BDNF 基因rs6265 位点多态性与产后抑郁及血清叶酸水平的关系

钱莉，史政阳，侯晓俊

（南阳市中心医院，河南 南阳 473000）

产后抑郁症（Postpartum depression, PPD）是发生在产褥期的情绪障碍性疾病，主要表现为抑郁，食欲不振，睡眠障碍，烦躁，焦虑，缺乏兴趣，注意力不集中，甚至出现幻觉[1]，严重影响孕产妇健康和婴儿的生长发育，因此，早期诊断和治疗对改善母婴预后具有重要意义。PPD 与普通抑郁症有相似的发病机制[2]，有许多研究表明了抑郁症患者的遗传易感性。另有研究表明，叶酸水平降低与抑郁症有一定关系,使用叶酸或将其与抗抑郁药联合可用来改善抑郁症状[3,4]。但是，也研究认为低叶酸水平与抑郁症没有关系[5]。脑源性神经营养因子（Br ain-derived neurotrophicfactor,BDNF） 是脑中含量最多的神经营养因子,在中枢神经系统的发育中起重要作用。近年来，BDNF 基因被看作是抑郁症的潜在基因[6]，相关研究主要针对基因与疾病本身的关联，但结果并不十分一致。对BDNF 基因和抑郁症相关性的进一步遗传学研究主要集中在BDNF基因rs6265 位点的多态性[7],而关于BDNF 基因rs6 265 与PPD 的关系却鲜有报道。本研究旨在探讨BDNF 基因rs6265 位点多态性与产后抑郁及血清叶酸水平的关系，报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取 2017 年 1 月至 2019 年 3 月在我院治疗的产后抑郁患者110 例 （观察组），同时选取健康产褥期妇女220 例作为对照组。纳入标准：⑴均为初产妇；⑵诊断符合中国精神障碍分类与诊断标准第3 版中的标准；⑶新生儿正常；⑷产妇及家属知情同意，并经我院伦理委员会批准。排除标准：⑴产前有精神障碍者；⑵有妊娠期并发症、恶性肿瘤、免疫性系统疾病、内分泌疾病等；⑶有精神活性物质和非成瘾物质所致抑郁。

1.2 实验方法 BDNF 基因rs6265 位点多态性检测：分别采取每个受试者血 2ml，使用苯酚-氯仿法从全血中提取基因组DNA。通过 PCR-RFLP 检测rs6265 位点多态性。生工生物公司设计合成BDNF基因 rs6265 位点 PCR 引物：正向 5′-TTTCT CCCTACAGTTCCACCAG-3′； 反 向 5′- CTCCAAAG GCACTTGACTACTG-3′。PCR 反应体系：1μl DNA模板，1μl 上下游引物，PCR 反应条件：98℃ 3 min预变性,继以95℃变性1 min，60℃退火45 s,72℃延伸 1 min，共 35 个循环；72 ℃再延伸 8 min。将 PCR产物于1.5%琼脂糖凝胶中电泳分离, 通过凝胶成像系统确定扩增结果。扩增后，对扩增产物进行酶切, 酶切体系 10μl：PCR 产物 5μl，Buffer 3μl，E-co72I 限制性内切酶4 U，后用双蒸水补齐。在37℃条件下孵育2h，进行1.5% 琼脂糖凝胶电泳，最后用紫外凝胶成像系统对基因型进行分析判断。BDNF 基因rs6265 位点由酶切产生野生型CC、杂合型CT、纯合突变型TT 三种基因型。见图1。

图1 凝胶成像系统检测BDNF 基因rs6265 位点电泳图

叶酸水平检测：取各基因型观察组患者空腹时的肘静脉血4ml, 离心后分离血清, 在Roche E1 70 电化学发光分析仪上检测叶酸水平。

1.3 统计学处理 统计分析采用SPSS22.0 软件，计量资料采用表示，两组间比较使用t 检验，三组间比较采用方差分析, 两两比较采用LSD-t 检验； 计数资料比较使用χ2检验； 样本代表性采用Hardy-Weinberg 遗传平衡检验。检验水准α=0.05。

