性能，从而促进原球茎的生长，提高多糖含量。印度梨形孢对铁皮石斛原球茎具有显著促进生长的作用，而印度梨形孢促进铁皮石斛种子萌发、原球茎生长的作用机制还有待深入研究。

[1] Chinese Pharmacopoeia Commission. Pharmacopoeia of the People’s Republic of China, Vol. 1 [M]. Beijing: China Medical Science and Technology Press, 2015: 282–283. 国家药典委员会. 中华人民共和国药典, 一部 [M]. 北京: 中国医药科技出版社, 2015: 282–283.

[2] SUN H, HU Q, JIN H, et al. Research advances in chemical consti- tuents and pharmacological activities of[J]. Chin J Exp Trad Med Formul, 2017, 23(11): 225–234. doi: 10.13422/ j.cnki.syfjx.2017110225.孙恒, 胡强, 金航, 等. 铁皮石斛化学成分及药理活性研究进展 [J]. 中国实验方剂学杂志, 2017, 23(11): 225–234. doi: 10.13422/j.cnki. syfjx.2017110225.

[3] NG T B, LIU J Y, WONG J H, et al. Review of research on, a prized folk medicine [J]. Appl Microbiol Biotechnol, 2012, 93(5): 1795–1803. doi: 10.1007/s00253-011-3829-7.

[4] GUO Z B, ZHOU Y M, YANG J P, et al.extract inhibits proliferation and induces apoptosis of liver cancer cells by inactivating Wnt/-catenin signaling pathway [J]. Biomed Pharma- cother, 2019, 110: 371–379. doi: 10.1016/j.biopha.2018.11.149.

[5] XIAO L, NG T B, FENG Y B, et al.extract increases the expression of aquaporin-5 in labial glands from patients with Sjögren’s syndrome [J]. Phytomedicine, 2011, 18(2–3): 194–198. doi: 10.1016/j.phymed.2010.05.002.

[6] CHEN J, QI H, LI J B, et al. Experimental study onpolysaccharides on promotion of hair growth [J]. China J Chin Mat Med, 2014, 39(2): 291–295. doi:10.4268/cjcmm20140225.陈健, 戚辉, 李金标, 等. 铁皮石斛多糖促进毛发生长的实验研究[J]. 中国中药杂志, 2014, 39(2): 291–295. doi:10.4268/cjcmm2014 0225.

[7] VARMA A, VERMA S, SUDHA, et al., a cultivable plant-growth-promoting root endophyte [J]. Appl Environ Microbiol, 1999, 65(6): 2741–2744. doi: 10.1128/AEM.65.6.2741-2744. 1999.

[8] VARMA A, BAKSHI M, LOU B G, et al.: A novel plant growth-promoting mycorrhizal fungus [J]. Agric Res, 2012, 1(2): 117–131. doi: 10.1007/s40003-012-0019-5.

[9] SU Z Z, WANG T, SHRIVASTAVA N, et al.promotes growth, seed yield and quality ofL. [J]. Microbiol Res, 2017, 199: 29–39. doi: 10.1016/j.micres.2017.02.006.

[10] SHAH S, THAPA B B, CHAND K, et al.promotes the growth of the-raisedplantlet and their acclimatization [J]. Plant Signal Behav, 2019, 14(6): 1596716. doi: 10.1080/15592324.2019.1596716.

[11] PRASAD R, KAMAL S, SHARMA P K, et al. Root endophyteDSM 11827 alters plant morphology, enhances biomass and antioxidant activity of medicinal plant[J]. J Bas Microbiol, 2013, 53(12): 1016–1024. doi: 10.1002/jobm. 201200367.

[12] CAO X X. Isolation and identification of pathogenic fungi causing diseases onand the research of growth- promoting effect of[D]. Hangzhou: Zhejiang University, 2015. 曹星星. 铁皮石斛病原真菌分离与鉴定及印度梨形孢促生作用研究 [D]. 杭州: 浙江大学, 2015.

[13] WU H F, SONG X Q, LIU H X.symbiotic seed germination of[J]. Acta Ecol Sin, 2012, 32(8): 2491–2497. doi: 10.5846 / stxb201101280147.吴慧凤, 宋希强, 刘红霞. 铁皮石斛种子的室内共生萌发[J]. 生态学报, 2012, 32(8): 2491–2497. doi: 10.5846 /stxb201101280147.

[14] STEWART S L, ZETTLER L W. Symbiotic germination of three semi- aquatic rein orchids (,,) from Florida [J]. Aquat Bot, 2002, 72(1): 25–35. doi: 10.1016/ S0304-3770(01)00214-5.

[15] ZHOU Y, FU Q, WANG Y, et al. Effects of different hormones on seed sterile germination and cultivation of[J]. Seed, 2019, 38(2): 83–85,88. doi: 10.16590/j.cnki.1001-4705.2018.02.083.周雨, 付巧, 汪意, 等. 不同激素对白及种子无菌萌发生长的影响 [J]. 种子, 2019, 38(2): 83–85,88. doi: 10.16590/j.cnki.1001-4705.2018. 02.083.

