雷 平,刘长松,陈 娴,王升平※,陈晓安,王 刚
(1.湖南省微生物研究院,湖南长沙410009;2.山东省临沂市牧旺兽药有限公司,山东临沂276000;3.湖南粒丰生物科技有限公司,湖南长沙410125)
鲜豆渣资源丰富,适合用于畜禽养殖,但由于含水量较高,夏秋高温季节,如不及时利用,极易发霉腐败变质,污染环境[1]。同时,鲜豆渣含有胰蛋白酶抑制素、致甲状腺肿素和凝血素等抗营养因子,抑制猪等单胃家畜的吸收利用[2]。而对于牛羊等反刍动物而言,豆渣可在瘤胃微生物的作用下,经过发酵分解,形成可利用的菌体蛋白、氨基酸和多肽等营养物质。因此,目前鲜豆渣多用于饲喂牛羊等反刍动物。
为了将豆渣实现饲用资源化利用,本研究采用枯草芽孢杆菌、酵母菌和乳酸菌三菌联合进行鲜豆渣发酵,并进行喂猪试验,取得了良好效果。
试验用复合益生菌制剂由湖南粒丰生物科技有限公司研制并提供,含活菌数为≥2×109CFU/mL。复合益生菌制剂主要成分为乳酸杆菌、枯草芽孢杆菌和酿酒酵母菌等[3]。发酵底物为山东金锣集团新鲜豆渣和玉米粉质量比9∶1 比例混合,发酵时将菌液按照质量比3%的比例添加到发酵底物中。发酵时间为3~7 天,饲料发酵3 天以上即可使用。饲料接种发酵液菌种混匀后使用尼龙袋包装,用绳子系紧袋口即可。
将90 头20 kg 左右的杜洛克×长白×大白杂交保育仔猪随机分成2 个处理,每个处理3 个重复,每个重复15 头仔猪。对照组A 以猪场饲喂的常规日粮为基础日粮,试验组B 用发酵豆渣替代10%基础日粮(10%发酵豆渣+90%常规日粮)。试验在临沂新程金锣牧业有限公司猪场进行。
常规日粮配方及营养水平如表1。
表1 试验日粮组成及营养水平
预试期7 天,进入正试期后两组分别喂相应日粮。自由采食,自由饮水,按猪场正常程序进行免疫。试验期30 天。
1.5.1 生产性能指标
①日增重:分别于试验的第一天和最后一天空腹称重,按照每栏总重和头数计算平均头重,根据平均头重的初重和末重计算平均日增重。
②采食量:每周记录各组的采食量,试验结束后结算各组消耗饲料,计算出平均日采食量。
③料重比:根据日增重和采食量计算。
1.5.2 粪便微生物检测:在试验后期采集粪样。采用平板稀释方法对样品中的乳酸菌、大肠杆菌和沙门氏菌进行计数。
(1)乳酸菌:称取粪样5g 左右,采用倍比稀释法,稀释至10-6梯度,用移液器分别吸取10-4~10-6梯度稀释液1 mL 加入无菌平皿中,再倾注约15 mL的MRS 培养基,37℃培养48h 后进行菌落计数[4]。
(2)大肠杆菌菌落计数:用移液器移取样品按照10-4~10-6梯度稀释,稀释液1mL 涂布接种于麦康凯培养基平皿上,37℃恒温培养箱中培养24 小时,选取粉红色或红色,表面光滑、凸起,边缘整齐不透明的菌落进行计数。
(3)沙门氏菌:用微量取液器分别吸取不同梯度的样品稀释液1.0mL 于培养血中,与冷却至45℃的SS 培养基混合,各稀释度3 次重复,倾注法进行菌落计数,37℃培养24 h,进行计数[5]。
1.5.3 腹泻指数
每日收集仔猪粪便测定水分含量,水分含量超过70%被认定为腹泻,腹泻率按照以前的研究方法进行统计,简而言之,仔猪腹泻率按照以下公式进行计算:
腹泻率(%)=(腹泻仔猪头数×腹泻天数)/(仔猪总头数×总试验天数)×100%
采用SAS 统计软件对数据进行T 检验统计分析。
新鲜豆渣发酵7 天后,乳酸菌含量为3.1×109CFU/g,枯草芽孢杆菌5.6×106CFU/g ,酵母菌6.0×107CFU/g。
从表2 可知,10%发酵豆渣替代常规日粮,平均日增重无明显变化,而平均日采食量显著高于对照组。腹泻指数显著降低。
表2 发酵豆渣对生长育肥猪生产性能的影响
在试验后期对两个处理组的试验猪只粪样进行了乳酸菌、大肠杆菌和沙门氏菌的活菌数检测。
由表3 可见,发酵豆渣显著提高粪便中的乳酸菌数量(P<0.05),降低粪便中大肠杆菌和沙门氏菌含量(P<0.05)。
表3 发酵豆渣对生长肥育猪粪便中微生物的影响
使用发酵豆渣替代10%基础日粮,没有显著改变仔猪的生长性能,但使用10%发酵豆渣能显著降低饲料生产成本,同时也解决了豆渣废弃污染环境的问题,一举两得。在采食量指标上,发酵豆渣组采食量显著提高,可能因为发酵豆渣含水量比较高(40%左右),相当于提高了整个饲料的含水量,降低了干物质含量,从而造成采食量升高。也有可能使用发酵豆渣,里面含有较多的益生菌,包括乳酸杆菌、酵母菌和枯草芽孢杆菌等,可以提高仔猪的采食量。添加10%发酵豆渣,显著提高了仔猪粪便中乳酸杆菌的含量,显著降低大肠杆菌和沙门氏菌等致病菌的含量,这主要是因为发酵豆渣中所含的益生菌所起的作用,而仔猪腹泻指数的显著降低也可能因为这个原因[6]。