仔猪PRRSV、PEDV 和猪链球菌混合感染的诊断与治疗

曾献良

（湖南省汨罗市农业农村局畜牧水产服务中心，湖南汨罗414401）

猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）又称为猪蓝耳病，其由猪繁殖与呼吸综合病毒（PRRSV）感染所引起，不同发育阶段猪群均可感染该病，但妊娠母猪和仔猪对该病最易感，其中妊娠母猪感染该病后可出现呼吸困难、精神沉郁等，妊娠后期则出现早产、流产或死胎等，且部分新生仔猪呼吸困难、运动失调等，并伴随高死亡率[1]。猪流行性腹泻病毒（PEDV）是导致仔猪腹泻的主要病原之一，发病仔猪临床症状以水样腹泻、呕吐等为特点，近年来PEDV 变异株在我国各地区广泛流行，导致发病哺乳仔猪出现高死亡率（80%～100%），造成经济损失巨大[2]。猪链球菌在猪场中十分常见，其感染猪群后可导致患畜出现不同临床症状，如脑炎、关节肿胀和败血症等，严重时可导致其死亡。该病原菌具有多种血清型，其中链球菌2 型在部分猪场为优势菌株，且可感染人，对人畜健康造成巨大的威胁[3-4]。

2019 年10 月初，湖南汨罗市某规模化猪场2周龄内仔猪发生疫情，其临床症状主要表现为水样腹泻、呕吐、呼吸困难等，仔猪群中发病率高达50%，且伴随高病死率。10 月中旬，受养殖户邀请，笔者前往该场进行临床与实验室诊断。

1 猪场发病情况

湖南汨罗市某规模化猪场饲养繁殖母猪约500 头，2019 年10 月初，该场某栏舍新生仔猪发生疫情，发病初期仅少量仔猪出现发热、腹泻、呼吸困难、咳嗽等症状，养殖户对发病仔猪肌肉注射氨基比林，但仔猪发病情况仍然没有改善，且大量发病仔猪死亡。据了解，该场仅对猪群免疫接种过猪瘟、口蹄疫和伪狂犬病疫苗。

2 病理变化

对2 头发病严重仔猪进行剖检，发现其腹股沟和颌下淋巴结肿大，且切面有丝状出血；肺脏、心脏被膜表面有纤维性渗出，且肺水肿明显，肺脏气管中有泡沫状液体；脾脏肿大，且边缘有坏死灶；肾脏表面有大量的出血点；小肠肠壁变薄，且肠系膜淋巴结肿大。

3 实验室诊断

3.1 细菌分离及鉴定

无菌采集病猪病变组织（淋巴结、肺脏、肾脏、脾脏和肠道），低温保存送至实验室进行检测。用无菌手术刀切取少量病变组织进行涂片染色，在光学显微镜下观察，可见短链状或成对的革兰氏阳性球菌。其后以灭菌接种环蘸取少量组织液接种于鲜血琼脂培养基表面，37℃恒温箱内培养48h，发现培养基表面可出现大小不一、湿润光滑的半透明菌落，结合染色镜检结果，可判定该菌株为猪链球菌。

3.2 药物敏感试验

用灭菌枪头挑取单一菌落打进装有液体培养基的玻璃试管中，在适合条件下进行扩菌。其后将获得的少量菌液进行稀释，涂布于普通营养琼脂培养基表面，待液面稍干燥后将含有不同抗生素的纸片贴在培养基表面，37℃培养24h，通过观察抑菌环大小判定该菌株对不同抗生素的耐药情况。结果发现，该菌株对头孢噻呋钠和氧氟沙星高度敏感；对恩诺沙星、青霉素、林可霉素、链霉素、阿莫西林等耐药。

3.3 病毒检测

分别将病猪的淋巴结、肺脏、脾脏、肾脏和肠道组织进行混合，将组织切碎后与灭菌PBS 溶液（1∶4）按比例进行添加，并匀浆研磨，将制备得到的悬液反复冻融3 次，其后高速离心获得上清液，取200 μL 上清液用组织DNA/RNA 提取试剂盒提取病原基因组，并将RNA 反转录为cDNA，采用PCR或RT-PCR 法对样品中是否存在PRRSV、猪伪狂犬病毒（PRV）、猪瘟病毒（CSFV）、猪圆环病毒（PCV2）、PEDV、猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）和猪德塔冠状病毒（PDCoV）进行检测。结果发现，在组织样品中检测出PEDV 和PRRSV 核酸阳性，未检出其它病原核酸。

3.4 诊断结果

根据发病仔猪临床症状、病理变化，结合实验室诊断结果，我们最终判定该场仔猪发病原因主要是PRRSV、PEDV 和猪链球菌混合感染。

4 防治措施

根据病原诊断结果，我们制定了以下防治措施：（1）对栏舍、用具和交通工具进行彻底清洗，其后将过氧乙酸进行稀释（1∶500）后带猪消毒，每日2 次；（2）在过道处铺撒生石灰，保持猪舍干燥，并提高仔猪猪舍温度；（3）对粪污和病死猪进行集中无害化处理，并严禁不同栏舍工作人员穿梭等；（4）对全场母猪群紧急免疫接种PEDV/TGEV 二联灭活疫苗；（5）在母猪饲料中添加适量比例黄芪多糖粉末（400～500 g/t），连续饲喂2 周；（6）在发病仔猪饮水中添加适量比例黄芪多糖、多维、葡萄糖和氯化钠，以补充电解质，恢复体液平衡；（7）在全场猪群饲料中添加头孢噻呋钠粉剂（400g/t），连续用药1 周；（8）对假定健康猪群紧急免疫接种PRRSV 灭活疫苗，并定期进行抗体水平监测。

实施以上防治措施3 周后电话回访，该场负责人表示猪群发病情况得到有效控制，生产成绩有较大的提高。

5 讨论

在生猪养殖过程中，仔猪出现腹泻、呼吸困难和体温升高等临床症状较为常见，但其致病因较为复杂，其中PCV2、PRV、PEDV、TGEV 等病原均可导致仔猪腹泻并死亡；而PRRSV、PCV2、副猪嗜血杆菌和链球菌等均可使仔猪出现呼吸困难、体温升高等，且在临床上不易区分。此外，多种病原混合感染使得疫病临床诊断更加困难。本文通过对2 头发病仔猪进行剖检，观察病理变化，同时采集病变组织进行实验室诊断，结果表明，该场仔猪发病是由PEDV、PRRSV 和猪链球菌混合感染所致，根据诊断结果进行具有针对性的治疗与防控，最终使该场疫情得到有效的控制，减少了养殖企业的经济损失。