[16] LI H S. Principles and Techniques of Plant Physiological Biochemical Experiment [M]. Beijing: Higher Education Press, 2000: 35–160. 李合生. 植物生理生化实验原理和技术 [M]. 北京: 高等教育出版社, 2000: 35–160.

[17] JIN R, XIE W H, CHEN J B, et al. Effects of ultrasonic-assisted hot water extraction on the yield and structure of water soluble polysac- charides from[J]. J Zhejiang Univ (Agric Life Sci), 2019, 45(2): 196–204. doi: 10.3785/j.issn.1008-9209.2018.04. 161.金蓉, 谢文华, 陈杰标, 等. 超声辅助热水提取对铁皮石斛水溶性多糖得率和结构的影响 [J]. 浙江大学学报(农业与生命科学版), 2019, 45(2): 196–204. doi: 10.3785/j.issn.1008-9209.2018.04.161.

[18] JIANG P, FAN L. The application of research methods in the symbiosis between orchids and fungi [J]. Mycosystema, 2009, 28(6): 895–901. 姜鹏, 范黎. 兰科植物与真菌共生关系研究方法及其应用[J]. 菌物学报, 2009, 28(6): 895–901.

[19] GAO Y, CHEN Y H, XING X K. Symbiotic fungi inducing seed germination of medicinalof Orchidaceae [J]. Mycosystema, 2019, 38(11): 1948–1957. doi: 10.13346/j.mycosystema. 190208.高越, 陈艳红, 邢晓科. 兰科药用植物手参种子的真菌共生萌发[J]. 菌物学报, 2019, 38(11): 1948–1957. doi: 10.13346/j.mycosystema. 190208.

[20] WANG W Y, ZOU H, DAI Y M, et al. Effect ofsp. on root morphology ofand their symbiotic relationship [J]. J Trop Subtrop Bot, 2020, 28(2): 124–130. doi: 10.11926/jtsb.4093.王伟英, 邹晖, 戴艺民, 等. 瘤菌根菌对铁皮石斛根系形态的影响及其共生关系的研究[J]. 热带亚热带植物学报, 2020, 28(2): 124– 130. doi: 10.11926/jtsb.4093.

[21] KANG Z H, HAN S F, HAN Z M. Effects of Orchidaceous rhizoc- tonias on the growth of[J]. J Nanjing For Univ (Nat Sci), 2007, 31(5): 49–52. doi:10.3969/j.issn.1000-2006.2007.05. 011.亢志华, 韩素芬, 韩正敏. 兰科丝核菌类真菌对铁皮石斛生长的影响[J]. 南京林业大学学报(自然科学版), 2007, 31(5): 49–52. doi:10. 3969/j.issn.1000-2006.2007.05.011.

[22] GAO W W, GUO S X. Effects of endophytic fungal hyphae and their metabolites on the growth ofand[J]. Acta Acad Med Sin, 2001, 23(6): 556–559. 高微微, 郭顺星. 内生真菌菌丝及代谢物对铁皮石斛及金线莲生长的影响 [J]. 中国医学科学院学报, 2001, 23(6): 556–559.

[23] YANG J W, CHEN X M, MENG Z X, et al. Effects of fungus S7 (sp.) and extracts on the germination ofseeds [J]. Sci Sin Vit, 2020, 50(5): 559–570. 杨建文, 陈晓梅, 孟志霞, 等. 胶膜菌属真菌S7 (sp.)及提取物对铁皮石斛种子萌发的影响 [J]. 中国科学: 生命科学, 2020, 50(5): 559–570.

[24] WANG Z C. Response mechanisms ofinoculated withand key environmental factors for its seed germination [D]. Chongqing: Southwest University, 2019. 王兆春. 铁皮石斛接种枝孢霉菌的响应机制及其种子萌发关键环境因子研究 [D]. 重庆: 西南大学, 2019.

[25] TEIXEIRA DA SILVA J A,TSAVKELOVA E A, ZENG S J, et al. Symbioticseed propagation ofFungal and bacterial partners and their influence on plant growth and development [J]. Planta, 2015, 242(1): 1–22. doi: 10.1007/s00425-015-2301-9.

[26] WANG Y N, WANG L K, MIAO Z B, et al. Research advances in mycorrhizal fungi of(Orchidaceae) [J]. J Trop Subtrop Bot, 2013, 21(3): 281–288. doi:10.3969/j.issn.1005-3395.2013.03.015.王亚妮, 王丽琨, 苗宗保, 等. 兰科石斛属植物菌根真菌研究进展 [J]. 热带亚热带植物学报, 2013, 21(3): 281–288. doi:10.3969/j.issn. 1005-3395.2013.03.015.

[27] SCHÄFER P, PFIFFI S, VOLL L M, et al. Manipulation of plant innate immunity and gibberellin as factor of compatibility in the mutualistic association of barley roots with[J]. Plant J, 2009, 59(3): 461–474. doi: 10.1111/j.1365-313X.2009.03887.x.

