QuEChERS方法在HPLC测定豇豆中灭蝇胺残留量的应用研究

赵馨

摘 要：为优化豇豆中灭蝇胺残留量检测的前处理方法。以豇豆作为基质，对QuEChERS方法与（NY/T 1725-2009 《蔬菜中灭蝇胺残留量的测定 高效液相色谱法》）的检验方法进行回收率试验比较;并根据单一变量原则，优化QuEChERS方法中的PSA、GCB两种净化剂使用量。结果表明：采用QuEChERS方法前处理的豇豆样品加标回收率为76.7%～80.3%，标准偏差为6.2%～8.7%，其回收率和精密度都能达到分析检测要求。QuEChERS方法最优的净化剂组合为无水硫酸镁900 mg+PSA 100 mg，采用此净化剂组合前处理的豇豆样品回收率为83.3%～86.7%，标准偏差为8.2%～11.5%。综上分析表明，QuEChERS前处理方法简单快速、准确可靠，既可满足豇豆中灭蝇胺残留量检测的技术要求，又可用于大量样品的快速检测。

关键词：豇豆;灭蝇胺;高效液相色谱法;QuEChERS方法

中图分类号：S436.43 文献标志码：A 文章编号：0253-2301（2020）08-0007-06

was carried out between the QuEChERS method and the test method in NY/T 1725-2009 ″Determination of cyromazine residues in vegetables by high performance liquid chromatography″. According to the principle of single variable， the usage of the two cleaning agents PSA and GCB in the QuEChERS method was optimized. The results showed that the standard recovery rate of cowpea samples pretreated with the QuEChERS method was 76.7%-80.3%， and the standard deviation was 6.2%-8.7%. The recovery and precision could both meet the requirements of analysis and detection. The optimal combination of cleaning agents in the QuEChERS method was that the anhydrous magnesium sulfate 900 mg+PSA 100 mg， and the recovery rate of cowpea samples pretreated with the combination of cleaning agents in the QuEChERS method was 83.3%- 86.7%， and the standard deviation was 8.2%-11.5%. In conclusion， the pretreatment method of QuEChERS was simple， rapid， accurate and reliable， which could not only meet the technical requirements for the detection of cyromazine residues in cowpeas， but also be used for the rapid detection of a large number of samples.

Key words： Cowpea; Cyromazine; High performance liquid chromatography; QuEChERS method

滅蝇胺是一种三嗪类化合物，具有内吸作用，属新型高效、低毒、含氮杂环类杀虫剂，目前广泛登记用于豇豆、菜豆、黄瓜、茄子等农作物，用于防治双翅目昆虫病虫害[1-6]。在相关食品抽查结果报告以及笔者日常检验工作中，豇豆中灭蝇胺残留量超限量值的情况时有发生[7]。因此，检测灭蝇胺残留情况保证食品安全具有重要作用。依据（GB 2763-2019《食品安全国家标准 食品中农药最大残留限量》）[8]的规定，灭蝇胺残留量指定的检验方法为（NY/T 1725-2009《蔬菜中灭蝇胺残留量的测定 高效液相色谱法》）[9]（以下简称标准方法），但该方法的前处理较为复杂，溶剂的使用量较大，不适用于大批量检测工作。

目前在蔬菜水果农药残留检测中，QuEChERS方法具有快速、高效、回收率高的优点，与色谱质谱联用技术配合，可以大大提高检验效率，被广泛应用于农药残留的检测工作中[10]。QuEChERS方法中，由N丙基硅烷（PSA）、C18、石墨炭黑（GCB）3种净化剂发挥着支持、吸附、净化的作用，待测农药在填料、样品基质和洗脱剂之间进行吸附与分配，最终达到提取与净化双重效果[11]。本研究以豇豆作为基质，对QuEChERS方法与标准方法进行回收率试验比较，并对QuEChERS方法的可行性进行评价;再根据单一变量原则，对不同组分的分散净化剂进行加标回收率对比试验，从回收率、净化效果两个方面综合分析，选择最佳的净化剂组分，从而达到优化灭蝇胺残留量检验方法的目的。

1 材料与方法

1.1 供试材料

材料为豇豆样品（经检验后的阴性留样）。试剂主要有氯化钠（分析纯）;石墨炭黑（GCB，分析纯）;乙酸铵（分析纯）;氨水（分析纯）;盐酸（分析纯）;乙腈（色谱纯）;甲醇（色谱纯）;硫酸镁（色谱纯）;乙二胺N丙基硅烷（PSA，色谱纯）。