2 结果

2.1 两组一般资料比较 观察组和对照组一般资料比较差异无统计学意义（P＞0.05），见表1。

表1 观察组和对照组一般资料比较

2.2 两组BDNF 基因rs6265 位点多态性比较 观察组和对照组BDNF 基因rs6265 位点多态性符合Hardy-Weinberg 遗传平衡检验（P＞0.05）；两组 BDNF 基因rs6265 位点基因型构成比差异有统计学意义（χ2=10.742，P=0.005），且观察组 TT 及等位基因T 所占比例均明显低于对照组，CC 所占比例明显高于对照组，差异均有统计学意义（χ2=6.481，P=0.011；χ2=12.119，P=0.000；χ2=8.523，P=0.004）。见表2。

2.3 观察组不同基因型患者血清叶酸水平比较观察组基因型CC 患者血清叶酸水平明显低于基因型 TT 和 CT 患者(P＜0.05)；基因型 CT 和 TT 患者血清叶酸比较差异无统计学意义(P＞0.05)。见表3。

表2 观察组和对照组BDNF 基因rs6265 位点多态性比较

表3 观察组不同基因型患者血清叶酸水平比较

3 讨论

PPD 通常在出生后6 周内发生,大多数患者可在3 至6 个月内自行恢复,但有些可能持续1 年以上或发展为慢性抑郁症,而约40%的女性会在另一次妊娠或其他疾病中复发[8,9]。目前，PPD 尚缺乏统一的诊断标准和治疗方法, 临床上主要以预防为主。

BDNF 是一种神经营养因子，在神经元簇的生长，发育，存活和突触可塑性中起重要作用[10]，其分泌失调与情感障碍密切相关,有实验数据显示抑郁症患者血浆BDNF 浓度降低[11]。压力可以导致脑部某些区域（如海马）中BDNF 的表达显著降低，而长期抗抑郁治疗和电惊厥治疗可以增加BDNF 的表达[12]，因此，BDNF 与产后抑郁的发病机制可能存在一定的关联，但尚缺乏相关研究证实。

鉴于BDNF 在抑郁症的病理生理学中的作用,本研究对BDNF 基因rs6265 位点多态性与产后抑郁及血清叶酸水平的关系进行分析，结果发现，观察组BDNF 基因rs6265 位点基因型TT 和等位基因T 所占比例均显著低于对照组，CC 所占比例明显高于对照组,提示BDNF 基因rs6265 位点CC 基因可能与产后抑郁发生有关,具有C 等位基因的产妇可能比T 等位基因产妇具有更高的PPD 风险。而周英勇等[13]的研究发现，BDNF 基因rs6265 位点CC 基因突变为CT、TT 后，产后抑郁发生率显著减低，与本研究结果基本一致。故可以推测BDNF 基因rs6265 与产后抑郁的发生可能存在一定的关联。

流行病学和临床研究表明,低叶酸水平与抑郁症的发生显著相关,孕期补充叶酸可以预防产后抑郁症的出现[14]。黄志华等[15]的研究也发现血清叶酸水平与PDD显著相关。本研究结果显示CC 基因型患者的血清叶酸水平显著低于 TT 和 CT 基因型患者 （P＜0.05），而基因型CT 和TT 患者血清叶酸水平无显著性差异,提示叶酸水平升高可能通过促进BDNF基因rs6265 位点CC 基因突变为CT、TT，从而对产后抑郁起到保护作用。其机制可能与BDNF 基因rs6265 错义突变使蛋氨酸取代缬氨酸而提高BDNF 的分泌活性,而叶酸能促进蛋氨酸的合成，从而进一步提高BDNF 水平， 预防产后抑郁的发生有关。综上所述，BDNF 基因rs6265 位点多态性可能与产后抑郁易感性有关,同时可能与血清叶酸水平有一定关系。