[28] CHENG C Z, SUN X L, HAO X Y, et al. Effects oftreatment on seed germination and seedling growth of longan plants [J]. Fujian J Agric Sci, 2018, 33(5): 481–484. doi:10.19303/j. issn.1008-0384.2018.05.006.程春振, 孙雪丽, 郝向阳, 等. 印度梨形孢对龙眼种子萌发和幼苗生长的影响 [J]. 福建农业学报, 2018, 33(5): 481–484. doi:10. 19303/j.issn.1008-0384.2018.05.006.

[29] JISHA S, SABU K K. Multifunctional aspects ofin plant endosymbiosis [J]. Mycology, 2019, 10(3): 182–190. doi: 10.1080/21501203.2019.1600063.

[30] ZHOU X Y, LIANG Y, DONG Z, et al. Effects ofon growth and root morphology ofseedlings [J]. J Shandong Univ (Nat Sci), 2018, 53(7): 7–14. doi: 10.6040/j.issn. 1671-9352.0.2018.019.周晓莹, 梁玉, 董智, 等. 印度梨形孢对黑松幼苗生长量及其根系形态的动态影响 [J]. 山东大学学报(理学版), 2018, 53(7): 7–14. doi: 10.6040/j.issn.1671-9352.0.2018.019.

[31] WU J D, CHEN Q, LIU X X, et al. Preliminary study on mechanisms of growth promotion in rice colonized by[J]. Chin J Rice Sci, 2015, 29(2): 200–207. doi: 10.3969/j.issn.1001-7216. 2015.02.012.吴金丹, 陈乾, 刘晓曦, 等. 印度梨形孢对水稻的促生作用及其机理的初探 [J]. 中国水稻科学, 2015, 29(2): 200–207. doi: 10.3969/j. issn.1001-7216.2015.02.012.

[32] WANG H L, ZHENG J R, ZHENG X D. Effect ofon the growth and nutritional quality of Chinese celery (L.) [J]. J Chin Inst Food Sci Technol, 2017, 17(6): 124–130. doi:10.16429/j.1009-7848.2017.06.017.王慧俐, 郑积荣, 郑晓冬. 印度梨形孢对芹菜的生长及营养品质的影响 [J]. 中国食品学报, 2017, 17(6): 124–130. doi:10.16429/j.1009- 7848.2017.06.017.

[33] LIN H F, XIONG J, ZHOU H M, et al. Growth promotion and disease resistance induced incolonized by the beneficial root endo- phyte[J]. BMC Plant Biol, 2019, 19(1): 40. doi: 10.1186/s12870-019-1649-6.

[34] LIU H C, LI M J, JIN L, et al. Effect of Piriformospora indica on tissue cultured seedling growth oforchid [J]. Zhejiang Agric Sci, 2019, 60(4): 642–645. doi: 10.16178/j.issn.0528-9017.20190436.刘慧春, 李明江, 金亮, 等. 印度梨形孢对文心兰组培苗生长的影响 [J]. 浙江农业科学, 2019, 60(4): 642–645. doi: 10.16178/j.issn. 0528-9017.20190436.

[35] YE W, SHEN C H, LIN Y L, et al. Growth promotion-related miRNAs inorchid roots colonized by the endophytic fungus[J]. PLoS One, 2014, 9(1): e84920. doi: 10.1371/ journal.pone.0084920.

Effects ofon Seed Germination and Protocorm Growth of

XU Feng-lai, ZHU Zhi-yan, HE Yong, TIAN Zhi-hong*

(College of Life Science, Yangtze University, Jingzhou 434025, Hubei, China)

In order to explore the effects ofon seed germination and protocorm growth of, the morphological and physiological characteristics were studied inoculated byon seeds and protocorm. The results showed that the initial germination time ofseeds inoculated withwas earlier than the control, and the height, fresh weight, dry weight, number of leaves, leaf length, leaf width, root number and root length of protocorm ofinoculated withwere higher than the control. The seed germination rate was 68.8% after 60 days of inoculation, which was higher than the control (28.6%). The chlorophyll a content, chlorophyll b content and total chlorophyll content in the protocorm ofinoculated for 80 days were significantly higher than the control, chlorophyll a/b was lower than the control, the net photosynthesis rate, stomatal conductance and transpirationrate were higher than the control, and the content of medicinal polysaccharide was significantly higher than the control. Therefore, the seed germination and protocorm growth ofwere promoted by inoculation, and the quality and yield were improved.

;; Seed; Germination; Protocorm; Growth

10.11926/jtsb.4231

2020–04–03

2020–06–12

湖北省生物菌肥工程技术研究中心项目(GCZX2012042)资助

This work was supported by the Project of Hubei Biological Fertilizer Engineering Technology Research Center (Grant No. GCZX2012042).

许凤来(1995~ ), 女, 硕士研究生, 从事植物与微生物互作研究。E-mail: 2731438573@qq.com.

E-mail:zhtian@yangtzeu.edu.cn