2.3.1 GCB添加量对豇豆中灭蝇胺回收率的影响 由试验结果（表2）可知，QuEChERS前处理方法采用无水硫酸镁 900 mg+PSA 150 mg+GCB 0 mg净化剂组合的试样加标回收率为80.0%～84.7%，标准偏差为5.4%～7.4%;而采用无水硫酸镁 900 mg+PSA 150 mg+GCB 15 mg净化剂组合的试样加标回收率为76.7%～80.3%，标准偏差为6.2%～8.7%，回收率和精密度都能达到分析检测的要求。

净化效果方面，未加入GCB的试样溶液为淡绿色，加入GCB 15 mg试样溶液为淡黄色，说明试样加入GCB后能够吸附更多色素。但从加标试样溶液色谱图（图2a、2b）可以看出，添加GCB与未加GCB的色谱图中基线、峰宽、保留时间等没有明显差异，表明添加GCB含量对基质中杂质的净化能力没有明显差异，且吸附的色素对检验干扰有限。

综合以上分析，加入GCB可以去除豇豆基质中的部分色素，但未改善净化效果，而且对灭蝇胺也造成吸附损失，导致回收率降低。因此，在之后的试验处理过程中选择不添加GCB。

2.3.2 PSA不同用量对豇豆中灭蝇胺回收率的影响 由试验结果（表3）可知，采用净化剂组合无水硫酸镁900 mg+PSA 150 mg前处理的试样加标回收率为80.4%～84.7%，标准偏差为5.4%～7.4%;采用净化剂组合无水硫酸镁900 mg+PSA 100 mg前处理的试样加标回收率为83.3%～86.7%，标准偏差为5.9%～8.6%;采用净化剂无水硫酸镁900 mg+PSA 50 mg前处理的试样加标回收率为65.0%～66.7%，标准偏差为8.2%～11.5%。其中，采用净化剂组合无水硫酸镁900 mg+PSA 150 mg与无水硫酸镁900 mg+PSA 100 mg前处理方法的回收率和精密度均能达到分析检测的要求，而采用净化剂组合无水硫酸镁900 mg+PSA 50 mg前处理方法的回收率低于80%，且最低浓度0.3 mg·kg-1的测试值标准偏差大于10%。

净化效果方面，3种净化剂组合的试样溶液均为淡绿色，颜色差异不大。从加标试样溶液色谱图（图2a、图3a、图3b）可知，PSA可以去除部分色素，随着PSA使用量的增加，色素净化效果没有明显变化。但净化剂组合为无水硫酸镁 900 mg+PSA50 mg的保留时间偏移较大，即PSA使用量为50 mg时，杂质未能有效去除，对灭蝇胺保留时间产生影响。

综合以上分析表明，QuEChERS前处理方法采用PSA为净化剂可以去除豇豆基质部分的杂质和色素，当PSA使用量从50 mg增加到100 mg的加标回收率与净化效果明显改善;而当PSA使用量从100 mg增加到150 mg时的加标回收率与净化效果无明显变化。故采用无水硫酸镁900 mg+PSA100 mg的净化剂组合可以在满足净化要求的前提下，同时减少PSA使用量，节约成本。

3 结论

本研究以優化豇豆中灭蝇胺残留检测的前处理方法为目的，对QuEChERS以及（NY/T 1725-2009 《蔬菜中灭蝇胺残留量的测定 高效液相色谱法》）前处理方法进行比较分析，试验结果表明采用QuEChERS方法前处理的豇豆样品加标回收率为76.7%～80.3%，标准偏差为6.2%～8.7%，其回收率和精密度都能达到分析检测要求。以加标回收率和净化效果为评价标准，进一步对QuEChERS前处理方法中的PSA、GCA净化剂使用量进行优化，得出QuEChERS方法最优的净化剂组合为无水硫酸镁900 mg+PSA 100 mg，采用此净化剂组合前处理的豇豆样品回收率为83.3%～86.7%，标准偏差为8.2%～11.5%。本研究通过改进优化QuEChERS前处理方法，建立了豇豆灭蝇胺残留量的改进QuEChERS方法，该方法简单快速、准确可靠，既可满足豇豆中灭蝇胺残留的技术要求，又可用于大量样品的快速检测。

参考文献：

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（责任编辑：林玲娜）